制备端脑或其前体组织的方法技术

本发明专利技术提供在体外由哺乳动物多能干细胞制备更成熟的端脑或其前体组织的方法，所述方法包括：通过在存在Wnt信号抑制剂和TGFβ信号抑制剂的情况下，悬浮培养多能干细胞的团聚体而获得端脑标记阳性的团聚体，并且进一步在高氧分压条件下悬浮培养所述端脑标记阳性的团聚体。在一个实施方案中，在高氧分压条件下的悬浮培养在存在Wnt信号增强剂和骨形态发生因子信号转导途径激活物质的情况下进行。

Methods of preparation of telencephalon or its precursor

【技术实现步骤摘要】
制备端脑或其前体组织的方法本申请是国际申请号PCT/JP2014/080966，国际申请日2014年11月21日，中国申请号201480072070.6，专利技术名称为“制备端脑或其前体组织的方法”的专利申请的分案申请。
本专利技术涉及用于在体外诱导多能干细胞分化成端脑或其前体组织的技术。
技术介绍
哺乳动物皮质具有在胎儿皮质形成过程中逐渐形成的多层结构(I-VI层)(非专利文献1)。皮质由背侧端脑(或大脑皮质)的神经上皮产生，并且随后外翻以在每个侧面侧形成半球状脑室(图17A)(非专利文献2)。皮质的背尾(dorsocaudal)侧侧连皮质缘(corticalhem)，而其腹吻(ventrorostral)侧通过原脑皮质与外侧神经节隆起(LGE；纹状体原基)和隔膜邻接。在于成年人中发现的六个层中，存在第I层[其胎儿原基称为边缘区(MZ)；图17B]，因为该最浅表层主要由主要来源于相邻组织如皮质缘和隔膜的Reelin阳性Cajal-Retzius细胞构成(非专利文献3)(在人皮质的情形中，一些Reelin阳性细胞还似乎直接来源于皮质神经本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.细胞团聚体，其中连续形成大脑皮质和基底神经节，其中所述基底神经节为表达Foxg1和外侧神经节隆起(LGE)标记的端脑神经上皮，并且其中所述大脑皮质为Gsh2阴性和Pax6阳性的皮质神经上皮。/n

【技术特征摘要】
20131122 JP 2013-2423941.细胞团聚体，其中连续形成大脑皮质和基底神经节，其中所述基底神经节为表达Foxg1和外侧神经节隆起(LGE)标记的端脑神经上皮，并且其中所述大脑皮质为Gsh2阴性和Pax6阳性的皮质神经上皮。


2.根据权利要求1所述的细胞团聚体，其中，所述皮质神经上皮的一个末端具有卷曲的形状。


3.根据权利要求1所述的细胞团聚体，其中，所述外侧神经节隆起标记选自由Gsh2和GAD65组成的组。


4.根据权利要求1所述的细胞团聚体，其中，所述细胞团聚体在体外从多能干细胞分化。


5.根据权利要求4所述的细胞团聚体，其中，所述多能干细胞是胚胎干细胞(ES细胞)或诱导的多能干细胞(iPS细胞)。


6.细胞团聚体群体，其在不少于50％所述细胞团聚体群体中包含根据权利要求1或2所述的细胞团聚体。


7.一种包含脉络丛组织的细胞团聚体，其中，所述组织表达脉络丛标记并形成褶皱的单层上皮的形态。


8.根据权利要求7所述的细胞团聚体，其中，所述脉络丛标记选自由TTR、Lmx1a和Otx2组成的组。


9.根据权利要求7所述的细胞团聚体，其中Foxg1的表达水平低于脉络丛标记的表达水平。


10.根据权利要求7所述的细胞团聚体，其中所述细胞团聚体在体外从多能干细胞分化。


11.根据权利要求10所述的细胞团聚体，其中所述多能干细胞是胚胎干细胞(ES细胞)或诱导的多能干细胞(iPS细胞)。


12.细胞团聚体群体，其在不少于80％所述细胞团聚体群体中包含根据权利要求7或8所述的细胞团聚体。


13.包含海马前体组织的细胞团聚体，其中所述组织包含神经上皮，并且其中所述神经上皮表达Foxg1和皮质缘标记，并且不表达脉络丛标记。


14.根据权利要求13所述的细胞团聚体，其中，所述皮质缘标记选自由Lmx1a和Otx2组成的组。


15.根据权利要求13所述的细胞团聚体，其中所述脉络丛标记为TTR。


16.根据权利要求13所述的细胞团聚体，其中所述细胞团聚体在体外从多能干细胞分化。


17.根据权利要求13所述的细胞团聚体，其中所述多能干细胞是胚胎干细胞(ES细胞)或诱导的多能干细胞(iPS细胞)。

【专利技术属性】
技术研发人员：笹井芳树，门岛大辅，坂口秀哉，
申请(专利权)人：国立研究开发法人理化学研究所，住友化学株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP