与肺癌相关的KEAP1基因甲基化检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提供一种与肺癌相关的KEAP1基因甲基化检测试剂盒。所述试剂盒中包含扩增目的基因KEAP1的引物对(SEQ ID NO:1‑2)和扩增内参基因ACTB的引物对(SEQ ID NO:4‑5)，以及检测目的基因和内参基因的Taqman探针(SEQ ID NO:3和6)。本发明专利技术还提供一种检测方便、针对性强、无创性、检测准确率高的可用于检测与肺癌相关的KEAP1基因启动子区甲基化程度的方法，其中KEAP1基因CpG位点甲基化水平与肺癌的早期发病呈正相关，可通过对样品DNA甲基化水平测定来辅助早期诊断肺癌。本发明专利技术的试剂盒可以方便快捷地在分子水平上实现对肺癌的筛查，无创性、检测率高且针对性强，有利于肺癌的早期发现和及时治疗。

Keap1 gene methylation detection kit related to lung cancer

【技术实现步骤摘要】
与肺癌相关的KEAP1基因甲基化检测试剂盒
本专利技术涉及分子生物检测技术，具体地说，涉及一种与肺癌相关的KEAP1基因甲基化检测试剂盒。
技术介绍
肺癌，又称原发性支气管癌，是对人类健康危害最大的恶性肿瘤之一，其死亡率居各类恶性肿瘤之首。在临床实践中，肺癌早期诊断一直是难点，但早期发现对癌症患者的有效治疗至关重要。目前，临床症状出现以后进行组织学和细胞学检查是肺癌诊断的金标准，但早期肺癌由于常无特殊症状而几乎不被医生和患者察觉，用常规的诊断方法也难以早期发现和早期定性诊断，并且活体取样检测也困难，严重影响了癌症的早期诊断和病人的预后。由于临床表现具有个体差异，多数患者就诊时已发展至晚期，因此早发现、早诊断、早治疗对延长肺癌恶性肿瘤患者生存期和降低死亡率有着重大意义。与肺癌诊治有关的技术手段在不断改善，包括检测异常的基因突变，表观遗传修饰和利用免疫系统的潜力来控制肿瘤的生长等。而肿瘤标志物发展成为继影像诊断、病理诊断之后的肿瘤诊断治疗的新领域，对肿瘤的诊断、监测和治疗产生了重大影响；其中一个领域就是甲基化DNA检测。近年来研究表明，肺癌本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.与肺癌相关的KEAP1基因甲基化检测引物，其特征在于，包括序列如SEQ ID NO:1所示的正向引物和序列如SEQ ID NO:2所示的反向引物。/n

【技术特征摘要】
1.与肺癌相关的KEAP1基因甲基化检测引物，其特征在于，包括序列如SEQIDNO:1所示的正向引物和序列如SEQIDNO:2所示的反向引物。


2.与权利要求1所述引物配套使用的探针，其特征在于，探针序列如SEQIDNO:3所示，探针序列的5′端具有荧光基团，3′端具有淬灭基团。


3.含有权利要求1所述引物和/或权利要求2所述探针的检测试剂或试剂盒。


4.与肺癌相关的KEAP1基因甲基化检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述引物和权利要求2所述探针。


5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括用于检测内参基因ACTB的引物和探针，其中，ACTB检测引物包括序列如SEQIDNO:4所示的正向引物和序列如SEQIDNO:5所示的反向引物；ACTB检测探针的序列如SEQIDNO:6所示，探针的5′端具有荧光基团，3′端具有淬灭基团，且SEQIDNO:6所示探针的荧光基团不同于SEQIDNO:3所示探针的荧光基团。


6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，SEQIDNO:3所示探针的5′端荧光基团为FAM，SEQIDNO:3所示探针的3′端淬灭基团为BBQ-650；和/或
SEQIDNO:6所示探针的5′端荧光基团为VIC，SEQIDNO:6所示探针的3′端淬灭基团为BHQI。


7.根据权利要求4-6任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括dNTPs、DNA聚合酶、可溶性镁盐、PCR反应缓冲液、血浆游离DNA提取试剂和DNA甲基化转化试剂中的至少一种。


8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述DNA甲基化转化试剂选自亚硫酸氢盐、重亚硫酸氢盐、亚...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵璇，张毅，谢潭，张震，
申请(专利权)人：郑州大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：河南;41