一种苦瓜外泌体及其提取方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种苦瓜外泌体及其提取方法与应用，提取步骤如下：取适量新鲜云南山野苦瓜，去籽洗净并晾干；榨取苦瓜汁，将苦瓜汁连续离心，离心后取上清，弃沉淀；将取得的上清超速离心，弃上清，取沉淀，沉淀悬浮于1‑2mL的磷酸缓冲盐溶液中；将悬浮液用0.22μm的滤膜过滤，滤液再次于超速冷冻离心机中离心，弃上清，取沉淀，沉淀悬浮于1‑2mL的磷酸缓冲盐溶液中。提取的苦瓜外泌体可用于制备治疗缺血性脑中风药物。本发明专利技术的提取方法方便有效，提取纯度高，提取的苦瓜外泌体具有脑卒中后神经损伤的保护作用。

Exosomes of Momordica charantia and its extraction method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种苦瓜外泌体及其提取方法与应用
本专利技术涉及医药领域，具体涉及一种苦瓜外泌体及其提取方法与应用。
技术介绍
缺血性脑中风具有高发病率、高致残率、高死亡率的特点。脑中风包括出血性脑中风和缺血性脑中风，其中缺血性脑中风约占87％，缺血性脑中风主要由于大脑血管堵塞造成血流减少，大脑供血不足引起。临床上治疗脑中风的方法是用t-PA溶栓，但是t-PA具有严格的治疗时间窗为4.5h，超过治疗时间窗会引起出血转换(更严重的损伤)，临床上迫切需要更为安全、有效的治疗药物。外泌体(Exosomes)是细胞释放到环境中粒径大小为30-200nm的细胞外囊泡，呈蝶状，由特定的蛋白质、脂质和核酸物质组成。其携带的多种miRNA能与靶细胞膜表面的特定受体结合，调控多种信号通路，调节多种生理和病理过程。能否从苦瓜中提取外泌体，并用于缺血性脑卒中的治疗中，未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供一种苦瓜外泌体的提取方法，能够从植物苦瓜中提取外泌体。本专利技术的目的之二是提供上述方法提取的苦瓜外泌体在制备治疗缺血性脑中风药物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种苦瓜外泌体的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)取适量新鲜云南山野苦瓜，去籽洗净并晾干；/n(2)晾干后榨取苦瓜汁，将苦瓜汁连续离心，于4℃，1000g，10min；3000g，20min；10000g，40min；离心后取上清，弃沉淀；/n(3)将取得的上清超速离心，于超速冷冻离心机中4℃，150000g，离心90min，离心后弃上清，取沉淀，沉淀悬浮于1-2mL的磷酸缓冲盐溶液中；/n(4)将悬浮液用0.22μm的滤膜过滤，滤液再次于超速冷冻离心机中4℃，150000g，离心90min，离心后弃上清，取沉淀，沉淀悬浮于1-2mL的磷酸缓冲盐溶液中。/n

【技术特征摘要】
1.一种苦瓜外泌体的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取适量新鲜云南山野苦瓜，去籽洗净并晾干；
(2)晾干后榨取苦瓜汁，将苦瓜汁连续离心，于4℃，1000g，10min；3000g，20min；10000g，40min；离心后取上清，弃沉淀；
(3)将取得的上清超速离心，于超速冷冻离心机中4℃，150000g，离心90min，离心后弃上清，取沉淀，沉淀悬浮于...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐素华，顾兵，蔡恒，黄琳燕，王彦玲，
申请(专利权)人：徐州医科大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32