一种制备贝伐珠单抗的方法技术

本申请属于蛋白质纯化领域，涉及一种制备贝伐珠单抗的方法，包括亲和层析，病毒灭活，深层过滤，复合阴离子交换层析，阳离子交换层析等步骤。

【技术实现步骤摘要】

本申请属于蛋白质纯化领域，具体而言涉及一种制备或纯化贝伐珠单抗的方法。

技术介绍

1、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,vegf)是一种能特异地作用于血管内皮细胞的功能性蛋白，具有促进血管通透性增加、血管内皮细胞迁移和增殖、细胞外基质变性和血管生成等作用。vegf在多种恶性肿瘤中表达，并参与肿瘤血管生成，因此成为抗肿瘤药物开发的重要靶点。目前，靶向vegf的抑制剂已经改善了许多癌症患者的预后和生存期。贝伐珠单抗(bevacizumab)是一种利用重组dna技术制备的人源化抗vegf单克隆抗体，广泛地应用于结直肠癌、肺癌、胶质母细胞瘤、肾癌、宫颈癌、卵巢癌、输卵管癌、腹膜癌、肝癌等癌症的治疗中。

2、随着临床需求的不断扩大，越来越多的单克隆抗体药物获得批准，企业对生产制造工艺的效能和成本要求也越来越高。典型的单克隆抗体纯化方法一般包括三步：首先利用亲和层析捕获细胞培养液中的目的蛋白，再利用两步离子交换层析或离子交换加疏水层析进行精细纯化，此外还包括亲和层析步骤之后的病毒灭活步骤。新型层析模式混本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种纯化贝伐珠单抗的方法，其特征在于，所述方法包括用复合阴离子交换层析纯化贝伐珠单抗。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述复合阴离子交换层析具有离子交换和疏水作用力。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其特征在于，所述复合阴离子交换层析包括步骤：在上样前调节上样液pH和电导率，优选地，调节上样液pH和电导率与平衡液一致。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，调节后的上样液pH为5.0-8.5，优选7.5±0.2，和/或调节后的上样液电导率为3.0-10.0mS/cm，优选4.0-6.0mS/cm。>

5.根据权利...

【技术特征摘要】

1.一种纯化贝伐珠单抗的方法，其特征在于，所述方法包括用复合阴离子交换层析纯化贝伐珠单抗。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述复合阴离子交换层析具有离子交换和疏水作用力。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其特征在于，所述复合阴离子交换层析包括步骤：在上样前调节上样液ph和电导率，优选地，调节上样液ph和电导率与平衡液一致。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，调节后的上样液ph为5.0-8.5，优选7.5±0.2，和/或调节后的上样液电导率为3.0-10.0ms/cm，优选4.0-6.0ms/cm。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，所述复合阴离子交换层析填料选自：nm90agarose ham或diamond mix-a，优选nm90agarose ham。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在复合阴离子交换层析之前进行亲和层析，以及在复合阴离子交换层析步骤之后进行阳离子交换层析。

7.一种纯化贝伐珠单抗的方法，其特征在于，所述方法包...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈辉，陈强，陆建胜，苏贤德，谢一龙，祝明平，胡伟伟，姚含章，滕佩，
申请(专利权)人：正大天晴药业集团南京顺欣制药有限公司，
类型：发明
国别省市：