对微生物的数量进行计数的方法技术

本发明专利技术提供一种其中培养基中的微生物的菌落的可见性得到改善，且可简单且准确地执行微生物的数量的定量计数的方法。对微生物的数量进行计数的方法包括：向包含(a)聚合物化合物、(b)瓜尔胶及(c)营养成分的组合物中添加分析物并混合所得混合物的工序，所述聚合物化合物可形成不可流动的透明凝胶，而不需要通过加热来溶解且不依赖于冷却；培养包含在分析物中的微生物的工序；以及对微生物的菌落的数量进行计数的工序。

A method of counting the number of microorganisms

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】对微生物的数量进行计数的方法
本专利技术涉及一种对分析物中的微生物的数量进行简单计数的方法。
技术介绍
作为对微生物的数量进行计数的方法，倾注平板法(pourplatemethod)、琼脂扩散平板法等是已知的(非专利文献第1号)。用于在上述方法中培养微生物的琼脂培养基是通过将其中溶解有营养成分及选择性成分的培养基与琼脂一起凝固而制备的材料，且需要在对微生物进行培养及计数之前预制备。此外，在琼脂扩散平板法中，在将分析物施加到平板培养基上时，分析物被施加到所述培养基上，同时分析物被完全吸收到培养基中，且因此所述方法还存在需要时间来操作的问题。近年来，关于干燥简单培养设备以各种方式进行了开发，在干燥简单培养设备中无需预制备培养基从而以更简单及更高效的方式对微生物进行检测及计数。在这种培养设备中，培养基是通过在使用时向其中添加的液体分析物的水分形成，且可直接提供用于培养。迄今为止，本专利技术人还提出了一种通过使用胶凝剂(例如聚丙烯酸钠)的培养基进行的方法(专利申请JP2016-189545、专利申请JP2016-229753)。更具体来说，所述方法包括其中通过将作为构成培养基的溶剂的流体分析物直接添加到胶凝剂中，以通过在所述培养基中对分析物中的微生物进行培养来形成菌落，并使微生物可见，从而简化操作的方法。根据上述方法，还对其中所存在的微生物的数量显著少的分析物进行简单及准确地计数，或者使用尺寸减小的培养容器来改善可操作性及简单性。引文列表非专利文献非专利文献(NonPatentLiterature，NPL)1：细菌学实践手册(ManualtoPracticeBacteriology)，第2版，p59，4.3细菌计数及培养方法，由东京大学医学科学研究所(TheInstituteofMedicalScience,TheUniversityofTokyo)编辑，丸善有限公司(MaruzenCo.,Ltd)。
技术实现思路
技术问题然而，在上述方法中，在通过使胶凝剂(例如聚丙烯酸钠)利用水分溶胀而形成的凝胶内部产生游离水，且微生物的菌落完全扩散到凝胶中，并且因此在若干情况下定量计数变得困难。在这种情况下，本专利技术的目的是提供一种其中培养基中的微生物的菌落的可见性得到改善，且可简单且准确地执行微生物的数量的定量计数的方法。问题的解决方案本专利技术人已努力地继续进行研究，以解决上述问题。结果，本专利技术人发现，如果瓜尔胶同时用作包含胶凝剂(例如聚丙烯酸钠)的培养基的成分，则培养基中的微生物的菌落的可见性得到改善，且可确保对微生物的数量进行计数的定量性，且完成了本专利技术。更具体来说，本专利技术包括以下阐述的各项。项1.一种用于制备对微生物的数量进行计数的培养基的组合物的用途，其中所述组合物包含(a)聚合物化合物、(b)瓜尔胶及(c)营养成分，所述聚合物化合物能够形成不可流动的透明凝胶，而无需通过加热来溶解且不依赖于冷却。项2.根据项1所述的用途，其中(a)所述聚合物化合物能够以其自身重量的10倍或大于10倍的量水合。项3.根据项1或2所述的用途，其中所述聚合物化合物具有丙烯酸作为单体单元。项4.根据项3所述的用途，其中所述聚合物化合物是聚丙烯酸和/或其盐。项5.根据项1到4中任一项所述的用途，其中所述组合物还包含(d)着色试剂。项6.一种对微生物的数量进行计数的培养设备的用途，其中所述培养设备包括(a)聚合物化合物、(b)瓜尔胶、(c)营养成分及培养容器，所述聚合物化合物能够形成不可流动的透明凝胶，而无需通过加热来溶解且不依赖于冷却。项7.一种用于制备对微生物的数量进行计数的培养基的组合物，包含(a)聚合物化合物、(b)瓜尔胶及(c)营养成分，所述聚合物化合物能够形成不可流动的透明凝胶，而无需通过加热来溶解且不依赖于冷却。项8.根据项7所述的组合物，其中(a)所述聚合物化合物能够以其自身重量的10倍或大于10倍的量水合。项9.根据项7或8所述的组合物，其中所述聚合物化合物具有丙烯酸作为单体单元。项10.根据项9所述的组合物，其中所述聚合物化合物是聚丙烯酸和/或其盐。项11.根据项7到10中任一项所述的组合物，还包含(d)着色试剂。项12.一种对微生物的数量进行计数的培养设备，包括根据项7到11中任一项所述的组合物以及培养容器。项13.根据项12所述的培养设备，其中所述培养容器包括上部构件及具有凹槽的下部构件。项14.根据项13所述的培养设备，其中所述上部构件具有突起，所述突起具有能够通过所述组合物相互配合到所述下部构件的所述凹槽的形状。项15.根据项14所述的培养设备，其中所述组合物被涂布到所述上部构件的所述突起和/或所述下部构件的所述凹槽的至少一部分上。项16.根据项13到15中任一项所述的培养设备，其中所述上部构件和/或所述下部构件是透明的。项17.一种对微生物的数量进行计数的方法，包括：向根据项7到11中任一项所述的组合物中添加分析物的工序；培养包含在分析物中的微生物的工序；以及对微生物的菌落的数量进行计数的工序。项18.根据项17所述的方法，其中所述分析物中的所述微生物的所述数量为0.1CFU/mL或小于0.1CFU/mL。项19.根据项17或18所述的方法，其中所述分析物的重量是所述组合物中的所述聚合物化合物的重量的10倍到10,000倍。本专利技术的有利效果根据本专利技术，分析物中的微生物的数量可进行简单及准确地计数。特别是，即使微生物的数量在大体积分析物中是以少量存在，也可实现定量检测。此外，如果应用使用特定培养容器的方面，则通过使用小体积的分析物，微生物的数量仍可以高可操作性及准确性进行计数。附图说明图1是示出根据本专利技术的培养设备的一个方面的图，其中(A)示出在上部构件及下部构件不堆叠的状态下的培养设备的正交图，(B)示出沿着(A)中的线A-A'截取的剖视图的一个实例，(B')示出沿着(A)中的线A-A'截取的剖视图的另一个实例，(C)示出沿着(A)中的线B-B'截取的剖视图的一个实例，且(C')示出沿着(A)中的线B-B'截取的剖视图的另一个实例。图2是示出根据本专利技术的培养容器的一个方面的图，其中(A)示出在上部构件及下部构件不配合的状态下的培养容器的正交图，(B)示出沿着(A)中的线A-A'截取的剖视图的一个实例，(B')示出沿着(A)中的线A-A'截取的剖视图的另一个实例，(C)示出沿着(A)中的线B-B'截取的剖视图的一个实例，且(C')示出沿着(A)中的线B-B'截取的剖视图的另一个实例。图3是示出根据本专利技术的培养容器的一个方面的图，其中(A)示出在上部构件配合到下部构件的状态下的培养容器的正交图，(B)示出沿着(A)中的线C-C'截取的剖视图的一个实例，且(C)示出沿着(A)中的线C-C'截取的剖视图的例另一个实例。图4是示出根据本专利技术的培养容器的用途方面实例的倾本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于制备对微生物的数量进行计数的培养基的组合物的用途，其中所述组合物包含(a)聚合物化合物、(b)瓜尔胶及(c)营养成分，所述(a)聚合物化合物能够形成不可流动的透明凝胶，而无需通过加热来溶解且不依赖于冷却。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170929 JP 2017-1905221.一种用于制备对微生物的数量进行计数的培养基的组合物的用途，其中所述组合物包含(a)聚合物化合物、(b)瓜尔胶及(c)营养成分，所述(a)聚合物化合物能够形成不可流动的透明凝胶，而无需通过加热来溶解且不依赖于冷却。


2.根据权利要求1所述的用途，其中所述(a)聚合物化合物能够以其自身重量的10倍或大于10倍的量水合。


3.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述聚合物化合物具有丙烯酸作为单体单元。


4.根据权利要求3所述的用途，其中所述聚合物化合物是聚丙烯酸和/或其盐。


5.根据权利要求1到4中任一项所述的用途，其中所述组合物还包含(d)着色试剂。


6.一种对微生物的数量进行计数的培养设备的用途，其中所述培养设备包括(a)聚合物化合物、(b)瓜尔胶、(c)营养成分及培养容器，所述(a)聚合物化合物能够形成不可流动的透明凝胶，而无需通过加热来溶解且不依赖于冷却。


7.一种用于制备对微生物的数量进行计数的培养基的组合物，包含(a)聚合物化合物、(b)瓜尔胶及(c)营养成分，所述(a)聚合物化合物能够形成不可流动的透明凝胶，而无需通过加热来溶解且不依赖于冷却。


8.根据权利要求7所述的组合物，其中所述(a)聚合物化合物能够以其自身重量的10倍或大于10倍的量水合。


9.根据权利要求7或8所述的组合物，其中所述聚合物化合物具...

【专利技术属性】
技术研发人员：寺村哉，藤原翠，
申请(专利权)人：捷恩智株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP