一种基于重组酶聚合酶扩增技术检测半乳糖的方法技术

技术编号:24399276 阅读:58 留言:0更新日期:2020-06-06 04:45
本发明专利技术基于重组酶聚合酶扩增技术对半乳糖进行检测,可用于对食品等生物样品含有的半乳糖成分进行定性、定量的检测方法,该方法结合重组酶聚合酶对核酸模板指数放大的特点与半乳糖阻遏蛋白对扩增的抑制作用,利用半乳糖特异性调节半乳糖阻遏蛋白抑制作用的效果,开发出半乳糖对重组酶聚合酶扩增的“开关式”调控方法,通过对扩增产物检测进而特异性检测溶液中半乳糖成分并进行定量。该发明专利技术提出了一种能在生物样品中经济、快捷、方便的特异性检测半乳糖的新式方法。

A method of galactose detection based on recombinant enzyme PCR

【技术实现步骤摘要】
一种基于重组酶聚合酶扩增技术检测半乳糖的方法
本专利技术涉及生物样品检测领域,主要涉及一种基于重组酶聚合酶扩增技术的检测半乳糖的方法,该方法可用于对食品等生物样品中的半乳糖定性、定量分析。
技术介绍
半乳糖是一种天然醛己糖,主要以D-构型存在。人体通过各种乳制品及非乳制品食物获得(如水果、蔬菜、谷物、油料类等),其游离的或结合的半乳糖形式(例如低聚糖和多糖、糖蛋白和糖脂),并在人体内作为碳水化合物参与正常代谢同时作为促进婴幼儿脑部神经发育的重要物质。乳糖占牛奶中的2-8%,作为婴幼儿断乳前的主要能量来源,正常情况下,摄入后,在小肠分解成单糖,分解的半乳糖经半乳糖激酶、半乳糖1-磷酸尿嘧啶转移酶、和尿苷二磷酸半乳糖-4'表异构酶的作用进入糖酵解过程,当这些酶其中一种在体内无法被有效合成时都会导致半乳糖在体内的堆积形成半乳糖血症,使患儿遭受各种健康困扰如白内障,肝脏疾病,肾脏,大脑损害等问题等。实施在饮食中限制半乳糖是有益的措施,大大降低了这类患儿严重的临床症状。但值得注意的是所有年龄段的患者终生都必须接受半乳糖限制饮食。半乳糖与葡本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于重组酶聚合酶扩增技术检测半乳糖的方法,其特征在于:利用GalR与核酸序列结合能力受D-gal特异性调控的作用,将GalR识别序列构建在RPA的扩增模板上,然后将该模板和GalR加入RPA扩增体系,使GalR阻断聚合酶对RPA引物的延伸反应,D-gal的特异性加入,降低了GalR结合扩增模板的能力,降低程度与D-gal浓度正相关,与产生的扩增产物呈正相关,通过绘制半乳糖浓度与RPA扩增产物散点图,拟合线性相关程度,用于计算样品中未知半乳糖浓度。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于重组酶聚合酶扩增技术检测半乳糖的方法,其特征在于:利用GalR与核酸序列结合能力受D-gal特异性调控的作用,将GalR识别序列构建在RPA的扩增模板上,然后将该模板和GalR加入RPA扩增体系,使GalR阻断聚合酶对RPA引物的延伸反应,D-gal的特异性加入,降低了GalR结合扩增模板的能力,降低程度与D-gal浓度正相关,与产生的扩增产物呈正相关,通过绘制半乳糖浓度与RPA扩增产物散点图,拟合线性相关程度,用于计算样品中未知半乳糖浓度。


2.按照权利要求1所述基于重组酶聚合酶扩增技术检测半乳糖的方法,其特征在于:所述的RP...

【专利技术属性】
技术研发人员:赵国杰段絮英
申请(专利权)人:中国医科大学
类型:发明
国别省市:辽宁;21

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