一种精子外源基因转染方法技术

技术编号:24325376 阅读:52 留言:0更新日期:2020-05-29 17:56
本发明专利技术公开了一种精子外源基因转染方法,包括以下步骤:A、将载体与外源基因进行混合,制得载体与外源基因的复合物;B、将奶牛精子放入氯化钙溶液中,缓慢搅拌15min;C、将步骤A制得的复合物放入步骤B的氯化钙溶液中,进行转染1h;D、在步骤C的氯化钙溶液中插入电击管,进行电击转染3h。本发明专利技术可以解决现有技术的不足,提高了稳定转染的效率。

A method of sperm exogenous gene transfer

【技术实现步骤摘要】
一种精子外源基因转染方法
本专利技术涉及生物
,尤其是一种精子外源基因转染方法。
技术介绍
近年来基因重组技术快速发展,其中通过转染方式进行基因重组是一种常用的方法。传统基因转染技术在形成稳定转染的效率上较低,如何提高转染效率成为了本领域亟待解决的技术问题之一。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种精子外源基因转染方法,能够解决现有技术的不足,提高了稳定转染的效率。为解决上述技术问题,本专利技术所采取的技术方案如下。一种精子外源基因转染方法,步骤如下:A、将载体与外源基因进行混合,制得载体与外源基因的复合物;B、将奶牛精子放入氯化钙溶液中,缓慢搅拌15min;C、将步骤A制得的复合物放入步骤B的氯化钙溶液中,进行转染1h;D、在步骤C的氯化钙溶液中插入电击管,进行电击转染3h。作为优选,步骤A中,载体包含有SEQIDNO.1的核苷酸序列所表示的编码基因。作为优选,步骤B中,氯化钙溶液的浓度为7wt%。作为优选,步骤C中,复合物与奶牛精子的摩尔比为10∶1。作为优选,步骤D中,电击管的电压为180V。采用上述技术方案所带来的有益效果在于:本专利技术通过使用高效率载体提高了转染的靶向性,同时配合优化后的转染操作步骤,实现载体与细胞的快速融合,从而实现提高转染效率的目的。具体实施方式一种精子外源基因转染方法,步骤如下:A、将载体与外源基因进行混合,制得载体与外源基因的复合物;B、将奶牛精子放入氯化钙溶液中,缓慢搅拌15min;C、将步骤A制得的复合物放入步骤B的氯化钙溶液中,进行转染1h;D、在步骤C的氯化钙溶液中插入电击管,进行电击转染3h。步骤A中,载体包含有SEQIDNO.1的核苷酸序列所表示的编码基因。步骤B中,氯化钙溶液的浓度为7wt%。步骤C中,复合物与奶牛精子的摩尔比为10∶1。步骤D中,电击管的电压为180V。本专利技术可以将奶牛精子稳定转染的效率至少提高15%。上述描述仅作为本专利技术可实施的技术方案提出,不作为对其技术方案本身的单一限制条件。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种精子外源基因转染方法,其特征在于步骤如下:/nA、将载体与外源基因进行混合,制得载体与外源基因的复合物;/nB、将奶牛精子放入氯化钙溶液中,缓慢搅拌15min;/nC、将步骤A制得的复合物放入步骤B的氯化钙溶液中,进行转染1h;/nD、在步骤C的氯化钙溶液中插入电击管,进行电击转染3h。/n

【技术特征摘要】
1.一种精子外源基因转染方法,其特征在于步骤如下:
A、将载体与外源基因进行混合,制得载体与外源基因的复合物;
B、将奶牛精子放入氯化钙溶液中,缓慢搅拌15min;
C、将步骤A制得的复合物放入步骤B的氯化钙溶液中,进行转染1h;
D、在步骤C的氯化钙溶液中插入电击管,进行电击转染3h。


2.根据权利要求1所述的精子外源基因转染方法,其特征在于:步骤A中,载体包含...

【专利技术属性】
技术研发人员:钱芳张晓婷李丽
申请(专利权)人:新疆维吾尔自治区生殖健康医院
类型:发明
国别省市:新疆;65

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