一种硒单糖的酶催化检出方法技术

本发明专利技术涉及一种细胞色素P450单加氧酶(CYP236A20)、铁氧化还原蛋白(FoX)、铁氧还蛋白还原酶(FoR)和四甲基联苯胺(TMB

An enzymatic detection method of selenium monosaccharide

【技术实现步骤摘要】
一种硒单糖的酶催化检出方法
本专利技术涉及硒单糖的检出方法，尤其涉及一种硒单糖的酶催化检出方法。
技术介绍
硒是人体必需的微量矿物质，硒缺乏所致“克山病”在我国北方和中西部偏远地区普遍发生；近现代临床医学进一步证实，人体硒含量与多种疾病相关分子(如心血管疾病的标志物-同型半胱氨酸)的代谢表达密切相关。因此，建立评价硒营养水平的生化指标极其必要。然而，根据已知的硒合成代谢，作为人血浆硒库的硒蛋白P结构保守性不佳并存在表达阈值，而其系列甲基化产物及硒取代含硫氨基酸在不同组织、细胞中的表达不一致且测量误差大，故都不适宜于作为健康监测的标志物。最新物种形成分析研究发现，人尿液中存在一种含量占绝对主导的硒排泄物，其学名为“1β-甲基硒-2-N-乙酰基-D-半乳糖胺”(1β-selenomethyl-2-N-acetyl-D-galactosamine，简称GalNAc1SeMe)，有望成为潜在的评估终点，这可为进一步阐明生物硒关联代谢提供有效的分析手段。1β-甲基硒-2-N-乙酰基-D-半乳糖胺对应的半缩醛结构如下：目前，对特殊的硒掺杂化本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.细胞色素P450单加氧酶、铁氧化还原蛋白、铁氧还蛋白还原酶和还原型四甲基联苯胺在检测硒单糖或制备硒单糖检出试剂中的应用，所述硒单糖为1β-甲基硒-2-N-乙酰基-D-半乳糖胺。/n

【技术特征摘要】
1.细胞色素P450单加氧酶、铁氧化还原蛋白、铁氧还蛋白还原酶和还原型四甲基联苯胺在检测硒单糖或制备硒单糖检出试剂中的应用，所述硒单糖为1β-甲基硒-2-N-乙酰基-D-半乳糖胺。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述细胞色素P450单加氧酶由大肠杆菌(Escherichiacoli)重组表达，源于NCBI序列号为WP_038530297.1的细菌Formosaagariphila，细胞色素P450单加氧酶代号为CYP236A20。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述CYP236A20、铁氧化还原蛋白、铁氧还蛋白还原酶和还原型四甲基联苯胺的浓度比为0.01～1.0:1.0～90.0:0.2～18.0:250～3000。


4.一种硒单糖的酶催化检出方法，所述硒单糖为1β-甲基硒-2-N-乙酰基-D-半乳糖胺，其特征在于，包括以下步骤：
提供含有细胞色素P450单加氧酶、铁氧化还原蛋白和铁氧还蛋白还原酶的待测溶液；
向待测溶液中加入还原型四甲基联苯胺溶液，根据待测溶液的颜色变化判断待测溶液中是否含有所...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓盛元，王丽娟，黄洁，吴希，郭睿，李臻怡，宋美燕，王健，郭仁妹，
申请(专利权)人：迈科若苏州医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32