一种利用脂肪染色剂标记甲状旁腺的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用脂肪染色剂标记甲状旁腺的方法，苏丹二溶液的配置：选择苏丹二注射液，根据比格犬重量，按照5mg/Kg、6mg/Kg、7mg/Kg的标准加入0.9%的生理盐水中配制成250ml苏丹二溶液，动物麻醉：术前将比格犬禁食12小时，在无菌实验环境中，将比格犬放置于密闭气体麻醉（异氟烷）装置中，待检查比格犬翻正反射消失，肌肉松弛、四肢无活动，无触碰反应时，取出比格犬置于开放式气体麻醉装置上，开始术中维持麻醉；术中麻醉采用吸入气体麻醉，本发明专利技术基于不同浓度的苏丹二注射，从而更够得出更好的注射浓度效果，待切除之后基于脂肪染色剂可以对制备而成的组织切片进行很好的识别处理，整体检验效果出色，为实际操作提供了验证基础。

A method of using fat stain to label parathyroid gland

【技术实现步骤摘要】
一种利用脂肪染色剂标记甲状旁腺的方法
本专利技术涉及检测领域，尤其是涉及一种利用脂肪染色剂标记甲状旁腺的方法。
技术介绍
人体有两对甲状旁腺，棕黄色，形似大豆，分别位于左右两叶甲状腺背面(或埋在其中)的中部和下部。主要功能为分泌甲状旁腺激素(简称PTH)，调节机体内钙、磷的代谢。甲状旁腺功能低下或彻底摘除(如甲状腺手术切除时不慎误摘)，则PTH分泌不足，使血钙渐渐下降，而血磷渐渐上升，导致低血钙性抽搐，甚至死亡，补给PTH和钙盐可使症状暂时缓解。而当甲状旁腺机能亢进，PTH分泌过多时，则使骨钙进入血液，并加强肾脏对钙的重吸收，同时激活维生素D3成为活性D3，促进小肠对钙的吸收，使血钙过高，并抑制肾脏对磷酸盐的重吸收，促进尿中磷的排出，使血磷过低，从而导致钙盐在一些组织中的异常沉积，使组织发生病理性钙化，并可能形成肾结石。由于甲状旁腺的不易发觉性容易在手术中损伤正常的甲状旁腺，因此在实际手术中需要更为精确的显示出甲状旁腺的实际位置。
技术实现思路
本专利技术为克服上述情况不足，旨在提供一种能解决上述问题的技术方案。一种利用脂肪染色剂标记甲状旁腺的方法，具体包括以下步骤：S1、苏丹二溶液的配置：选择苏丹二注射液，根据比格犬重量，按照5mg/Kg、6mg/Kg、7mg/Kg的标准加入0.9%的生理盐水中配制成250ml苏丹二溶液；S2、动物麻醉：术前将比格犬禁食12小时，在无菌实验环境中，将比格犬放置于密闭气体麻醉（异氟烷）装置中，待检查比格犬翻正反射消失，肌肉松弛、四肢无活动，无触碰反应时，取出比格犬置于开放式气体麻醉装置上，开始术中维持麻醉；术中麻醉采用吸入气体麻醉，吸入气体麻醉步骤包括：吸入气体异氟烷，选择小动物专用的吸入麻醉机，混合纯氧进行麻醉，通过氧气气流使异氟烷挥发，诱导麻醉使用2~3%的浓度，维持使用1.5~2%；麻醉时间为5~7min；S3、标记方法：a、先提取比格犬颈部毛发并进行常规消毒，颈部前侧正中切开皮肤，上至甲状软骨下缘，下至第五气管环，分离皮下组织，带状肌至气管前筋膜，切断胸骨甲状肌，暴露位于气管食沟、环状软骨下缘的甲状腺，并寻找甲状旁腺，并注意保护甲状旁腺上下的动静脉；b、静脉快速滴入苏丹二，计量为第一组5mg/Kg、第二组6mg/Kg、第三组7mg/Kg，且均在10分钟内注射完成；c、从注射苏丹二开始，通过数码相机对甲状腺以及甲状旁腺进行每间隔2分钟的拍摄，并记录甲状腺以及甲状旁腺的染色程度以及对应的时间节点；d、根据甲状旁腺的染色情况并对此进行切除；e、将切除的甲状旁腺组织，依次进行冰冻切片，厚8～15um；蒸馏水洗后，入70％的乙醇浸洗；置入苏丹黑B染液(70％乙醇配制苏丹黑B的饱和液)中染色10～35分钟；入50％乙醇分色；蒸馏水洗；苏木精复染，1％HCl分色；自来水冲洗；最后甘油明胶封片。本专利技术的有益效果：本专利技术基于不同浓度的苏丹二注射，从而更够得出更好的注射浓度效果，待切除之后基于脂肪染色剂可以对制备而成的组织切片进行很好的识别处理，整体检验效果出色，为实际操作提供了验证基础。本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1实验分组选用成年健康比格犬12只，雌雄各半，体重在10Kg-15Kg之间，并随机分为三组，并分别接受三种剂量（组1：接受5mg/Kg剂量的苏丹二溶液；组2：接受6mg/Kg剂量的苏丹二溶液；组3：接受7mg/Kg剂量的苏丹二溶液）的苏丹二注射液。实验方法S1、苏丹二溶液的配置选择苏丹二注射液，根据比格犬重量，按照5mg/Kg、6mg/Kg、7mg/Kg的标准加入0.9%的生理盐水中配制成250ml苏丹二溶液；S2、动物麻醉术前将比格犬禁食12小时，在无菌实验环境中，将比格犬放置于密闭气体麻醉（异氟烷）装置中，待检查比格犬翻正反射消失，肌肉松弛、四肢无活动，无触碰反应时，取出比格犬置于开放式气体麻醉装置上，开始术中维持麻醉；术中麻醉采用吸入气体麻醉，吸入气体麻醉步骤包括：吸入气体异氟烷，选择小动物专用的吸入麻醉机，混合纯氧进行麻醉，通过氧气气流使异氟烷挥发，诱导麻醉使用2~3%的浓度，维持使用1.5~2%；麻醉时间为5~7min；S3、标记方法a、先提取比格犬颈部毛发并进行常规消毒，颈部前侧正中切开皮肤，上至甲状软骨下缘，下至第五气管环，分离皮下组织，带状肌至气管前筋膜，切断胸骨甲状肌，暴露位于气管食沟、环状软骨下缘的甲状腺，并寻找甲状旁腺，并注意保护甲状旁腺上下的动静脉；b、静脉快速滴入苏丹二，计量为第一组5mg/Kg、第二组6mg/Kg、第三组7mg/Kg，且均在10分钟内注射完成；c、从注射苏丹二开始，通过数码相机对甲状腺以及甲状旁腺进行每间隔2分钟的拍摄，并记录甲状腺以及甲状旁腺的染色程度以及对应的时间节点；d、根据甲状旁腺的染色情况并对此进行切除；e、将切除的甲状旁腺组织，依次进行冰冻切片，厚8～15um；蒸馏水洗后，入70％的乙醇浸洗；置入苏丹黑B染液(70％乙醇配制苏丹黑B的饱和液)中染色10～35分钟；入50％乙醇分色；蒸馏水洗；苏木精复染，1％HCl分色；自来水冲洗；最后甘油明胶封片。对于本领域技术人员而言，显然本专利技术不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本专利技术的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本专利技术。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本专利技术的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本专利技术内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用脂肪染色剂标记甲状旁腺的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：/nS1、苏丹二溶液的配置：选择苏丹二注射液，根据比格犬重量，按照5mg/Kg、6mg/Kg、7mg/Kg的标准加入0.9%的生理盐水中配制成250ml苏丹二溶液；/nS2、动物麻醉：术前将比格犬禁食12小时，在无菌实验环境中，将比格犬放置于密闭气体麻醉（异氟烷）装置中，待检查比格犬翻正反射消失，肌肉松弛、四肢无活动，无触碰反应时，取出比格犬置于开放式气体麻醉装置上，开始术中维持麻醉；术中麻醉采用吸入气体麻醉，吸入气体麻醉步骤包括：吸入气体异氟烷，选择小动物专用的吸入麻醉机，混合纯氧进行麻醉，通过氧气气流使异氟烷挥发，诱导麻醉使用2~3%的浓度，维持使用1.5~2%；麻醉时间为5~7min；/nS3、标记方法：a 、先提取比格犬颈部毛发并进行常规消毒，颈部前侧正中切开皮肤，上至甲状软骨下缘，下至第五气管环，分离皮下组织，带状肌至气管前筋膜，切断胸骨甲状肌，暴露位于气管食沟、环状软骨下缘的甲状腺，并寻找甲状旁腺，并注意保护甲状旁腺上下的动静脉；/nb 、静脉快速滴入苏丹二，计量为第一组5mg/Kg、第二组6mg/Kg、第三组7mg/Kg，且均在10分钟内注射完成；/nc 、从注射苏丹二开始，通过数码相机对甲状腺以及甲状旁腺进行每间隔2分钟的拍摄，并记录甲状腺以及甲状旁腺的染色程度以及对应的时间节点；/nd 、根据甲状旁腺的染色情况并对此进行切除。/n...

【技术特征摘要】
1.一种利用脂肪染色剂标记甲状旁腺的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
S1、苏丹二溶液的配置：选择苏丹二注射液，根据比格犬重量，按照5mg/Kg、6mg/Kg、7mg/Kg的标准加入0.9%的生理盐水中配制成250ml苏丹二溶液；
S2、动物麻醉：术前将比格犬禁食12小时，在无菌实验环境中，将比格犬放置于密闭气体麻醉（异氟烷）装置中，待检查比格犬翻正反射消失，肌肉松弛、四肢无活动，无触碰反应时，取出比格犬置于开放式气体麻醉装置上，开始术中维持麻醉；术中麻醉采用吸入气体麻醉，吸入气体麻醉步骤包括：吸入气体异氟烷，选择小动物专用的吸入麻醉机，混合纯氧进行麻醉，通过氧气气流使异氟烷挥发，诱导麻醉使用2~3%的浓度，维持使用1.5~2%；麻醉时间为5~7min；
S3、标记方法：a、先提取比格犬颈部毛发并进行常规消毒，颈部前侧正中切开皮肤，上至甲状软骨下缘，下至第五气管环，分...

【专利技术属性】
技术研发人员：王国柱，
申请(专利权)人：王国柱，
类型：发明
国别省市：江苏;32