基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法，包括步骤：(1)取烟草样品加入纯水浸润，再加入有机试剂，漩涡振荡、离心后，取上层液于新离心管中，依次加入净化剂和盐酸，漩涡振荡、离心后，取有机层吹干，加入纯水复溶，得到待测样品液；(2)将所述待测样品液与团聚剂、纳米金溶胶混合均匀后，通过便携式拉曼光谱仪采集混合液的表面增强拉曼光谱图；(3)分析测得的表面增强拉曼光谱图，获得三唑酮、三唑醇的检测结果。该检测方法无需依赖大型设备，采用便携式拉曼光谱仪结合简单快速前处理技术，检测成本低，适用于现场批量样品的快速筛查。

【技术实现步骤摘要】
基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法
本专利技术属于三唑酮、三唑醇的检测领域，具体涉及一种基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法。
技术介绍
三唑酮是一种高效、低毒、内吸性强的广谱三唑类杀菌剂，主要用于防治植物真菌病毒如锈病、白粉病等，其在农业生产中使用非常广泛，登记作物包括烟草、小麦、水稻、玉米、花生、番茄、苹果树等。三唑醇为三唑酮的代谢产物，其杀菌活性高于三唑酮，已被作为一种单独药剂在多种作物上登记使用。研究发现，三唑酮及三唑醇会产生神经、生殖和基因毒性，并有致癌和致畸性。为了保证两种农药的科学合理使用，中国等很多国家已明确限定了其在食品及农作物中的最高残留限量，中国烟草总公司相应发布了其在烟叶中的最大残留限量标准。因此，对三唑酮、三唑醇残留量的检测特别是快速检测具有重要意义。目前，烟草及烟草制品中三唑酮和三唑醇的检测方法主要有气相色谱法、液相色谱—串联质谱法、气相色谱—串联质谱法等。如专利技术专利CN103698462B中公开了一种液相色谱—串联质谱检测烟草中农药残留的方法，和专利技术专利CN104458947B公开了一种气相色谱—质谱联用仪检测烟草或烟草制品中农药残留的方法，这些方法具有准确性好、灵敏度高、可以同时测定多种农药残留等优势，但所需仪器设备昂贵、需配备专业技术人员，而且样品前处理复杂、检测时间长。拉曼光谱(Ramanspectra)分析法是基于印度科学家C.V.拉曼(Raman)所发现的拉曼散射效应，对与入射光频率不同的散射光谱进行分析以得到分子振动、转动信息，并应用于分子结构研究的一种分析方法。但因大多数分子通常只有极小的散射截面，导致拉曼散射的信号都非常弱，需要较高的浓度才能获得清晰的拉曼图谱，极大地限制了拉曼光谱在低浓度靶物质水平分析的实际应用。而20世纪70年代发现的表面增强拉曼散射(surfaceenhancedRamanscattering，SERS)效应则可以实现拉曼信号的增强，克服了常规拉曼信号弱的缺点，可在低浓度待测物质甚至是单分子水平上获得高灵敏度的结构信息，具有分析速度快、检测成本低、操作简便等特点，成为一种快速发展的散射光谱技术，是现阶段的研究热点之一。目前利用SERS进行农药残留的分析检测也已引起了越来越多的关注。但烟草体系本身的复杂性以及快速、简便、低成本样品前处理的匹配性需求为烟草样品农药残留的SERS快速检测带来了一定的挑战。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法，该检测方法采用便携式拉曼光谱仪，并结合快速、简便、低成本的烟草样品前处理技术，适用于现场批量样品的快速筛查。本专利技术的技术方案为：一种基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法，包括以下步骤：(1)取烟草样品加入纯水浸润，再加入有机试剂，漩涡振荡、离心后，取上层液于新离心管中，依次加入净化剂和盐酸，漩涡振荡、离心后，取有机层吹干，加入纯水复溶，得到待测样品液；(2)将所述待测样品液与团聚剂、纳米金溶胶混合均匀后，通过便携式拉曼光谱仪采集混合液的表面增强拉曼光谱图；(3)分析测得的表面增强拉曼光谱图，获得三唑酮、三唑醇的检测结果。为了保证三唑酮、三唑醇的充分溶出，步骤(1)中，将烟草样品按照1：5～20的比例与纯水混合后，再按照与烟草样品1：2～10的比例加入有机溶剂，漩涡振荡0.5～5min，并于8000～10000r/min离心1～2min。优选地，烟草样品、纯水与有机溶剂的混合比例为1：7～13：4～7。所述有机溶剂包括乙酸乙酯、环己烷、石油醚、二氯甲烷、乙醚或三氯甲烷中的一种。为了除去烟草中色素、酚类、有机酸类等杂质的干扰，步骤(1)中，使用聚酰胺作为净化剂，每克烟草样品中所述聚酰胺的用量为0～0.5g，1mol/L盐酸的用量为10～200μL，漩涡振荡0.5～1.5min，并于8000～10000r/min离心1～2min。优选地，聚酰胺的用量为0.05～0.3g，加入1mol/L盐酸的量为40～80μL。为了调节体系离子强度，使金纳米粒子获得最优增强能力，步骤(2)中，所述团聚剂包括氯化钠、氯化钾、硫酸钠、硫酸镁、盐酸、碘化钾中的一种或几种混合，优选地，团聚剂为1mol/L盐酸与1mol/L硫酸钠按体积比为1：2～5混合。步骤(2)中，所述纳米金溶胶颗粒粒径为20～150nm，综合体系中纳米金溶胶的增强能力、形貌尺寸的合成可控性以及体系稳定性等，优选地，纳米金溶胶颗粒粒径为55～75nm。步骤(2)中，所述待测样品液、团聚剂、纳米金溶胶的体积比为1：0.1～0.6：0.8～1.5。优选地，待测样品液、团聚剂、纳米金溶胶的体积比为1：0.1～0.3：0.9～1.2。步骤(2)中，所述便携式拉曼光谱仪参数为激发光源785nm，激发功率为50～500mW，扫描时间为100～10000ms，优选地，激发功率为500mw，扫描时间5000ms。步骤(3)中，将所采集到的样品表面增强拉曼光谱与三唑酮、三唑醇标准品的表面增强拉曼图谱对比，根据特征峰便可判断样品中是否含有三唑酮和三唑醇。其中，三唑醇的表面增强拉曼特征峰：536cm-1、632cm-1、745cm-1、862cm-1、1012cm-1、1091cm-1、1221cm-1；三唑酮的表面增强拉曼特征峰：589cm-1、641cm-1、830cm-1、987cm-1、1091cm-1、1221cm-1。与现有技术相比，本专利技术具有的有益效果为：本专利技术提供的基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法，烟草样品前处理步骤简单、操作方便、快速高效、成本低廉、有机试剂用量少，且无需依赖大型设备，适用于现场批量样品的快速筛查。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图做简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动前提下，还可以根据这些附图获得其他附图。图1为金纳米粒子的扫描电子显微镜图；图2为三唑酮标液的表面增强拉曼光谱和固体拉曼光谱，其中a、b、c、d、e分别为0、0.01、0.05、0.1、1mg/L三唑酮标液的表面增强拉曼光谱，f为三唑酮固体拉曼光谱；图3为三唑醇标液的表面增强拉曼光谱和固体拉曼光谱，其中a、b、c、d分别为0、0.05、0.1、1mg/L三唑醇标液的表面增强拉曼光谱，e为三唑醇固体拉曼光谱；图4为烟草样品中三唑醇的表面增强拉曼图谱，其中a为烟草空白样品提取液的表面增强拉曼光谱，b、c、d分别为加标1、5、10μg/g三唑醇的烟草样品提取液表面增强拉曼光谱，e为三唑醇标准品表面增强拉曼光谱；图5为烟草样品中三唑酮的表面增强拉曼图谱，其中a为烟草空白样品提取液的表面增强拉曼光谱，b、c、d分别为加标1、5、10μg/g三唑酮的烟草样品提取液表面增强拉曼本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法，包括以下步骤：/n(1)取烟草样品加入纯水浸润，再加入有机试剂，漩涡振荡、离心后，取上层液于新离心管中，依次加入净化剂和盐酸，漩涡振荡、离心后，取有机层吹干，加入纯水复溶，得到待测样品液；/n(2)将所述待测样品液与团聚剂、纳米金溶胶混合均匀后，通过便携式拉曼光谱仪采集混合液的表面增强拉曼光谱图；/n(3)分析测得的表面增强拉曼光谱图，获得三唑酮、三唑醇的检测结果。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法，包括以下步骤：
(1)取烟草样品加入纯水浸润，再加入有机试剂，漩涡振荡、离心后，取上层液于新离心管中，依次加入净化剂和盐酸，漩涡振荡、离心后，取有机层吹干，加入纯水复溶，得到待测样品液；
(2)将所述待测样品液与团聚剂、纳米金溶胶混合均匀后，通过便携式拉曼光谱仪采集混合液的表面增强拉曼光谱图；
(3)分析测得的表面增强拉曼光谱图，获得三唑酮、三唑醇的检测结果。


2.如权利要求1所述的基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，将烟草样品按照1：5～20的比例与纯水混合后，再按照与烟草样品1：2～10的比例加入有机溶剂，漩涡振荡0.5～5min，并于8000～10000r/min离心1～2min。


3.如权利要求1所述的基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法，其特征在于，烟草样品、纯水与有机溶剂的混合比例为1：7～13：4～7。


4.如权利要求1所述的基于表面增强拉曼光谱的烟草中三唑酮、三唑醇的检测方法，其特征在于，所述有机溶剂包括乙酸乙酯、环己烷、石油醚、二氯甲烷、乙醚或三氯甲烷中的一种。


5.如权利要求1所述的基于表...

【专利技术属性】
技术研发人员：李霞，杨君，陈晓水，尹洁，项波卡，黄艺伟，温宝英，陆明华，周国俊，李剑锋，
申请(专利权)人：浙江中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33