一种检测天麻及其提取物和含天麻制剂中多种成分的方法技术

本发明专利技术提供了一种快速同时测定天麻药材及天麻提取物和含天麻制剂中的多种活性成分的UPLC方法，采用色谱柱Luna C18‑HST(2.5μm，100×3.0mm)；流动相：流动相A(CH

A method for the determination of Gastrodia elata and its extracts and various components in preparations containing gastrodia elata

【技术实现步骤摘要】
一种检测天麻及其提取物和含天麻制剂中多种成分的方法
本专利技术属于医药领域，涉及中药材活性成分的检测技术，具体涉及天麻及其提取物和含天麻制剂中八种活性成分的快速定性以及定量方法。
技术介绍
2015版的《中国药典》规定，天麻为兰科植物天麻(GastrodiaelataBI.)的干燥块茎【参见：中国药典[S].一部.2015】。在我国，主要分布在四川、云南、贵州、陕西等地，黑龙江、吉林也有少量分布。目前对于天麻中活性成分的研究表明天麻具有以下药理作用，镇静【参见：ZouN,Jian-TaoLV,XueRY,etal.EffectsofGastrodinonSedationandHypnosisofMice[J].LishizhenMedicine&MateriaMedicaResearch,2011,22(4):807-809.CaoHZ,ChiMH,QianYR.EffectsofGastrodiaElataontheexpressionTHandDBHmRNAinhypothalamusandadrenalglandofrats[J].MedicalJournalofChinesePeoplesHealth,2012.】、抗惊厥【参见：HaJH,LeeDU,LeeJT,etal.4-HydroxybenzaldehydefromGastrodiaelataB1.isactiveintheantioxidationandGABAergicneuromodulationoftheratbrain.[J].JournalofEthnopharmacology,2000,73(1):329-333.】、抗焦虑和抗抑郁【参见：JungJW,YoonBH,OhHR,etal.Anxiolytic-likeeffectsofGastrodiaelataanditsphenolicconstituentsinmice[J].Biological&PharmaceuticalBulletin,2006,29(2):261.ZhouBH,LiXJ,LiuM,etal.Antidepressant-likeactivityoftheGastrodiaelataethanolextractinmice.[J].Fitoterapia,2006,77(7):592-594】、神经保护【参见：KimHJ,LeeSR,MoonKD.EtherfractionofmethanolextractsofGastrodiaelata,medicinalherbprotectsagainstneuronalcelldamageaftertransientglobalischemiaingerbils[J].PhytotherapyResearchPtr,2003,17(8):909.LeeGH,KimHR,HanSY,etal.GastrodiaelataBlumeanditspurecompoundsprotectBV-2microglial-derivedcelllinesagainstβ-amyloid:theinvolvementofGRP78andCHOP[J].BiologicalResearch,2012,45(4):403.LeeYK,WooMH,KimCH,etal.TwonewbenzofuransfromGastrodiaelataandtheirDNAtopoisomerasesIandIIinhibitoryactivities.[J].PlantaMedica,2007,73(12):1287-1291.】等作用。在疾病治疗的过程中，并不是某一种成分起作用，而是多种活性成分协同作用于疾病，从而达到治疗作用。此外，产地不同、批次不同导致中药成分含量不一的情况也很普遍，药典中仅用一种或两种指标成分作为质量标准并不能真正反映该药材的质量。另外，在许多经典名方、汤剂和复方制剂中，天麻也是常见的药材之一【参见：熊兴江,王阶.论半夏白术天麻汤在高血压病中的运用[J].中华中医药杂志,2012(11):2862-2865.KailanHE,ZhangP,LiuX.TianmaInjectionintheTreatmentofVertebralBasilarArteryInsufficiencyRandomizedParallelGroupStudy[J].JournalofPracticalTraditionalChineseInternalMedicine,2014.】。因此，同时测定天麻中的多种活性成分可对于该药材的质量控制和应用提供参考依据，同时也为含有天麻的真伪品和复方制剂提供鉴别参考依据。目前，国内对于天麻成分测定主要采用HPLC法对于天麻素进行检测【参见：JiaoH.DeterminationofGastrodinContentsinWildandCultivatedGastrodiaelatafromDifferentRegionsofChongqingbyRP-HPLC[J].MedicinalPlant,2012(5).】，该方法具有用时长，有机溶液耗损多等缺点，因此，建立一种可以快速，稳定，环境友好并能适用于不同产地天麻及其提取物或含有天麻的复方制剂的定性定量分析研究的天麻检测方法是本领域的重要课题。
技术实现思路
本专利技术的任务是提供一种快速检测天麻及天麻提取物和含天麻制剂中多种成分的方法，该方法能快速同时测定天麻及其提取物和含天麻制剂中多种活性成分的含量，以及检测制剂中的天麻成分。实现本专利技术的技术方案是：本专利技术提供的快速检测天麻及天麻提取物和含天麻制剂中多种成分的方法，包括以下步骤：步骤一：制备待测样品溶液：取天麻药材或天麻提取物或含天麻制剂的粉末，加入乙醇，超声提取，过滤得到样品溶液；步骤二：超高效液相色谱仪检测(UPLC)：取步骤一得到的样品溶液1μL进样分析，记录色谱图，测得待检测成分的峰面积，所述的待检测成分是根据混合标准品对照图谱的八种成分的保留时间确定为天麻素、对羟基苯甲醇(天麻苷元)、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、对羟基苯甲醛、香草醛中的一种或两种以上或全部；步骤三：将步骤二得到的待测成分的峰面积(y)代入下列与所检测成分相对应的标准方程并计算各对应化合物的浓度(x，μg·mL-1)，即得到所检测的天麻中活性成分的含量：各式中：y为峰面积；x为各各对应化合物的浓度。上述步骤一所述的取天麻药材或天麻提取物或含天麻制剂的粉末，加入乙醇，超声提取，过滤得到样品溶液的具体方法是：精密称取已过3号筛的天麻药材或天麻提取物或含天麻制剂的粉末0.2g，用体积分数为70％的乙醇定容至10ml，称重；250W、53kHz超声提取60min，用体积分数为70％的乙醇补足至原重，摇匀，用0.22μm的有机滤膜过滤即得到样品溶液。上述步骤二中高效液相色谱仪的条件为：采用色谱柱LunaC18-HST，规格为2.5μm，100×3.0mm；流动本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定天麻药材或天麻提取物或含天麻制剂中多种活性成分的方法，包括以下步骤：/n步骤一：制备待测样品溶液：取天麻药材或天麻提取物或含天麻制剂的粉末，加入乙醇，超声提取，过滤得到样品溶液；/n步骤二：超高效液相色谱仪检测：取步骤一得到的样品溶液1μL进样分析，记录色谱图，测得待检测成分的峰面积，所述的待检测成分是根据混合标准品对照图谱的八种成分的保留时间确定为天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、对羟基苯甲醛、香草醛中的一种或两种以上或全部；/n步骤三：将步骤二得到的待测成分的峰面积数值y代入下列与所检测成分相对应的标准方程，计算求解出x，x为各对应化合物的浓度数值，单位是μg·mL

【技术特征摘要】
1.一种测定天麻药材或天麻提取物或含天麻制剂中多种活性成分的方法，包括以下步骤：
步骤一：制备待测样品溶液：取天麻药材或天麻提取物或含天麻制剂的粉末，加入乙醇，超声提取，过滤得到样品溶液；
步骤二：超高效液相色谱仪检测：取步骤一得到的样品溶液1μL进样分析，记录色谱图，测得待检测成分的峰面积，所述的待检测成分是根据混合标准品对照图谱的八种成分的保留时间确定为天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、对羟基苯甲醛、香草醛中的一种或两种以上或全部；
步骤三：将步骤二得到的待测成分的峰面积数值y代入下列与所检测成分相对应的标准方程，计算求解出x，x为各对应化合物的浓度数值，单位是μg·mL-1，即得到所检测的天麻中活性成分的含量：



各式中：y为峰面积；x为各各对应化合物的浓度。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤一所述的取天麻药材或天麻提取物或含天麻制剂的粉末，加入乙醇，超声提取，过滤得到样品溶液的具体方法是：称取已过3号筛的天麻药材或天麻提取物或含天麻制剂的...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹春萍，马元春，赵佳鑫，
申请(专利权)人：华中科技大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42