一种处理CHO细胞发酵液的方法技术

本发明专利技术提供了一种处理CHO细胞发酵液的方法，具体步骤为碟片离心机处理CHO细胞发酵液后，经深层过滤和无菌处理即可获得发酵澄清液。经过本发明专利技术提供的处理方法可有效去除发酵液中含有的细胞碎片、HCP、宿主DNA、高分子聚合物等众多杂质，获得具有较高收率和较低浊度的发酵澄清液，极大的简化了下游纯化蛋白所需的工艺步骤。

A method of treating CHO cell fermentation broth

【技术实现步骤摘要】
一种处理CHO细胞发酵液的方法
本专利技术属于生物制药的蛋白质除杂制备
，具体涉及一种碟片离心机和深层过滤联用处理CHO细胞发酵液的方法。
技术介绍
CHO细胞是由Puck于1957年在中国仓鼠卵巢细胞发现的成纤维细胞系。发展至今，CHO细胞已成为生物技术药物领域最重要的细胞表达和生产系统。随着无血清悬浮培养技术、基因工程技术、生物反应器设计放大与强化技术以及大规模高密度细胞培养等技术的发展，CHO细胞系统被广泛应用于抗体药物、基因重组蛋白药物、病毒疫苗等生物
的研究开发和工业化生产中。CHO细胞发酵是通过改造和筛选来得到高产的重组细胞株，同时开发了适用于CHO细胞生长的无血清培养基，通过将新的生物反应器培养技术应用于大规模重组蛋白的表达，从而得到了高产量的重组蛋白。细胞培养过后需要经过澄清过滤、纯化制剂等步骤才能获得最后的目标重组蛋白。然而细胞培养液中包含细胞碎片、宿主细胞蛋白、DNA、高分子聚合物等众多杂质，需要比较复杂的纯化步骤和纯化工艺。目前，在细胞发酵液的预处理过程中，比较常用的有深层过滤(DF)、微滤(MF)、超本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种处理CHO细胞发酵液的方法，其特征在于，具体为一种碟片离心机和深层过滤系统联用处理CHO细胞发酵液的方法，其主要步骤为：/n1)当CHO细胞发酵液到达发酵终点时，将发酵液温度降至10-25℃，调节发酵罐的压力保持在300-1000mba之间，同时调节缓冲罐压力使其与发酵罐压力相同；/n2)将发酵液输送至碟片离心机进行离心处理，收集离心上清液，碟片离心机操作水压力保持在2.0ba以上；/n3)收集的离心上清液经深层过滤系统进行深层过滤处理，得到发酵澄清液；/n4)在深层过滤系统后加装0.22微米无菌过滤器，对澄清液做除菌过滤，获得含有目标蛋白的无菌发酵澄清液。/n

【技术特征摘要】
1.一种处理CHO细胞发酵液的方法，其特征在于，具体为一种碟片离心机和深层过滤系统联用处理CHO细胞发酵液的方法，其主要步骤为：
1)当CHO细胞发酵液到达发酵终点时，将发酵液温度降至10-25℃，调节发酵罐的压力保持在300-1000mba之间，同时调节缓冲罐压力使其与发酵罐压力相同；
2)将发酵液输送至碟片离心机进行离心处理，收集离心上清液，碟片离心机操作水压力保持在2.0ba以上；
3)收集的离心上清液经深层过滤系统进行深层过滤处理，得到发酵澄清液；
4)在深层过滤系统后加装0.22微米无菌过滤器，对澄清液做除菌过滤，获得含有目标蛋白的无菌发酵澄清液。


2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1中所述的CHO细胞发酵液到达终点时的相关参数为：细胞密度在1*107-3*107cell/ml，细胞活率在80％以上，细胞液浊度在1500-3000NTU。


3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1中所述的CHO细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：张贵民，赵丽丽，刘忠，
申请(专利权)人：鲁南制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37