【技术实现步骤摘要】
抗HER2单克隆抗体的纯化方法
本专利技术属于蛋白质纯化领域，具体而言涉及一种抗HER2单克隆抗体的制备或纯化方法。
技术介绍
人类表皮生长因子受体2(HumanEpidermalGrowthFactorReceptor2，HER2)是结合在细胞膜表面的受体酪氨酸激酶，参与细胞生长和分化的信号传导途径。HER2过度表达可导致肿瘤患者体内的癌细胞快速繁殖，还容易产生抗药性，降低患者生存时间。曲妥珠单抗(trastuzumab)是一种针对HER2的重组人源化IgG型单克隆抗体，能特异性识别Her2调控的细胞表面蛋白HER2胞外结构域IV，阻止表皮生长因子(EpidermalGrowthFactor，EGF)与HER2结合并抑制EGF-HER2二聚体介导的信号转导，从而抑制癌细胞的增殖，达到治疗肿瘤的作用。大量临床资料证实曲妥珠单抗能有效治疗HER2阳性乳腺癌，而且与化疗联合应用时明显提高患者生存时间，减少再复发几率。除此之外，曲妥珠单抗还被批准用于治疗转移性胃癌，目前仍在研究其治疗其他癌症的可能性，表明HER2单克隆抗体具有重要...
【技术保护点】
1.一种纯化蛋白的方法，所述方法包括以下步骤：a)亲和层析；b)病毒灭活；c)深层过滤；d)阴离子交换层析；e)阳离子交换层析；其中，所述亲和层析包括：/n1)将产品加载到亲和层析柱，使所述组合物处于第一亲和pH和/或第一亲和电导率，/n2)用平衡缓冲液进行第一次淋洗，使所述组合物继续处于第一亲和pH和/或第一亲和电导率，/n3)用淋洗缓冲液进行第二次淋洗，所述淋洗缓冲液具有第二亲和pH和/或第二亲和电导率，/n4)用洗涤缓冲液进行第三次淋洗，所述洗涤洗缓冲液具有第三亲和pH和/或第三亲和电导率。/n
【技术特征摘要】
20181204 CN 20181147431691.一种纯化蛋白的方法，所述方法包括以下步骤：a)亲和层析；b)病毒灭活；c)深层过滤；d)阴离子交换层析；e)阳离子交换层析；其中，所述亲和层析包括：
1)将产品加载到亲和层析柱，使所述组合物处于第一亲和pH和/或第一亲和电导率，
2)用平衡缓冲液进行第一次淋洗，使所述组合物继续处于第一亲和pH和/或第一亲和电导率，
3)用淋洗缓冲液进行第二次淋洗，所述淋洗缓冲液具有第二亲和pH和/或第二亲和电导率，
4)用洗涤缓冲液进行第三次淋洗，所述洗涤洗缓冲液具有第三亲和pH和/或第三亲和电导率。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述第二亲和pH比第一亲和pH值至少低约1.5以上。
3.如权利要求1-2任一项所述的方法，其中所述第二亲和电导率比第一亲和电导率至少高约6倍以上。
4.如权利要求1-3任一项所述的方法，其中所述第一亲和pH和/或第一亲和电导率与第三亲和pH和/或第三亲和电导率相同。
5.如权利要求1-4任一项所述的方法，所述方法还包括在淋洗后采用亲和pH和/或亲和电导率低于平衡缓冲液、淋洗缓冲液和洗涤缓冲液的pH和/或电导率的洗脱缓冲液洗涤目的蛋白。
6....
【专利技术属性】
技术研发人员：谢一龙，陈梅梅，陈玄，尚战强，陆建胜，苏贤德，胡伟伟，胡晓静，
申请(专利权)人：正大天晴药业集团南京顺欣制药有限公司，正大天晴药业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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