一种载脂蛋白B检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种载脂蛋白B检测试剂盒，涉及生物医药技术领域，包括第一试剂，第一试剂包括第一缓冲液以及R‑1试剂，第一缓冲液包括如下成分：2‑4g/L的三羟甲基氨基甲烷、0.8‑1.2g/L的Proclin150、0.8‑1.2g/L的吐温80、8‑10g/L的叠氮钠，所述R‑1试剂包括如下成分：53‑57g/L的聚乙二醇、0.8‑1.2ml/L的曲拉通‑100，本发明专利技术提供一种改进型的载脂蛋白B检测试剂盒，灵敏度更高、重复性更好、准确性更高、稳定性更好。

Apolipoprotein B test kit

【技术实现步骤摘要】
一种载脂蛋白B检测试剂盒
本专利技术涉及生物医药
，更具体地说，它涉及一种载脂蛋白B检测试剂盒。
技术介绍
载脂蛋白B是LDL颗粒中惟一的蛋白质成分。在正常血浆中存在两种APOB，即APOBl00和APOB48。APOBl00主要由肝脏合成，在VLDL的组装和分泌中起重要作用，APOBl00有以下四种主要功能：①合成、装配和分泌三酰甘油丰富的脂蛋白VLDL；②它可与脂质结合，是VLDL的结构蛋白；③与肝素及不同的糖蛋白结合，参与LDL与动脉粥样斑块的相互作用；④与LDL受体结合，调节LDL从血浆中的清除。载脂蛋白B是临床检验中常用的检测项目,被应用于冠心病、高血压、急性心肌梗死的诊断、治疗及监护，具有非常重要的临床意义。由于载脂蛋白B的含量较低，其测定方法需要较高的灵敏度和特异性。临床上主要有免疫透射比浊法、免疫散射比浊法和免疫印迹法的检测。目前，免疫透射比浊法是最为普遍通用的方法，但是免疫透射比浊法存在灵敏度，精密度、准确性、线性范围等方面的问题，在临床应用上存在着差异性，因此，存在待改进之处。
技术实现思路
针对现有技术中所存在的不足，本专利技术目的在于提出一种载脂蛋白B检测试剂盒，具体方案如下：一种载脂蛋白B检测试剂盒,包括第一试剂，所述第一试剂包括第一缓冲液以及R-1试剂，所述第一缓冲液包括如下成分：2-4g/L的三羟甲基氨基甲烷、0.8-1.2g/L的Proclin150、0.8-1.2g/L的吐温80、8-10g/L的叠氮钠，所述R-1试剂包括如下成分：53-57g/L的聚乙二醇、0.8-1.2ml/L的曲拉通-100。进一步的，所述三羟甲基氨基甲烷、Proclin150、吐温80、叠氮钠在所述第一试剂中的含量分别为：3g/L、1g/L、1g/L、9g/L，所述聚乙二醇、曲拉通-100在所述第一试剂中的含量分别为：55g/L、1ml/L。进一步的，还包括第二试剂，所述第二试剂包括第二缓冲液以及R-2试剂，所述第二缓冲液包括如下成分：2-4g/L的三羟甲基氨基甲烷、0.8-1.2g/L的Proclin150、0.8-1.2g/的吐温80、8-10g/L的叠氮钠、53-57g/L的聚乙二醇，所述R-2试剂包括如下成分：0.123-0.127L/L的抗APOB血清。进一步的，所述三羟甲基氨基甲烷、Proclin150、吐温80、叠氮钠、聚乙二醇在所述第二试剂中的含量分别为：3g/L、1g/L、1g/L、9g/L、55g/L，所述抗APOB血清在所述第二试剂中的含量为0.125L/L。进一步的，所述第一试剂的制作规程包括如下步骤：S1：称量所述第一缓冲液、R-1试剂中的对应成分，S2：于容器内加水0.8L，加入称量好的三羟甲基氨基甲烷，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的Proclin150，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，搅拌加入称量好的吐温80，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的叠氮钠，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，S3：对所述S2中的溶液调整PH值至7.5，补充去离子水至1L，S4：于容器内加第一缓冲液0.8L，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的聚乙二醇，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的曲拉通-100，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，S5：对所述S4的溶液调整PH值至7.5，补充第一缓冲液至1L。进一步的，在第一试剂的制作规程的所述S2中，搅拌时间为27-33min。进一步的，所述第二试剂的制作规程包括如下步骤：S1：称量所述第二缓冲液、R-2试剂中的对应成分，S2：于容器内加水0.8L，加入称量好的三羟甲基氨基甲烷，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的Proclin150，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，搅拌加入称量好的吐温80，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的叠氮钠，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的聚乙二醇，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，S3：对所述S2中的溶液调整PH值至7.5，补充去离子水定容至1L，S4：于容器内加入第一缓冲液0.25L，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的抗APOB血清，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入第二缓冲液0.5L，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入第一缓冲液0.125L，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，补充去离子水定容至1L。进一步的，在第二试剂的制作规程的所述S4中，对定容后的溶液用磁力搅拌器2-3档搅拌2h。与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：本专利技术提供一种改进型的载脂蛋白B检测试剂盒，灵敏度更高、重复性更好、准确性更高、稳定性更好，叠氮钠作为防腐剂，提高第一试剂、第二试剂的使用时间，使得载脂蛋白B检测试剂盒可以长时间使用，满足临床实际需要。具体实施方式下面结合实施例及对本专利技术作进一步的详细说明，但本专利技术的实施方式不仅限于此。制备例1、主要材料以及仪器第一试剂：三羟甲基氨基甲烷、Proclin150、吐温80、的叠氮钠，聚乙二醇、曲拉通-100。第二试剂：三羟甲基氨基甲烷、Proclin150、吐温80、的叠氮钠，聚乙二醇、抗APOB血清。仪器：AL104精密电子天平：灵敏度0.1mg，用于称量工序；TC30K型精密电子天平：灵敏度10mg,用于称量工序；T1000Y型电子天平：灵敏度10mg,用于称量工序；磁力搅拌器：99-1型，用于溶解工序。精密酸度计：FE20,用于PH工序。电子秤：灵敏度20g,用于定容工序。玻璃烧杯等玻璃器皿；定量加量器：1ml、100-1000ul、20-200ul；移液管：10ml、5ml。2、制备步骤2.1第一试剂的制作规程S1：使用AL104精密电子天平、TC30K型精密电子天平、T1000Y型电子天平、定量加量器或者移液管称量第一缓冲液的对应成分以及取用R-1试剂中的对应成分，3g的三羟甲基氨基甲烷、1g的Proclin150、1g的吐温80、9g的叠氮钠、55g的聚乙二醇、1ml的曲拉通-100。S2：于容器内加水0.8L，加入称量好的三羟甲基氨基甲烷，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的Proclin150，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，搅拌加入称量好的吐温80，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的叠氮钠，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，搅拌时间为27-33min。S3：对S2中的溶液调整PH值至7.5，补充去离子水至1L，S4：于容器内加第一缓冲液0.8L，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的聚乙二醇，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的曲拉通-100，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，S5：对S4的溶液调整PH值至7.5，补充第一缓冲液至1L。2.2第二试剂的制作规程...

【技术保护点】
1.一种载脂蛋白B检测试剂盒,其特征在于，包括第一试剂，所述第一试剂包括第一缓冲液以及R-1试剂，所述第一缓冲液包括如下成分：2-4g/L的三羟甲基氨基甲烷、0.8-1.2g/L的Proclin150、0.8-1.2g/L的吐温80、8-10g/L的叠氮钠，所述R-1试剂包括如下成分：53-57g/L的聚乙二醇、0.8-1.2ml/L的曲拉通-100。/n

【技术特征摘要】
1.一种载脂蛋白B检测试剂盒,其特征在于，包括第一试剂，所述第一试剂包括第一缓冲液以及R-1试剂，所述第一缓冲液包括如下成分：2-4g/L的三羟甲基氨基甲烷、0.8-1.2g/L的Proclin150、0.8-1.2g/L的吐温80、8-10g/L的叠氮钠，所述R-1试剂包括如下成分：53-57g/L的聚乙二醇、0.8-1.2ml/L的曲拉通-100。


2.根据权利要求1所述的载脂蛋白B检测试剂盒，其特征在于，所述三羟甲基氨基甲烷、Proclin150、吐温80、叠氮钠在所述第一试剂中的含量分别为：3g/L、1g/L、1g/L、9g/L，所述聚乙二醇、曲拉通-100在所述第一试剂中的含量分别为：55g/L、1ml/L。


3.根据权利要求1所述的载脂蛋白B检测试剂盒，其特征在于，还包括第二试剂，所述第二试剂包括第二缓冲液以及R-2试剂，所述第二缓冲液包括如下成分：2-4g/L的三羟甲基氨基甲烷、0.8-1.2g/L的Proclin150、0.8-1.2g/的吐温80、8-10g/L的叠氮钠、53-57g/L的聚乙二醇，所述R-2试剂包括如下成分：0.123-0.127L/L的抗APOB血清。


4.根据权利要求3所述的载脂蛋白B检测试剂盒，其特征在于，所述三羟甲基氨基甲烷、Proclin150、吐温80、叠氮钠、聚乙二醇在所述第二试剂中的含量分别为：3g/L、1g/L、1g/L、9g/L、55g/L，所述抗APOB血清在所述第二试剂中的含量为0.125L/L。


5.根据权利要求2所述的载脂蛋白B检测试剂盒，其特征在于，所述第一试剂的制作规程包括如下步骤：
S1：称量所述第一缓冲液、R-1试剂中的对应成分，
S2：于容器内加水0.8L，加入称量好的三羟甲基氨基甲烷，用磁力搅拌器2-3档搅拌至溶解，加入称量好的Proclin1...

【专利技术属性】
技术研发人员：高国华，
申请(专利权)人：上海高踪医疗器械科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31