一种禽类粪便污染荧光定量PCR检测探针及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种禽类粪便污染荧光定量PCR检测探针及检测方法，属于生物检测技术领域。本发明专利技术提供了一种禽类粪便污染荧光定量PCR检测探针，该探针核苷酸序列为5’‑AGATGGTTCTGCTATCGCTTT‑3’；SEQ ID NO.1。与现有技术相比，本发明专利技术取得的有益效果为：解决了国外设计的禽类粪便污染物标记物无法在我国进行使用的现状，提供了一种适宜中国使用、灵敏度高、特异性好的禽类粪便污染荧光定量PCR检测探针。本发明专利技术设计的探针灵敏度达到了86.55％，特异性达到了93.48％。

A fluorescent quantitative PCR detection probe and detection method for poultry feces pollution

【技术实现步骤摘要】
一种禽类粪便污染荧光定量PCR检测探针及检测方法
本专利技术涉及生物检测
，更具体的说是涉及一种禽类粪便污染荧光定量PCR检测探针及检测方法。
技术介绍
随着禽类养殖业的繁荣发展，禽类粪便的产生日益增加。部分粪便因雨水冲刷或人为管理不善，将会流入地表水中，对水体环境造成一定的污染。粪便中含有大量对人体有害的病原微生物，能够引起腹泻和急性肠胃炎等疾病。许多粪源病原体可以在体外环境水体中大量生长繁殖，从而导致病原微生物的水源性传播。如何快速鉴别水体中是否存在禽类粪便污染，对水体管理和保护具有重要的指导意义。微生物溯源是根据源指示微生物与宿主之间所具有的特异性关系来定位污染源的一类溯源技术。微生物溯源技术以其客观性、低成本、检测速度快和结果准确等受到普遍关注。但是目前该项技术的应用存在地区差异性，这主要是两方面原因造成的：(1)宿主方面，由于不同地区的畜禽饲养方式往往存在一定差异，微生物在适应不同地区的宿主肠道环境的过程中可能产生遗传多样性，进而使得微生物溯源指示物的表型或基因型发生变异；(2)环境因素方面，由于指示物在不同环境条件下的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种禽类粪便污染荧光定量PCR检测探针，其特征在于，所述探针命名为AV4143P1，核苷酸序列为5’-AGATGGTTCTGCTATCGCTTT-3’；SEQ ID NO.1。/n

【技术特征摘要】
1.一种禽类粪便污染荧光定量PCR检测探针，其特征在于，所述探针命名为AV4143P1，核苷酸序列为5’-AGATGGTTCTGCTATCGCTTT-3’；SEQIDNO.1。


2.如权利要求1所述的一种禽类粪便污染荧光定量PCR检测探针，其特征在于，所述5’端使用6FAM作为荧光基团，所述3’端使用BHQ1作为淬灭基团。


3.一种利用权利要求1所述探针检测禽类粪便污染的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)提取样本DNA；
(2)采用荧光定量PCR方法进行检测；
反应体系如下：
10μL2XTaqManEnvironmentalMasterMix2...

【专利技术属性】
技术研发人员：余志晟，梁红霞，张洪勋，刘如铟，
申请(专利权)人：中国科学院大学，
类型：发明
国别省市：北京;11