【技术实现步骤摘要】
利用同位素标记技术定量微量生物样本蛋白质组的方法
本专利技术涉及蛋白质组学领域,特别涉及一种利用同位素标记技术定量微量生物样本蛋白质组的方法。
技术介绍
蛋白质组学,是以蛋白质组为研究对象,研究细胞、组织或生物体蛋白质组成及其变化规律的科学,通过研究蛋白质组不仅能为生命活动提供物质基础,也能为众多疾病机理的阐明及攻克提供理论根据和解决途径。在生物医学研究中经常需要分析微量生物样本的蛋白质,比如:通过研究单细胞或少量细胞可以理解其生物发生发展的规律,通过分析少量临床组织可以分析其异质性,通过分析少量体液(尿液、血液等)有望提高诊疗效果。然而,目前对微量生物样本的蛋白质组分析具有多个技术障碍,其中最为显著的两点,一是蛋白质提取过程的蛋白质丢失严重,导致可用于检测的产物过少;二是质谱的响应信号由于过低而受到噪声等的严重干扰,这使得研究者们很难得到具有统计学意义的蛋白信号、更加难以获得其鉴定或定量的信息。为了实现微量生物样本的蛋白质组分析,现有技术往往采用复杂精密的系统或工作流,以尽可能降低细胞内的蛋白在样本制备中及 ...
【技术保护点】
1.一种利用同位素标记技术定量微量生物样本蛋白质组的方法,其特征在于,包括以下步骤:/nS1:针对待测的目标样本设计伴随样本,其中伴随样本和目标样本在生物学上同源同系;/nS2:同位素标记伴随样本;/nS3:混合目标样本和伴随样本得到检测样本;/nS4:对检测样本进行蛋白处理得到蛋白质样本;/nS5:通过液相色谱与质谱联用的方法对蛋白质样本进行液相质谱数据采集;以及/nS6:数据分析定量目标样本的蛋白质。/n
【技术特征摘要】
1.一种利用同位素标记技术定量微量生物样本蛋白质组的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:针对待测的目标样本设计伴随样本,其中伴随样本和目标样本在生物学上同源同系;
S2:同位素标记伴随样本;
S3:混合目标样本和伴随样本得到检测样本;
S4:对检测样本进行蛋白处理得到蛋白质样本;
S5:通过液相色谱与质谱联用的方法对蛋白质样本进行液相质谱数据采集;以及
S6:数据分析定量目标样本的蛋白质。
2.根据权利要求1所述的利用同位素标记技术定量微量生物样本蛋白质组的方法,其特征在于,若目标样本为细胞系,则选择相同的细胞系作为伴随样本;若目标样本为原代细胞,选择生物学相近的一种或若干种细胞系作为伴随样本;若目标样本为组织或体液样本,选择生物学相近的一种或若干种细胞系作为伴随样本。
3.根据权利要求1所述的利用同位素标记技术定量微量生物样本蛋白质组的方法,其特征在于,在步骤S3当中,当伴随样本仅被一种标记氨基酸标记时,将伴随样本和目标样本进行混合,其中伴随样本和目标样本之间混合比例不大于100;当伴随样本被多种标记氨基酸标记时,将不同标记的伴随样本均和目标样本进行混合,其中每个不同标记的伴随样本和目标样本混合比例不大于100。
4.根据权利要求1所述的利用同位素标记技术定量微量生物样本蛋白质组的方法,其特征在于,在步骤S3当中,混合的方式有两种:第一种,裂解处理伴随样本得到伴随样本裂解液,等分伴随样本裂解液得到等份伴随样本裂解液,将等份伴随样本裂解...
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