一种分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法技术

本发明专利技术公开了一种分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法，采用大赛璐键合型手性色谱柱，以正己烷、异丙醇、甲醇的混合溶液作为流动相，在一定条件下进行等度洗脱；本发明专利技术分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法，该方法简便，能够同时分离检测富马酸丙酚替诺福韦的多个异构体及其他有关物质，并且色谱峰峰型良好，结果准确，可用于富马酸丙酚替诺福韦生产过程的质量控制。

An analytical method for the separation and detection of propofol tenofovir fumarate isomers

【技术实现步骤摘要】
一种分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法
本专利技术涉及一种分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法，属于医药分析检测领域。
技术介绍
富马酸丙酚替诺福韦，其结构式如图1所示，富马酸丙酚替诺福韦，英文名字为TenofovirAlafenamide，为吉利德(Gilead)公司推出的一个抗艾滋病毒和乙肝病毒的替诺福韦的前药(代号GS-7340)。富马酸丙酚替诺福韦是一个含有3个手性中心化合物，如图2所示，其理论上应该有7个光学异构体(其中3对非对映异构体，1个对映异构体)，均为杂质。在医药领域中，对化学药品的杂质的控制关乎到药品的质量和使用安全，因此对化学药品的有关物质进行准确地分析检测，控制其含量是非常有意义的。中国专利申请号01813161.1核苷酸膦酸酯类似物前药及其筛选和制备方法中公开了一种采用反相HPLC分离检测富马酸丙酚替诺福韦及其一个非对映异构体的分析方法；该分析方法采用PhenomenexLunaC185μm，100A°(或等效色谱柱)；保护柱是PellicularC18(或等效色谱柱)；流动相是，A相含有0.02％磷酸(85％)的水-乙腈(95:5)溶液，B相是含有0.02％磷酸(85％)的水-乙腈(50:50)溶液；梯度洗脱程序示意图如图3所示，操作时间：50min；平衡延迟：在100％流动相A的条件下为10min；流速：1.2mL/min；温度：室温；检测：UV260nm；样品溶液：20mmol/L磷酸钠缓冲溶液，pH6。上述方法能够有效地分离检测富马酸丙酚替诺福韦及其中之一的非对映异构体，但是其未能同时有效地分离检测其他的非对映异构体，以及存在的其他有关物质。因此，为了能够同时检测富马酸丙酚替诺福韦及其异构体以及其它有关物质，亟待提出一种新的分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提出了一种分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法，分离方法简便，能够同时分离检测富马酸丙酚替诺福韦的多个异构体及其他有关物质，结果准确，可用于富马酸丙酚替诺福韦生产过程的质量控制。本专利技术的分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法，包括：1）色谱柱：大赛璐键合型手性色谱柱；2）流动相：正己烷、异丙醇、甲醇、乙醇、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯和乙腈中的一种或几种的混合溶液；为实现较好的手性分离效果，可在流动相中添加合适的添加剂如二乙胺、乙二胺等；3）检测波长：260nm；4）柱温：27～45℃；5）流速：0.7mL/min～1.5mL/min；6）异构体混合储备溶液：分别取各异构体约5mg，置于10ml量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释至刻度作为异构体混合储备溶液；7）系统适用性溶液：取富马酸丙酚替诺福韦样品约30～70mg，精密称定，置100ml量瓶中，加入异构体混合储备溶液1ml，用无水乙醇溶解并稀释至刻度，作为系统适用性溶液。作为优选的实施方案，所述色谱柱为大赛璐CHIRALPAKIC柱，其粒径为5μm，内径为4.6mm，长度为250mm。作为优选的实施方案，所述流动为正己烷、乙醇和二乙胺的混合溶液，且体积比为正己烷：乙醇：二乙胺=800：200：1。作为优选的实施方案，所述流动相正己烷、异丙醇和甲醇的混合溶液，且体积比为正己烷：异丙醇：甲醇=85：7：8。本专利技术与现有技术相比较，本专利技术的分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法，分离方法简便，能够同时分离检测富马酸丙酚替诺福韦的多个异构体及其他有关物质，结果准确，可用于富马酸丙酚替诺福韦生产过程的质量控制。附图说明图1是
技术介绍
中的富马酸丙酚替诺福韦的化学结构式示意图。图2是
技术介绍
中的富马酸丙酚替诺福韦的异构体的化学结构式示意图。图3是
技术介绍
中的核苷酸膦酸酯类似物前药及其筛选和制备方法中的梯度洗脱程序示意图。图4是本专利技术的实施例1的样品混合溶液的色谱图。图5是本专利技术的实施例2的样品混合溶液的色谱图。具体实施方式实施例1：本专利技术的分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法，包括：1）色谱柱：大赛璐键合型手性色谱柱；2）流动相：正己烷、异丙醇、甲醇、乙醇、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯和乙腈中的一种或几种的混合溶液；为实现较好的手性分离效果，可在流动相中添加合适的添加剂如二乙胺、乙二胺等；3）检测波长：260nm；4）柱温：27～45℃；5）流速：0.7mL/min～1.5mL/min；6）异构体混合储备溶液：分别取各异构体约5mg，置于10ml量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释至刻度作为异构体混合储备溶液；7）系统适用性溶液：取富马酸丙酚替诺福韦样品约30～70mg，精密称定，置100ml量瓶中，加入异构体混合储备溶液1ml，用无水乙醇溶解并稀释至刻度，作为系统适用性溶液。实施例1：本专利技术的分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法，包括：1）色谱柱：大赛璐CHIRALPAKIC（4.6mm×250mm，5μm）；2）流动相：正己烷：乙醇：二乙胺=800：200：1；3）检测波长：260nm；4）柱温：40℃；5）流速：1.0mL/min；6）进样量：10µL；7）异构体混合储备溶液：分别取各异构体约5mg，置10ml量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释至刻度作为异构体混合储备溶液；8）系统适用性溶液：取富马酸丙酚替诺福韦样品约50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加入异构体混合储备溶液1ml，用无水乙醇溶解并稀释至刻度，作为系统适用性溶液。取系统适用性溶液10ul，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，结果如图4所示；该色谱条件项下，富马酸丙酚替诺福韦与其中5个异构体能分离，与其中一个异构体分离度达不到要求，其中异构体RRR与SSR出峰位置重合，未能达到有效分离。实施例2：本专利技术的分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法，包括：1）色谱柱：CHIRALPAKIC（4.6mm×250mm，5μm）；2）流动相：正己烷：异丙醇：甲醇=85：7：8；3）检测波长：260nm；4）柱温：30℃；5）流速：1.0mL/min；6）进样量：10µL；7）异构体混合储备溶液：分别取各异构体约5mg，置10ml量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释至刻度，作为异构体混合储备溶液；8）系统适用性溶液：取富马酸丙酚替诺福韦样品约50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加入异构体混合储备溶液1ml，用无水乙醇溶解并稀释至刻度，作为系统适用性溶液。取系统适用性溶液10ul，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，结果如图5所示；图5中30.187min的色谱峰为磷异构本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法，其特征在于，包括：/n1）色谱柱：大赛璐键合型手性色谱柱；/n2）流动相：正己烷、异丙醇、甲醇、乙醇、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯和乙腈中的一种或几种的混合溶液；/n3）检测波长：260nm；/n4）柱温：27～45℃；/n5）流速：0.7mL/min～1.5mL/min；/n6）样品溶液：取样品适量，精密称定，置量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释制成浓度为0.3mg/ml～0.7mg/ml的溶液。/n

【技术特征摘要】
1.一种分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法，其特征在于，包括：
1）色谱柱：大赛璐键合型手性色谱柱；
2）流动相：正己烷、异丙醇、甲醇、乙醇、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯和乙腈中的一种或几种的混合溶液；
3）检测波长：260nm；
4）柱温：27～45℃；
5）流速：0.7mL/min～1.5mL/min；
6）样品溶液：取样品适量，精密称定，置量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释制成浓度为0.3mg/ml～0.7mg/ml的溶液。


2.权利要求1述的分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法，其特征在于，所述色谱柱为大赛璐C...

【专利技术属性】
技术研发人员：葛国才，王辉，
申请(专利权)人：济南新科医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37