本发明专利技术属于动物繁殖技术领域，具体为一种兔精液变温保存稀释液及其制备方法，本发明专利技术的稀释液由A液和B液混合而成，A液由双(2‑羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷5.0‑35.0g、柠檬酸0.5‑5.0g、卡那霉素0.01‑0.05g，加灭菌注射用水溶解，定容至100ml，分装，密封，低温灭菌后而得；B液为5％葡萄糖注射液；A液与B液，按照1:9至9:1的比例混合均匀，即得本稀释液，稀释液12℃时pH值为7.0。本发明专利技术的稀释液在5‑20℃变温环境下，精子保存时间达96‑120小时，在保存72小时，精子活力0.6以上，母兔受胎率80％以上。同时本发明专利技术的稀释液配置和储存简单，使用方便。
A diluent for rabbit semen preservation at variable temperature and its preparation
【技术实现步骤摘要】
一种兔精液变温保存稀释液及其制备方法
本专利技术属于动物繁殖
,具体为一种兔精液变温保存稀释液及其制备方法。
技术介绍
随着我国养兔业不断地发展，四同法(即同期发情、同期配种、同期产仔、同期出栏)的推广，我国逐渐从养兔大国走向养兔强国。但随着四同法的核心——兔人工授精技术的不断发展，其中兔精液保存已成为人工授精技术发展的瓶颈。国内外在兔精液液态保存技术方面对低温(5-8℃)或常温(15-18℃)的保存方法研究和设计较多，多为短期1-2天保存，从而限制了液态保存兔精液的使用和运输问题，且多为固态的稀释粉，需要经双重蒸馏水配置后使用，然而双蒸水非常规产品，需现用现制，费时费力，其方便性较差。因此开发研制出能在低温和常温的变温(5-20℃)条件下、保存期达到3-5天、且使用方便的稀释液，对推动兔人工授精技术的全面发展显得尤为重要，而且也对我国养兔业的发展具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术提供了一种兔精液变温保存的稀释液，该稀释液由A液和B液混合而成，为精子提供营养物质，维持酸碱环境和适当的渗透压，抑制细菌生长，且本专利技术的稀释液在低温时pH呈弱碱性，在常温时呈弱酸性，在5-20℃变温的环境中，大幅延长精子的保存时间，提高母兔的受胎率，同时在实际中使用方便。本专利技术采用的以下技术方案：一种兔精液变温保存稀释液，它由A液和B液混合而成。A液由双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷5.0-35.0g、柠檬酸0.5-5.0g、卡那霉素0.01-0.05g，加灭菌注射用水溶解，定容至100ml配置而成；B液为5％葡萄糖注射液；A液与B液，使用时按照1:9至9:1的比例混合而成本稀释液，12℃时pH值为7.0。优选的是，A液由双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷10.5g、柠檬酸1.6g、卡那霉素0.05g，加灭菌注射用水溶解，定容至100ml配置而成；B液为5％葡萄糖注射液；A液与B液，使用时按照1:9的比例混合而成本稀释液，12℃时pH值为7.0。本专利技术还提供一种上述兔精液变温保存稀释液的制备方法，包括以下步骤：(1)A液：称取双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷5.0-35.0g、柠檬酸0.5-5.0g、卡那霉素0.01-0.05g，将上述原料加灭菌注射用水溶解，定容至100ml。将上述溶液摇匀，分装10-100ml/瓶，密封，水浴54℃-63℃加热1-3h低温灭菌即可得A液；(2)B液为5％葡萄糖注射液；(3)使用时A液与B液，按照1:9至9:1的比例混合均匀，即得到本稀释液，稀释液12℃时pH值为7.0。本专利技术具有以下有益效果：本专利技术的稀释液对兔精液可实现低温和常温5-20℃变温保存，达到3-5天的中期保存效果。保存的精液在变温的条件下，在保存72小时候后，精子活力在0.6以上，母兔受胎率在80％以上。同时本专利技术的稀释液配置和储存简单，使用方便，节省时间。具体实施方式本专利技术所述的一种兔精液变温保存稀释液，它由A液和B液混合而成，A液由以下原料制成：双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷5.0-35.0g、柠檬酸0.5-5.0g、卡那霉素0.01-0.05g，加灭菌注射用水溶解，定容至100ml配置成A液；B液为5％葡萄糖注射液；A液与B液，按照1:9至9:1的比例混合而成本稀释液，12℃时pH值为7.0。以下通过具体的实施例一对本专利技术的技术方案作进一步说明：实施例一，一种兔精液变温保存稀释液，它由A液和B液混合而成，A液由双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷10.5g、柠檬酸1.6g、卡那霉素0.05g，加灭菌注射用水溶解，定容至100ml配置而成；B液为5％葡萄糖注射液；A液与B液，使用时按照1:9的比例混合而成本稀释液，12℃时pH值为7.0。制备步骤为：(1)A液：称取双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷10.5g、柠檬酸1.6g、卡那霉素0.05g，将上述原料加灭菌注射用水溶解，定容至100ml，将上述溶液摇匀，分装10ml/瓶，密封，水浴54℃加热3h低温灭菌即可得A液；(2)B液为5％葡萄糖注射液；(3)使用时A液与B液，按照1:9的比例混合均匀，即可得到本稀释液，稀释液12℃时pH值为7.0。将上述的得到的稀释液缓慢加入到公兔精液中，根据兔精液稀释标准，稀释至5-15倍，将稀释好的精液在5-20℃条件下，可使精子存活时间延长至96-120小时，72小时候后，精子活力在0.6以上。在兔人工授精时，将用上述稀释液稀释后的合格精液，按0.5ml/只，输入到发情母兔的子宫，并注射促排3号，即完成人工授精。使用本专利技术的稀释液稀释公兔精液，对150只母兔进行人工授精，受胎121只，受胎率为80.7％。本专利技术的稀释液在低温精子半休眠时，pH呈弱碱性，可以中和精子代谢在周边的有害酸性物质；在常温精子运动增强时，pH呈弱酸性，可以抑制精子的运动；使得精子的保存时间大幅提高。在不同温度时的pH值如下：温度(℃)3.24.85.76.28.712.015.818.421.324.9pH7.57.47.37.27.17.06.96.86.76.6本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种兔精液变温保存稀释液，其特征是：它由A液和B液混合而成，A液包括以下成分：双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷5.0-35.0g、柠檬酸0.5-5.0g、卡那霉素0.01-0.05g，加灭菌注射用水溶解，定容至100ml配置而成，B液为5％葡萄糖注射液，A液与B液，按照1:9至9:1的比例混合而成本稀释液，稀释液12℃时pH值为7.0。/n
【技术特征摘要】
1.一种兔精液变温保存稀释液，其特征是：它由A液和B液混合而成，A液包括以下成分：双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷5.0-35.0g、柠檬酸0.5-5.0g、卡那霉素0.01-0.05g，加灭菌注射用水溶解，定容至100ml配置而成，B液为5％葡萄糖注射液，A液与B液，按照1:9至9:1的比例混合而成本稀释液，稀释液12℃时pH值为7.0。
2.根据权利要求1所述的兔精液变温保存稀释液，其特征在于：它由A液和B液混合而成，A液包括以下成分：双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷10.5g、柠檬酸1.6g、卡那霉素0.05g，加灭菌注射用水溶解，定容至100ml配置而成，B液为5％葡萄糖注射液，A液与B液，使用时按照1：9的比例混合而成本稀释液，12℃时pH值为7.0。
3.根据权利要求1所述的兔精液变温保存稀释液的制备方法，其特征在于：(1)A液：称取双(2-羟乙基...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭普谦，谢立明，
申请(专利权)人：杨凌怡悦农牧科技有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。