一种板蓝根或其制品的质量分析方法技术

本发明专利技术提供了一种板蓝根的质量分析方法，其使用首次发现的抗流感活性成分CaulilexinC作为指标，运用色谱法如高效液相色谱、气相色谱、薄层色谱等对板蓝根进行定性定量分析。该方法具有操作简单、专属性强、精确可靠等特点，易于推广普及，可应用于板蓝根系列产品如药材、饮片、提取物及其制剂的质量标准制定，对切实保障提高板蓝根产品质量和药效具有很高的实用价值。

A quality analysis method of Radix Isatidis or its products

【技术实现步骤摘要】
一种板蓝根或其制品的质量分析方法
本专利技术属于医药化学领域，具体涉及一种一种板蓝根或其制品的质量分析方法，更具体地，涉及以单体成分CaulilexinC作为质控指标，通过各种色谱方法对板蓝根药材、饮片、提取物及其单方或复方制剂进行定性定量分析的方法。
技术介绍
板蓝根为十字花科植物菘蓝IsatisindigoticaFort.的干燥根，是一种历史悠久的传统中药，具有清热解毒、凉血、利咽等功效。自1977年以来，板蓝根在历版《中国药典》中均有收载，不仅以饮片形式在中医方剂中入药，也是多种中成药的工业原料。板蓝根作为清热解毒的代表性中药在临床上应用非常广泛，常用于温病发热、发斑、喉痹、丹毒、痈肿、腮腺炎、乙型脑炎、急慢性肝炎，特别是病毒性呼吸道疾病如感冒、流感的治疗；在抗击SARS和禽流感疫情中，板蓝根制剂也发挥了重要作用，成为居家常备药物。板蓝根化学成分极其复杂。过去数十年来，许多学者致力于板蓝根活性成分研究，从中分离出化合物多达约200个，涉及生物碱、有机酸、蒽醌、黄酮、木脂素、三萜、甾醇、芥子苷、核苷、脂肪酸、氨基酸、碳水化合物等结构类型[中国野生植物资源，2005，24(5)：4～7]，并发现其中一些化合物有抗流感活性，如精氨酸、告依春[中国中药杂志，2014，39(5)：812～816；中国天然药物，2005，3(6)：359～360]、靛玉红、异牡荆苷、靛蓝[中国中医急症，2011，20(11)：1772～1774]、capparilosideA[CN201510202747.X]、3-吲哚醛[CN201810515027.2]、直铁线莲宁B[InternationalJournalofMolecularMedicine，2013，31(4)：867-873]、落叶松脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷[CN201510187645.5]、β-谷甾醇[CN201610135752.8]、甲基-2-[2-(1-甲氧基-1H-吲哚-3-基)乙酰胺]苯甲酸酯[CN201610136353.3]、告依春二聚体[CN201810033331.3]、4′-羟基-7-甲氧基异黄酮[中国中药杂志，2013，38(8)：1172～1182]、芥酸[CN201810045581.9]等，但由于含量低、活性弱、缺乏体内药效等原因，这些化合物尚未被医药界公认为板蓝根的代表性有效成分。正因为药效物质不明确，迄今最大中成药“板蓝根颗粒”的质量标准一直缺乏定量指标。目前板蓝根药材和饮片的质量标准采用告依春(goitrin)作为定量指标[2010版《中国药典》(一部)]，学术界对此颇有争议。有公开资料显示：①告依春体外抗流感活性很弱，甚至不如板蓝根中已知的一些其它成分[中国中医急症，2011，20(11)：1772～1774]，且含量很低，根本不能代表板蓝根真实药效；②告依春是次生成分，由芥子油苷降解产生，提取过程中因温度变化其得率大幅波动，有时在制剂中检测不出(CN201410250141.9)；③告依春又称致甲状腺肿素，是十字花科植物常见有害物，可抑制人体对碘的吸收，导致甲状腺功能减低，甲状腺肿大[HumToxicol.1986,5(1):15-19]；④板蓝根中的告依春并不是单一化合物，而是R-和S-告依春的对映体混合物(CN201710975562.1)。这些资料充分表明，告依春是一种低效、有毒、微量、不纯的次生成分，不是板蓝根固有的特征性有效单体；目前把告依春当作板蓝根质控指标只有象征意义，是一种过渡性质控手段，控制告依春含量并不能切实保障板蓝根的药效，这也是告依春定量未能从板蓝根饮片延伸到板蓝根制剂的原因。现行板蓝根颗粒质量标准仅以普遍存在的非特征成分亮氨酸、精氨酸作为TLC定性指标，而没有含量测定项[2010版《中国药典》(一部)，p800]。可见，板蓝根药材标准和制剂标准在最关键的定量指标上是不一致的，二者没有因果关系，这种落后状况对保障板蓝根颗粒的品质是极为不利的。另有文献尝试用精氨酸、靛蓝、靛玉红、鸟苷、尿苷、腺苷等成分作为指标对板蓝根进行含量测定[中国兽药杂志.2019,53(7):36～43；西北农林科技大学学报(自然科学版)，2007，35(2)：215～219；时珍国医国药，2007，18(10)：2578～2580]，但这些成分作为质控指标的合理性也不足，尚未见列入正式标准。因此，有必要继续寻找板蓝根抗病毒有效成分，并将真正有代表性的有效成分作为质控指标，建立分析方法，提升现行板蓝根标准，以利改进生产工艺，提高产品质量。CaulilexinC是一种植物抗毒素，化学名为1-甲氧基-3-吲哚乙腈，存在于十字花科植物如花椰菜、卷心菜中，具有抗真菌活性[Phytochemistry,2006,67:1503～1509]，也存在于板蓝根中[中草药，2006,37(9):1306～1309]。以往文献中未见该化合物有抗流感或抗病毒活性的记载，也未见应用于板蓝根及其制剂的质量分析。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对以上要解决的技术问题，提供一种能够准确评价板蓝根或其制品药效(特别是抗流感药效)的技术方案。为了实现以上专利技术目的，本专利技术提供了一种板蓝根或其制品的质量分析方法，其采用CaulilexinC作为指标成分进行定性定量分析。以上所称制品是指含有板蓝根成分的药物(包括各种中药制剂，如饮片)、食品或板蓝根提取物。本专利技术通过对板蓝根开展了深入的化学研究，分离鉴定了近百个单体成分，并针对板蓝根抗流感这一优势功效，在常规的MDCK细胞模型上进行了抗H1N1甲型流感病毒活性筛选，首次发现CaulilexinC具有显著的抗流感病毒活性，且含量突出，活性也强于以往报道的其它板蓝根成分，可以作为板蓝根抗流感药效的重要质量分析指标。本专利技术所述的CaulilexinC具有如下结构式：CaulilexinC是一种小分子吲哚化合物，分子量186，有紫外吸收，易溶于各种常见有机溶剂，可方便地使用高效液相色谱、气相色谱、薄层色谱进行分析。基于该药效物质的发现，本专利技术旨在提供一种新的板蓝根质量分析方法，其主要技术特征在于使用CaulilexinC作为指标成分，对板蓝根的药材、饮片、提取物及其单方和复方制剂进行定性定量分析。作为本专利技术的方法的优选技术方案，采用色谱法，包括高效液相色谱(含HPLC和UPLC)、气相色谱和薄层色谱法，对板蓝根中的CaulilexinC进行定性定量分析，最优选高效液相色谱法。本领域技术人员也可以视情况选择气相色谱或薄层色谱进行分析，均能取得基本一致的分析结果。上述高效液相色谱法包括如下操作步骤：a.供试品溶液的制备：取待测样品粉末或浸膏适量，精密称定，置容量瓶中，加入甲醇适量，加热，超声，放冷，甲醇定容，摇匀，滤过，取续滤液备用；b.对照品溶液的制备：取CaulilexinC适量，精密称定，置容量瓶中，加甲醇溶解并稀释定容，摇匀，制成每1ml含0.02mg的溶液，即得。c.色谱条件：色谱柱为十八烷基键合相硅胶柱；流动相由A相和B相组成，A相为甲本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种板蓝根或其制品的质量分析方法，其特征在于，采用Caulilexin C作为指标成分进行定性定量分析。/n

【技术特征摘要】
1.一种板蓝根或其制品的质量分析方法，其特征在于，采用CaulilexinC作为指标成分进行定性定量分析。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述CaulilexinC具有如下结构式：





3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述制品是含有板蓝根成分的药物、食品或板蓝根提取物。


4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，采用色谱法进行定性定量分析。


5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述色谱法包括高效液相色谱法、气相色谱法、薄层色谱法中的任意一种或多种。


6.根据权利要求1所述的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：李菁，潘锡平，钟南山，
申请(专利权)人：广州医科大学附属第一医院，广州安捷制药有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44