链霉亲和素和高斯荧光素酶的融合蛋白及其应用制造技术

技术编号:24488733 阅读:39 留言:0更新日期:2020-06-13 00:29
一种链霉亲和素和高斯荧光素酶的融合蛋白及其应用,该融合蛋白包括链霉亲和素全长蛋白和高斯荧光素酶全长蛋白或持续发光突变体,链霉亲和素全长蛋白与高斯荧光素酶全长蛋白或持续发光突变体通过柔性肽连接。本发明专利技术的融合蛋白能够方便、特异性地识别生物素分子,并具有催化底物氧化发光的功能,便于检测。相对于现有技术中的高斯荧光素酶与链霉亲和素的偶联蛋白,本发明专利技术的融合蛋白具有工艺简单,便于生产的优点。

Fusion protein of streptavidin and Gauss luciferase and its application

【技术实现步骤摘要】
链霉亲和素和高斯荧光素酶的融合蛋白及其应用
本专利技术涉及抗体
,具体涉及一种链霉亲和素和高斯荧光素酶的融合蛋白及其应用。
技术介绍
链霉亲和素(streptavidin,SA)是Chaiet在1963年发现的,是Streptomycesavidinii菌在培养过程中分泌的产物。一条SA肽链中有159个氨基酸残基,分子量为16.5kDa。完整的SA蛋白由4条SA多肽链组成,形成一个四聚体结构。每条多肽链都可以特异性地结合一个生物素(Biotin)分子,因此,1分子SA可以结合4分子的生物素。两者之间的相互作用以非共价结合形式存在,亲和力达到10-15/M,比抗原抗体的结合常数高若干数量级,是自然界中存在的最稳定的蛋白与小分子间相互作用。两者之间的强结合导致生物素和SA经常被用于开发标记和检测的工具。应用时通常将生物素标记于待检测的底物,用SA结合于标记在底物上的生物素,再用SA的抗体结合于SA,同时抗体上预先连接有发光基团,可被激发发光,最终通过检测发光而检测到底物。荧光素酶是生物体内催化荧光素或脂肪醛氧化发光的一类酶的总称。通常本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种链霉亲和素和高斯荧光素酶的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白包括链霉亲和素全长蛋白和高斯荧光素酶全长蛋白或持续发光突变体,所述链霉亲和素全长蛋白与所述高斯荧光素酶全长蛋白或持续发光突变体通过柔性肽连接。/n

【技术特征摘要】
1.一种链霉亲和素和高斯荧光素酶的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白包括链霉亲和素全长蛋白和高斯荧光素酶全长蛋白或持续发光突变体,所述链霉亲和素全长蛋白与所述高斯荧光素酶全长蛋白或持续发光突变体通过柔性肽连接。


2.根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述链霉亲和素全长蛋白如SEQIDNO:1所示;
任选地,所述高斯荧光素酶全长蛋白序列如SEQIDNO:2所示;
任选地,所述持续发光突变体序列如SEQIDNO:3所示;
任选地,所述柔性肽序列如SEQIDNO:4所示。


3.根据权利要求1或2所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白还包括:信号肽,该信号肽用于引导所述融合蛋白从表达细胞内向外分泌;
优选地,所述信号肽位于所述融合蛋白的N端;
优选地,所述信号肽序列如SEQIDNO:5所示。


4.根据权利要求1或2所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白还包括:融合标签,该融合标签用于亲和纯化所述融合蛋白;
优选地,所述融合标签是6×组氨酸标签。


5.根据权利要求1或2所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白序列如SEQIDNO:6或SEQIDNO:7所示。


6.一种分离的核酸,其特征在于,所述分离的核酸编码权利要求1至5任一项所述的融合蛋白。


7.根据权利要求6所述的分离的核酸,其特征在于,所述分离的核酸包括链霉亲和素全长蛋白编码序列和高斯荧光素酶全长蛋白编码序列...

【专利技术属性】
技术研发人员:李静王佑富郑越董宇亮章文蔚徐崇钧
申请(专利权)人:深圳华大智造极创科技有限公司
类型:发明
国别省市:广东;44

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