一种测定血液中苯巴比妥的方法、试剂盒及应用技术

本发明专利技术公开了一种测定血液中苯巴比妥的方法、试剂盒及应用，属于血药浓度测定技术领域，该方法采用HPLC‑MS/MS测定血液样品中苯巴比妥含量，具体包括以下步骤：(1)血液样品预处理；(2)标准工作液的配制；(3)HPLC‑MS/MS检测；本发明专利技术采用分散固相萃取法，以PSA和PLS为分散固相萃取剂除去血浆中的杂质，无水硫酸镁和无水硫酸钠除去血浆中的水分，降低基质对测定的影响，通过优化分散固相萃取样品预处理条件和LC/MS‑MS检测条件，建立快速、准确、绿色的分散固相萃取‑液相色谱串联质谱法测定血浆样品中苯巴比妥药物的新方法，并取得了较为满意的结果。

A method, kit and application for the determination of phenobarbital in blood

【技术实现步骤摘要】
一种测定血液中苯巴比妥的方法、试剂盒及应用
本专利技术涉及血药浓度测定
，特别是涉及一种测定血液中苯巴比妥的方法、试剂盒及应用。
技术介绍
镇静类药物是临床常用药物，对中枢神经系统有抑制作用，主要用于失眠、焦虑、紧张、恐惧、癫痫病和术前镇静等。镇静类药物通常分为苯二氮卓类(艾司唑仑、咪达唑仑、阿普唑仑、三唑仑、地西泮、氯硝西泮、劳拉西泮、硝西泮、奥沙西泮、氯氮卓等)、巴比妥类(巴比妥、苯巴比妥、异戊巴比妥等)、吩噻嗪类(氯丙嗪、异丙嗪等)、喹唑酮类(安眠酮等)和咪唑并吡啶类(唑吡坦等)等。研究实践显示，巴比妥类药物具有成瘾性，且其治疗剂量与中毒剂量较为接近，因此在临床上已逐渐被苯二氮卓类药物取代。但由于其应用广泛，较易获得，因此易被吸毒人员或犯罪分子不法使用，甚者导致自杀、他杀、过量服用中毒等刑事案件的发生。因此，巴比妥类药物在涉毒案例的鉴定中有着较高的检出率，尤其是苯巴比妥。生物检材中巴比妥类药物的定性和定量分析在临床毒物分析及法医毒物分析领域中也见有较多的应用与报道。目前关于镇静类药物的检测方法主要有高效液相色谱法(HPLC)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定血液中苯巴比妥的方法，其特征在于，采用HPLC-MS/MS测定血液样品中苯巴比妥含量，具体包括以下步骤：/n(1)血液样品预处理：以PSA和/或PLS为分散固相萃取剂除去血液样品中的杂质，无水硫酸镁和/或无水硫酸钠除去血液样品中的水分；/n(2)标准工作液的配制；/n(3)HPLC-MS/MS检测：液相色谱采用乙腈-甲酸水溶液作为流动相；质谱采用负离子电喷雾离子化的多离子反应检测。/n

【技术特征摘要】
1.一种测定血液中苯巴比妥的方法，其特征在于，采用HPLC-MS/MS测定血液样品中苯巴比妥含量，具体包括以下步骤：
(1)血液样品预处理：以PSA和/或PLS为分散固相萃取剂除去血液样品中的杂质，无水硫酸镁和/或无水硫酸钠除去血液样品中的水分；
(2)标准工作液的配制；
(3)HPLC-MS/MS检测：液相色谱采用乙腈-甲酸水溶液作为流动相；质谱采用负离子电喷雾离子化的多离子反应检测。


2.根据权利要求1所述的测定血液中苯巴比妥的方法，其特征在于，所述血液样品为血浆或血清。


3.根据权利要求1所述的测定血液中苯巴比妥的方法，其特征在于，所述血液样品预处理的方法为：
取血液样品，加入2倍血液体积的乙腈振荡提取5min，在离心力3000g下离心5min，取上清液，然后加入重量比为1：1的PSA/PLS的混合物，再加入重量比为4：1的无水硫酸镁/无水硫酸钠混合物，涡旋振荡5min，在离心力3000g下离心5min，取上清液，用0.22μm滤膜过滤后进样分析。


4.根据权利要求3所述的测定血液中苯巴比妥的方法，其特征在于，所述PSA/PLS的混合物的加入量与血液的比例为5mg：1mL；所述无水硫酸镁/无水硫酸钠混合物的加入量与血液的比例为500mg：1mL。


5.根据权利要求1所述的测定血液中苯巴比妥的方法，其特征在于，所述标准工作液的配制方法为：
以乙腈配制1.0mg/mL标准品储备液，然后用乙腈溶液制备8个梯度，分别为0.05、0.1、0.5、1.0、5.0、10.0、50.0、100.0μg/L；标准溶液分装于1.5mL棕色瓶中，-20℃保存备用。


6.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：金米聪，陈晓红，林梦，周健，俞建成，
申请(专利权)人：宁波市疾病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：浙江;33