【技术实现步骤摘要】
基于能量共振转移检测Hg2+的自增强电化学发光适配体传感器的制备方法
本专利技术属于生物传感检测
，涉及一种基于能量共振转移体系的自增强电化学发光适配体传感器的制备方法及在Hg2+检测中应用。
技术介绍
汞是唯一一种以液态存在的重金属。众所周知，Hg2+是分布最广、最稳定的存在形式。Hg2+是一种剧毒物质，对于生态环境造成非常大的威胁，甚至在很低的浓度也会侵害人体，比如破坏人体机能，使皮肤溃烂，大脑损伤等不可逆的后果。对于发展快速简便的方法实现对Hg2+的检测是刻不容缓的。目前常用的Hg2+分析测定方法有原子吸收光谱法(AFS)、电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)和原子荧光光谱法等。尽管这些方法结果准确，但是它们需要专业技术支持而且仪器昂贵。电化学法(EC)、电化学发光法(ECL)、荧光法(FL)等，这些方法操作简单，耗费较少而且可信度高。其中ECL因其可控性强，性能稳定等特征引起科学家们广泛的关注。为了进一步提高ECL发光效率，自增强ECL逐渐进入人们的视线。同时为了使结果更加准确，引入能量共振转...
【技术保护点】
1.一种基于能量共振转移检测Hg
【技术特征摘要】
1.一种基于能量共振转移检测Hg2+的自增强电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：
(1)Ru@SiO2材料的制备：
首先，将曲拉通、环己烷、1-己醇加入到二次水中，通过反向微乳法得到微乳液，反应结束后，加入三联吡啶钌、硅酸四乙酯、氨水继续进行搅拌反应，反应结束后，得到的产物依次溶于丙酮、乙醇、二次水，离心洗涤，得到下层沉淀，经真空干燥，得到的Ru@SiO2；溶解在超纯水中，得到Ru@SiO2分散液；
(2)NH2-Ru@SiO2复合材料的制备：
首先，将步骤(1)中制备的Ru@SiO2分散液与APTES混合，搅拌反应，结束后，得到的产物用乙醇溶解，离心，得到的下层沉淀，经真空干燥，得到的NH2-Ru@SiO2；溶解在乙醇中，得到NH2-Ru@SiO2分散液；
(3)NH2-Ru@SiO2-NGQDs复合材料的制备：
首先，将步骤(2)中制备的NH2-Ru@SiO2分散液与NGQDs混合，搅拌反应结束后，得到的产物用二次水溶解，离心取上层黄色澄清液，即NH2-Ru@SiO2-NGQDs；
(4)NH2-Ru@SiO2-NGQDs-DNA复合材料的制备：
首先，在步骤(3)中制备的NH2-Ru@SiO2-NGQDs中加入含有EDC与NHS的PBS缓冲液，反应结束后，加入DNA，继续搅拌，得到黄色的NH2-Ru@SiO2-NGQDs-DNA，放置备用；
(5)金纳米粒子溶液AuNPs的制备：
首先，将氯金酸溶液(HAuCl4·3H2O)与二次水混合，在油浴回流的装置下搅拌反应至沸腾后，加入柠檬酸三钠溶液，继续搅拌，直到颜色变成紫红色，反应结束，放置备用；
(6)AuNPs-apt的制备：
首先，将步骤(5)中制备的金纳米粒子溶液AuNPs与步骤(4)DNA相适应的适配体溶液混合，在黑暗中静置，然后常温下搅拌，反应结束后，离心，得到的上层溶液放置备用；
(7)将玻碳电极依次用不同粒径的三氧化二铝粉末打磨，在乙醇和水中超声后于空气中干燥；
(8)将步骤(4)制备的自增强发光体材料NH2-Ru@SiO2-NGQDs-DNA修饰到步骤(7)制备的玻碳电极表面，下干燥；
(9)将步骤(6)制备的AuNPs-apt滴加到步骤(8)制备的自组装电极表面，在下，通过碱基配对与NH2-Ru@SiO2-NGQDs-DNA结合，形成自组装电极；
(10)在一定温度下，将步骤(9)制备的自组装电极浸入牛血清白蛋白BSA溶液中孵育，以阻断剩余的非特异性结合位点，制得基于NH2-Ru@SiO2-NGQDs的电化学发光适配体传感器。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，
步骤(1)中，曲拉通、环己烷、1-己醇和二次水中的用量比例为1.77mL：7.5mL：1.8mL：340μL，反应时间为15min，三联吡啶钌、硅酸四乙酯、氨水的...
【专利技术属性】
技术研发人员：由天艳，陈柏年，李丽波，罗莉君，毕晓雅，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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