结直肠癌的诊断性信息检测系统、方法、质谱检测装置制造方法及图纸

本发明专利技术属于医疗器械技术领域，公开了一种结直肠癌的诊断性信息检测系统、方法、质谱检测装置，采集清晨空腹外周血3ml于无抗凝剂真空干燥管，先在室温下放置1.5h，然后在室温下用3000g转速离心30min，取上层血清，并保存在‑80℃冰柜；对采集的血清样品进行磁珠预处理及蛋白的提取；室温干燥后将靶板放入质谱仪进行飞行时间质谱分析，采用FleXContro1 3.0软件进行标准品校正后开始样本检测。本发明专利技术结构简单，采用了质谱检测的方法对血液进行质谱检测，并根据质谱检测的图谱结果进行图谱分析，可以快速和高通量检测不同病理状态下不同标本的蛋白表达差异，灵敏度高，可进行临床使用。

Diagnostic information detection system, method and mass spectrometer for colorectal cancer

【技术实现步骤摘要】
结直肠癌的诊断性信息检测系统、方法、质谱检测装置
本专利技术属于医疗器械
，尤其涉及一种结直肠癌的诊断性信息检测系统、方法、质谱检测装置。
技术介绍
目前，结直肠癌，也称为大肠癌，包括结肠癌和直肠癌，是全世界范围内常见的消化道恶性肿瘤之一。近二十年来，随着生活水平的不断提高，生活方式及饮食习惯结构的改变，我国结直肠癌的发病率和死亡率均呈现明显的上升趋势。我国结直肠癌的疾病负担不断增加，城市高于农村，男性高于女性，已成为严重威胁到居民健康的重大公共卫生问题。为了快速检测结直肠癌，结直肠癌的诊断性信息检测系统发挥着关键性的作用。但是现有的结直肠癌的诊断性信息检测系统在检测过程中，检测样本易产生错动，影响检测的结果。同时现有的结直肠癌的诊断性信息检测系统在移动过程中，依靠人力进行搬动，降低了相应的工作效率。通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：(1)现有的结直肠癌的诊断性信息检测系统在检测过程中，检测样本易产生错动，影响检测的结果。(2)现有的结直肠癌的诊断性信息检测系统在移动过程中，依靠人力进行搬动，降低了相应的工作效率。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种结直肠癌的诊断性信息检测系统、方法、质谱检测装置。本专利技术是这样实现的，一种结直肠癌的诊断性信息检测系统，所述结直肠癌的诊断性信息检测方法包括：步骤一，采集清晨空腹外周血3ml于无抗凝剂真空干燥管，先在室温下放置1.5h，然后在室温下用3000g转速离心30min，取上层血清，并保存在-80℃冰柜；步骤二，对采集的血清样品进行磁珠预处理及蛋白的提取；步骤三，室温干燥后将靶板放入质谱仪进行飞行时间质谱分析，采用FleXContro13.0软件进行标准品校正后开始样本检测；所述步骤二中血清样品进行磁珠预处理及蛋白提取的方法，具体包括：(1)轻摇磁珠1min，得到一个均匀的磁珠溶液；(2)取5μl磁珠放于200μlPCR管中，并将PCR管放于磁珠分离器，将PCR管在磁珠分离器相邻两孔间移动10～15次；(3)在磁珠分离器上停留，使磁珠贴壁1min，液体清澈后弃上清液；(4)重复(2)～(3)步骤两次；(5)向PCR管中加入磁珠结合缓冲液使磁珠重新悬浮，再加5μl血清样品，用加样枪小心打吸至少10次，混匀；(6)将磁珠贴壁2min，将上清液移入干净的离心管；(7)加5μl磁珠稳定液至离心管并混匀，离心提取。进一步，所述结直肠癌的诊断性信息检测系统的检测方法中对进行质谱分析的血清总蛋白要求如下：将提取的蛋白多肽用于直接质谱检测或者冻存于-20℃冰箱，24h之内质谱分析。进一步，所述步骤三中靶板的制作方法如下：将离心分离收集得到的蛋白样品1μl与10μl的基质α-氰基-4-羟基肉桂酸混匀，取1μl在An-chorchip靶板上，每个样本重复3个复孔。进一步，所述步骤三中质谱仪进行飞行时间质谱分析的方法如下：每个样本共450次激光打靶生成质谱图，激光打靶5次点靶，每次打靶3×30次，生成质谱图获得由不同质核比m/z组成的蛋白多肽图谱。进一步，所述步骤三中采用FleXContro13.0软件进行标准品校正后开始样本检测的样本检测的方法，具体如下：1)将质谱仪分析获得的不同质核比(m/z)组成的蛋白多肽图谱进行分类；2)质核比差别在0.1％范围内的蛋白峰被认为代表相同的肽；3)运用BioExplorer软件对蛋白多肽图谱数据进行分析，得出检测结果。本专利技术的另一目的在于提供一种实施所述结直肠癌的诊断性信息检测方法的结直肠癌的诊断性信息检测系统，所述结直肠癌的诊断性信息检测系统包括：血液样本处理模块，与中央控制模块连接，包括无抗凝剂真空干燥管、离心机、冰柜，用于对采集的血液进行离心处理，并进行冷冻备用；血清总蛋白预处理提取模块，与中央控制模块连接，包括磁珠分离器、PCR管、加样枪，用于通过磁珠分离器对采集的血清样品进行预处理和蛋白的提取；样品收集模块，与中央控制模块连接，包括电动伸缩杆、标本入口、标本放置架、标本放置台，用于对标本的收集，并将标准传输到飞行时间质谱仪中；质谱分析模块，与中央控制模块连接，包括飞行时间质谱仪，用于对采集的血清总蛋白进行质谱分析；电源模块，与血液样本处理模块、血清总蛋白预处理提取模块、样品收集模块、质谱分析模块、中央控制模块连接，用于对各模块的正常运行提供电力支持；中央控制模块，与血液样本处理模块、血清总蛋白预处理提取模块、样品收集模块、质谱分析模块、电源模块，用于调控各模块的的正常有序运转。本专利技术的另一目的在于提供一种搭载所述结直肠癌的诊断性信息检测系统的质谱检测装置，所述的质谱检测装置设置有：飞行时间质谱仪；飞行时间质谱仪侧面通过螺栓固定有蓄电池，飞行时间质谱仪上端通过销轴与上盖连接；飞行时间质谱仪正面开有标本入口，标本入口内部设置有标本放置架；标本放置架设置有电动伸缩杆，电动伸缩杆端部通过螺栓固定有标本放置台，标本放置台上端通过螺栓固定有夹扣。进一步，所述飞行时间质谱仪下端设置有底座，底座通过销轴固定有开关门；底座下端通过螺栓固定有万向轮，万向轮上设置有刹车片。进一步，所述电动伸缩杆设置有伸缩外筒，伸缩外筒套接有伸缩内杆；伸缩外筒通过螺栓固定有转动电机。进一步，所述转动电机输出轴通过连接键与齿轮连接，伸缩内杆左端设置有直齿，直齿与齿轮线接触；所述飞行时间质谱仪外侧通过螺栓固定有推手，推手上设置有防滑垫。结合上述的所有技术方案，本专利技术所具备的优点及积极效果为：(1)本专利技术结构简单，采用了质谱检测的方法对血液进行质谱检测，并根据质谱检测的图谱结果进行图谱分析，可以快速和高通量检测不同病理状态下不同标本的蛋白表达差异，灵敏度高，可进行临床使用。(2)本专利技术公开的提取的蛋白多肽的存储方法及时间可使蛋白多肽保持活性，避免影响检测结果。(3)本专利技术公开的靶板的制作方法更加便于飞行质谱仪的检测，提高检测效率和精度。(4)本专利技术提供的飞行时间质谱分析的方法可使生成的质谱图更为精确。(5)本专利技术提供的样本检测方法可进行处理和标记原始质谱图，分析结果更为精确；(6)本专利技术将荧光标记的样本放置在夹扣上，通过电动伸缩杆，使荧光标记的样本进入到飞行时间质谱仪中，进行结直肠癌的检测；本专利技术通过销轴固定有上盖，方便对飞行时间质谱仪内部进行维修；通过设置有夹扣，防止荧光标记的样本出现错动。(7)本专利技术设置的刹车片可以将飞行时间质谱仪进行有效固定。(8)本专利技术设置的转动电机可以实现检测样本的伸进和伸出。(9)本专利技术设置的直齿与齿轮可使检测样本的进出更为平稳，避免出现因震动而产生样本掉落的情况。(10)本专利技术通过在推手上设置有防滑垫，可以避免手部出现打滑的现象。附图说明图本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种结直肠癌的诊断性信息检测系统，其特征在于，所述结直肠癌的诊断性信息检测方法包括：/n步骤一，采集清晨空腹外周血3ml于无抗凝剂真空干燥管，先在室温下放置1.5h，然后在室温下用3000g转速离心30min，取上层血清，并保存在-80℃冰柜；/n步骤二，对采集的血清样品进行磁珠预处理及蛋白的提取；/n步骤三，室温干燥后将靶板放入质谱仪进行飞行时间质谱分析，采用FleXContro13.0软件进行标准品校正后开始样本检测；/n所述步骤二中血清样品进行磁珠预处理及蛋白提取的方法，具体包括：/n(1)轻摇磁珠1min，得到一个均匀的磁珠溶液；/n(2)取5μl磁珠放于200μlPCR管中，并将PCR管放于磁珠分离器，将PCR管在磁珠分离器相邻两孔间移动10～15次；/n(3)在磁珠分离器上停留，使磁珠贴壁1min，液体清澈后弃上清液；/n(4)重复(2)～(3)步骤两次；/n(5)向PCR管中加入磁珠结合缓冲液使磁珠重新悬浮，再加5μl血清样品，用加样枪小心打吸至少10次，混匀；/n(6)将磁珠贴壁2min，将上清液移入干净的离心管；/n(7)加5μl磁珠稳定液至离心管并混匀，离心提取。/n...

【技术特征摘要】
1.一种结直肠癌的诊断性信息检测系统，其特征在于，所述结直肠癌的诊断性信息检测方法包括：
步骤一，采集清晨空腹外周血3ml于无抗凝剂真空干燥管，先在室温下放置1.5h，然后在室温下用3000g转速离心30min，取上层血清，并保存在-80℃冰柜；
步骤二，对采集的血清样品进行磁珠预处理及蛋白的提取；
步骤三，室温干燥后将靶板放入质谱仪进行飞行时间质谱分析，采用FleXContro13.0软件进行标准品校正后开始样本检测；
所述步骤二中血清样品进行磁珠预处理及蛋白提取的方法，具体包括：
(1)轻摇磁珠1min，得到一个均匀的磁珠溶液；
(2)取5μl磁珠放于200μlPCR管中，并将PCR管放于磁珠分离器，将PCR管在磁珠分离器相邻两孔间移动10～15次；
(3)在磁珠分离器上停留，使磁珠贴壁1min，液体清澈后弃上清液；
(4)重复(2)～(3)步骤两次；
(5)向PCR管中加入磁珠结合缓冲液使磁珠重新悬浮，再加5μl血清样品，用加样枪小心打吸至少10次，混匀；
(6)将磁珠贴壁2min，将上清液移入干净的离心管；
(7)加5μl磁珠稳定液至离心管并混匀，离心提取。


2.如权利要求1所述的结直肠癌的诊断性信息检测方法，其特征在于，所述结直肠癌的诊断性信息检测系统的检测方法中对进行质谱分析的血清总蛋白要求如下：将提取的蛋白多肽用于直接质谱检测或者冻存于-20℃冰箱，24h之内质谱分析。


3.如权利要求1所述的结直肠癌的诊断性信息检测方法，其特征在于，所述步骤三中靶板的制作方法如下：将离心分离收集得到的蛋白样品1μl与10μl的基质α-氰基-4-羟基肉桂酸混匀，取1μl在An-chorchip靶板上，每个样本重复3个复孔。


4.如权利要求1所述的结直肠癌的诊断性信息检测方法，其特征在于，所述步骤三中质谱仪进行飞行时间质谱分析的方法如下：每个样本共450次激光打靶生成质谱图，激光打靶5次点靶，每次打靶3×30次，生成质谱图获得由不同质核比m/z组成的蛋白多肽图谱。


5.如权利要求1所述的结直肠癌的诊断性信息检测方法，其特征在于，所述步骤三中采用FleXContro13.0软件进行标准品校正后开始样本检测的样本检测的方法，具体如下：
1)将质谱仪分析获得的不同质核比(m/z)组成的蛋白多肽图谱进行分类；
2)...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨忠思，马维娟，邢晓明，
申请(专利权)人：杨忠思，
类型：发明
国别省市：山东;37