诃子和绒毛诃子药材特征图谱的构建方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种诃子和绒毛诃子药材特征图谱的构建方法和应用。诃子药材特征图谱的构建方法包括以下步骤：以没食子酸、没食子酸乙酯、柯里拉京、诃藜勒酸、诃子酸和诃子次酸为对照品，制备对照品溶液；取诃子药材，加溶剂溶解，超声提取，提取液过滤，取续滤液，得诃子供试品溶液；对所述对照品溶液、诃子供试品溶液分别进行超高效液相色谱检测；所述超高效液相色谱的色谱条件包括：流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.1％～0.3％的磷酸水溶液，洗脱方式为梯度洗脱。本发明专利技术为诃子(统称)药材质量控制及评价提供较为全面、有效和快速的方法。

Construction method and application of characteristic Atlas of Terminalia chebula and Terminalia villosa

【技术实现步骤摘要】
诃子和绒毛诃子药材特征图谱的构建方法和应用
本专利技术涉及药物分析和药物质量控制的
，特别是涉及诃子和绒毛诃子药材特征图谱的构建方法和应用。
技术介绍
诃子(统称)是中药的常用药，也是藏药、蒙药等民族药的常用药，据2015年版《中国药典》第一部记载，诃子(统称)为使君子科植物诃子TerminaliachebulaRetz.或绒毛诃子TerminaliachebulaRetz.var.tomentellaKurt.的干燥成熟果实。诃子(统称)性苦、酸、涩，平，归肺、大肠经。具有涩肠止泻，敛肺止咳，降火利咽的功效，临床用于久泻久痢，便血脱肛，肺虚喘咳，久嗽不止，咽痛音哑等症。诃子(统称)含有多酚类，黄酮类、多糖类、萜类和甾醇类等多种化学成分，其中含量最多的是鞣质类，现代药理研究表明诃子(统称)的药理作用主要有抑菌、抗病毒、抗氧化、抗诱变、抗癌、止泻、强心等。目前，有关诃子(统称)的文献研究多以产地研究为主，与基原相关的研究较少。2015年版《中国药典》收载了该品种的两个基原，在性状上，并未对两个基原进行区分。两种基原的诃子(统称)药材目前在临床应用上并未作区分，两者的质量是否存在差异尚缺乏研究，因此从提高药材质量和确保临床用药安全提供参考依据出发，有必要对诃子与绒毛诃子的质量进行对比研究。
技术实现思路
基于此，本专利技术提供一种诃子和绒毛诃子药材特征图谱的构建方法，采用UPLC(超高效液相色谱)建立了诃子及绒毛诃子药材的特征图谱，结合相似度评价、聚类分析、主成分分析等方法，挖掘特征图谱中蕴含的信息，比较不同基原诃子(统称)样品的差异，寻找区分不同基原诃子(统称)的标志性成分，为诃子(统称)药材质量控制及评价提供较为全面、有效和快速的方法。本专利技术所述的诃子药材特征图谱的构建方法的具体技术方案为：一种诃子药材特征图谱的构建方法，包括以下步骤：以没食子酸、没食子酸乙酯、柯里拉京、诃藜勒酸、诃子酸和诃子次酸为对照品，制备对照品溶液；取诃子药材，加溶剂溶解，超声提取，提取液过滤，取续滤液，得诃子供试品溶液；对所述对照品溶液、诃子供试品溶液分别进行超高效液相色谱检测；所述超高效液相色谱的色谱条件包括：流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.1％～0.3％的磷酸水溶液，洗脱方式为梯度洗脱。在一些优选的实施例中，流动相B为体积分数为0.2％的磷酸水溶液在一些优选的实施例中，所述梯度洗脱包括如下程序：0min～3min，流动相A保持体积百分比为0％，流动相B保持体积百分比为100％；3min～5min，流动相A的体积百分比由0％上升至3％，流动相B的体积百分比由100％下降至97％；5min～12min，流动相A的体积百分比由3％上升至10％，流动相B的体积百分比由97％下降至90％；12min～20min，流动相A保持体积百分比为10％，流动相B保持体积百分比为90％；20min～25min，流动相A的体积百分比由10％上升至14％，流动相B的体积百分比由90％下降至86％；25min～35min，流动相A的体积百分比由14％上升至17％，流动相B的体积百分比由86％下降至83％；35min～40min，流动相A的体积百分比由17％上升至21％，流动相B的体积百分比由83％下降至79％；40min～45min，流动相A的体积百分比由21％上升至60％，流动相B的体积百分比由79％下降至40％；45min～50min，流动相A保持体积百分比为60％，流动相B保持体积百分比为40％。在一些优选的实施例中，所述超高效液相色谱的色谱条件包括：柱温为28℃～32℃；流速为0.33mL/min～0.37mL/min；检测波长为250nm～290nm。在一些优选的实施例中，所述超高效液相色谱的色谱条件包括：柱温为30℃；流速为0.35mL/min；检测波长为270nm。在一些优选的实施例中，所述溶剂为体积分数为60％～80％的甲醇水溶液。在一些优选的实施例中，所述溶剂为体积分数为70％的甲醇水溶液。在一些优选的实施例中，所述超声处理的时间为20min～40min。在一些优选的实施例中，所述超声处理的时间为30min。在一些优选的实施例中，所述对照品溶液包括混合对照品溶液和诃子次酸对照品溶液；所述混合对照品溶液为没食子酸对照品溶液、没食子酸乙酯对照品溶液、柯里拉京对照品溶液、诃藜勒酸对照品溶液和诃子酸对照品溶液的混合溶液。在一些优选的实施例中，所述诃子的特征图谱确定具有9个共有峰，其中6个峰应分别与相应对照品参照物峰的保留时间相对应；与柯里拉京参照物峰相对应的峰为S1峰，计算峰3、峰4与S1峰的相对保留时间，其相对保留时间应该在规定值的±10％范围之内，所述规定值为：0.65(峰3)、0.75(峰4)；与诃子酸参照物峰相对应的峰为S2峰，计算峰9与S2峰的相对保留时间，其相对保留时间应该在规定值的±10％范围之内，规定值为：1.02(峰9)。本专利技术所述的绒毛诃子药材特征图谱的构建方法的具体技术方案为：一种绒毛诃子药材特征图谱的构建方法，包括以下步骤：以没食子酸、没食子酸乙酯、柯里拉京、诃藜勒酸、诃子酸和诃子次酸为对照品，制备对照品溶液；取绒毛诃子药材，加溶剂溶解，超声处理，提取液过滤，取续滤液，得绒毛诃子供试品溶液；对所述对照品溶液、绒毛诃子供试品溶液分别进行超高效液相色谱检测；所述超高效液相色谱的色谱条件包括：流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.1％～0.3％的磷酸水溶液，洗脱方式为梯度洗脱。在一些优选的实施例中，流动相B为体积分数为0.2％的磷酸水溶液在一些优选的实施例中，所述梯度洗脱包括如下程序：0min～3min，流动相A保持体积百分比为0％，流动相B保持体积百分比为100％；3min～5min，流动相A的体积百分比由0％上升至3％，流动相B的体积百分比由100％下降至97％；5min～12min，流动相A的体积百分比由3％上升至10％，流动相B的体积百分比由97％下降至90％；12min～20min，流动相A保持体积百分比为10％，流动相B保持体积百分比为90％；20min～25min，流动相A的体积百分比由10％上升至14％，流动相B的体积百分比由90％下降至86％；25min～35min，流动相A的体积百分比由14％上升至17％，流动相B的体积百分比由86％下降至83％；35min～40min，流动相A的体积百分比由17％上升至21％，流动相B的体积百分比由83％下降至79％；40min～45min，流动相A的体积百分比由21％上升至60％，流动相B的体积百分比由79％下降至40％；45min～50min，流动相A保持体积百分比为60％，流动相B保持体积百分比为40％。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种诃子药材特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：/n以没食子酸、没食子酸乙酯、柯里拉京、诃藜勒酸、诃子酸和诃子次酸为对照品，制备对照品溶液；/n取诃子药材，加溶剂溶解，超声提取，提取液过滤，取续滤液，得诃子供试品溶液；/n对所述对照品溶液、诃子供试品溶液分别进行超高效液相色谱检测；/n所述超高效液相色谱的色谱条件包括：/n流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.1％～0.3％的磷酸水溶液，洗脱方式为梯度洗脱。/n

【技术特征摘要】
1.一种诃子药材特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
以没食子酸、没食子酸乙酯、柯里拉京、诃藜勒酸、诃子酸和诃子次酸为对照品，制备对照品溶液；
取诃子药材，加溶剂溶解，超声提取，提取液过滤，取续滤液，得诃子供试品溶液；
对所述对照品溶液、诃子供试品溶液分别进行超高效液相色谱检测；
所述超高效液相色谱的色谱条件包括：
流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.1％～0.3％的磷酸水溶液，洗脱方式为梯度洗脱。


2.根据权利要求1所述的诃子药材特征图谱的构建方法，其特征在于，所述梯度洗脱包括如下程序：
0min～3min，流动相A保持体积百分比为0％，流动相B保持体积百分比为100％；
3min～5min，流动相A的体积百分比由0％上升至3％，流动相B的体积百分比由100％下降至97％；
5min～12min，流动相A的体积百分比由3％上升至10％，流动相B的体积百分比由97％下降至90％；
12min～20min，流动相A保持体积百分比为10％，流动相B保持体积百分比为90％；
20min～25min，流动相A的体积百分比由10％上升至14％，流动相B的体积百分比由90％下降至86％；
25min～35min，流动相A的体积百分比由14％上升至17％，流动相B的体积百分比由86％下降至83％；
35min～40min，流动相A的体积百分比由17％上升至21％，流动相B的体积百分比由83％下降至79％；
40min～45min，流动相A的体积百分比由21％上升至60％，流动相B的体积百分比由79％下降至40％；
45min～50min，流动相A保持体积百分比为60％，流动相B保持体积百分比为40％。


3.根据权利要求1所述的诃子药材特征图谱的构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件包括：
柱温为28℃～32℃；流速为0.33mL/min～0.37mL/min；检测波长为250nm～290nm。


4.根据权利要求1所述的诃子药材特征图谱的构建方法，其特征在于，所述溶剂为体积分数为60％～80％的甲醇水溶液。


5.根据权利要求1所述的诃子药材特征图谱的构建方法，其特征在于，所述超声处理的时间为20min～40min。


6.根据权利要求1-5任一项所述的诃子药材特征图谱的构建方法，其特征在于，所述对照品溶液包括混合对照品溶液和诃子次酸对照品溶液；
所述混合对照品溶液为没食子酸对照品溶液、没食子酸乙酯对照品溶液、柯里拉京对照品溶液、诃藜勒酸对照品溶液和诃子酸对照品溶液的混合溶液。


7.一种绒毛诃子特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
以没食子酸、没食子酸乙酯、柯里拉京、诃藜勒酸、诃子酸和诃子次酸为对照品，制备对照品溶液；
取绒毛诃子药材，加溶剂溶解，超声处理，提取液过滤，取续滤液，得绒毛诃子供试品溶液；
对所述对照品溶液、绒毛诃子供试品溶液分别进行超高效液相色谱检测；
所述超高效液相色谱的色谱条件包括：
流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.1％～0.3％的磷酸水溶液，洗脱方式为梯度洗脱。


8.根据权利要求7所述的绒毛诃子特征图谱的构建方法，其特征在于，所述梯度洗脱包括如下程序：
0min～3min，流动相A保持体积百分比为0％，流动相B保持体积百分比为100％；
3min～5min，流动相A的体积百分比由0％上升至3％，流动相B的体积百分比由100％下降至97％；
5min～12min，流动相A的体积百分比由3％上升至10％，流动相B的体积百分比由97％下降至90％；
12min～20min，流动相A保持体积百分比为10％，流动...

【专利技术属性】
技术研发人员：李国卫，吴文平，邓淙友，索彩仙，邱韵静，何嘉莹，程学仁，魏梅，孙冬梅，陈向东，
申请(专利权)人：广东一方制药有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44