用于犬细粒棘球绦虫的LAMP检测引物组、试剂盒及方法技术

本发明专利技术提供了用于犬细粒棘球绦虫的LAMP检测引物组、试剂盒及方法。该引物组包括：与犬细粒棘球绦虫的COX2基因序列结合的外侧引物对F3和B3，及与犬细粒棘球绦虫的COX2基因序列结合的内侧引物对FIP和BIP，用该引物组进行检测时，其检测方法具有灵敏度高、效率高、反应时间短、特异性高、操作简便、结果判定简单等优点，且广泛适用于基层。

Primer set, kit and method for lamp detection of Echinococcus granulosus in dogs

【技术实现步骤摘要】
用于犬细粒棘球绦虫的LAMP检测引物组、试剂盒及方法
本专利技术属于生物
，具体涉及用于犬细粒棘球绦虫的LAMP检测引物组、试剂盒及方法。
技术介绍
棘球蚴病，又称包虫病，是由棘球绦虫幼虫—棘球蚴寄生于人和动物体内而引起的一种危害严重的人畜共患寄生虫病。棘球绦虫的成虫寄生于终宿主犬科动物的小肠内,虫体成熟后,虫卵和成熟的孕节片可随粪便排出体外。若被中间宿主(主要是啮齿类动物以及一些家畜如羊、牛、马、猪等)食入活虫卵后,形成幼虫寄生于肝脏、肺脏、腹腔等,犬又通过吞食带有幼虫的内脏而感染。犬作为包虫病的终末宿主，是该病最重要的传染源。目前，对棘球绦虫的检测主要有传统常规粪便检测法、粪抗原ELISA检测法和PCR分子生物学检测方法。常规粪便检测法繁琐费时，检出率低，且无法从犬粪便中区分细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的虫卵，存在感染操作人员的风险；粪抗原ELISA检测法和PCR均具有较好特异性和敏感性，但是费时费力、所需仪器复杂，不利于基层流行病学的调查和大量样品的检测。因此，建立一种快速、简便、灵敏的能用于细粒棘球绦虫的流行病学调查及现场诊本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一组用于犬细粒棘球绦虫的LAMP检测引物组，其包括：与犬细粒棘球绦虫的COX2基因序列结合的外侧引物对F3和B3，及与犬细粒棘球绦虫的COX2基因序列结合的内侧引物对FIP和BIP，其特征在于：所述F3和B3的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，所述FIP和BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。/n

【技术特征摘要】
20190228 CN 20191015324991.一组用于犬细粒棘球绦虫的LAMP检测引物组，其包括：与犬细粒棘球绦虫的COX2基因序列结合的外侧引物对F3和B3，及与犬细粒棘球绦虫的COX2基因序列结合的内侧引物对FIP和BIP，其特征在于：所述F3和B3的核苷酸序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示，所述FIP和BIP的核苷酸序列如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示。


2.如权利要求1所述的用于犬细粒棘球绦虫的LAMP检测引物在制备检测犬细粒棘球绦虫的LAMP试剂盒或检测试剂中的应用。


3.含如权利要求1所述用于犬细粒棘球绦虫的LAMP检测引物的检测试剂盒。


4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，其还包括：环介导等温扩增缓冲液、阳性对照、阴性对照和/或显色液。


5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述环介导等温扩增缓冲液为包括有Tris-HCl、KCl、(NH4)2SO4、Tween-20、MgSO4、甜菜碱、脱氧核苷酸、BstDNA聚合酶的水溶液；
所述显色液包括SYBRGreenI和羟甲基萘酚蓝。


6.一种采用如权利要求1所述引物组的快速检测犬细粒棘球绦虫的LAMP检测方法，是用所述的犬细粒棘球绦虫的LAMP检测引物组对待测样品DNA进行环介导等温扩增反应，检测扩增产物；所述环介导等温扩增反应的条件为：63℃、30～60分钟。


7.如权利要求6所述的LAMP检测方法，其特征在于，其包括如下步骤：
S1、取犬粪便待检样本，提取DN...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑雪莹，邓柏林，吴文学，陈会玲，闫新博，宋彦军，张启龙，韦海涛，刘海莹，
申请(专利权)人：北京市动物疫病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：北京;11