一种筛选抗干旱烟草品种突变体的方法技术

本发明专利技术涉及一种筛选抗干旱烟草品种突变体的方法，通过EMS诱变方法收获M1代种子,取1000粒M1代种子，待烟草种子发芽至子叶完全展开时，采用20％的PEG6000溶液处理烟草幼苗，根据植株萎蔫状态，选出长势较旺的个体；将幼苗移栽进大田中继续进行验证,在大田培养中，绝大多数突变体的长势明显高于对照。本发明专利技术以干旱胁迫下幼苗的长势为筛选指标，从中初筛选出抗干旱突变体材料；并通过田间试验，对其长势和感官指标进行评估，选育出优质抗干旱突变材料，为浓香型优良品种的选育奠定基础。

A method of screening mutants of drought resistant Tobacco Varieties

【技术实现步骤摘要】
一种筛选抗干旱烟草品种突变体的方法
本专利技术属于烟草培育
，特别是指一种筛选抗干旱烟草品种突变体的方法。
技术介绍
植株在生长过程中，土壤中的水份是影响到植株生长状态的关键因素，地区不同，降水量不同，而不同降水量对烟草的特性影响非常显著，而对于中国的烟草产区，特别是中原地区，降水量相对较少，与降水量充沛的东北或南地区均有不同影响。对于土壤干燥地区，如何提高烟草的耐焊性能，是本领域技术人员的研究课题。随着现代分子生物学的发展和转基因技术的日趋完善，人们试图鉴定、克隆与耐低钾有关的基因，研究其表达、调控机制，再通过转导技术将其导入目标品种，以克服种间不亲和，缩短育种年限。但迄今为止，利用基因工程培育新品种仍存在安全性争议：外源基因的整合表达对于烟草之类的经济作物的经济性状有无影响？来源于细菌、昆虫的毒性基因有无人体的危害？既要理论上是安全的，也要克服大众的心理障碍，更主要的对外贸易、进出口的影响。由此看来，通过基因工程的途径在短期内还难以根本解决问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种筛选抗干旱烟草突变体的方法，以解决传统杂交育种由于性状连锁及培育时间长的问题，同时也能够解决转基因所存在的安全性不能确定，消费者存在心理障碍等问题。本专利技术是通过以下技术实现的：一种筛选抗干旱烟草品种突变体的方法，包括以下步骤：S01、创制烟草突变一代群体：通过EMS诱变方法创建M1代种子；S02、抗干旱突变体的室内筛选：通过质量百分比为20％的PEG6000溶液处理烟草幼苗，经第一特性检测，选择符合第一设定标准的M1代植株为初筛突变株系；S03、将初筛突变株系在大田条件下种植，直接进入烟草新品种的田间选育程序；S04、将田间选育植株进行第二特定性检测，筛选出符合第二设定标准的田间选育植株为突变株系。一种筛选抗干旱烟草品种突变体的方法，包括以下步骤：S1、创制烟草突变一代群体：通过EMS诱变方法创建M1代植株,并收获相应的M2代种子；S2、抗干旱突变体的室内筛选：按正常育种方法培养M2代种子，待M2代种子发芽至子叶完全展开时用质量百分比为20％的PEG6000溶液处理烟草幼苗，通过对M2代植株的长势进行第一特定性检测，选择符合第一设定标准的植株为初筛突变株系；S3、将初筛突变株系移栽至大田中进行培育，直接进入烟草新品种的田间选育程序；S4、将田间选育植株进行第二特定性检测，筛选出符合第二设定标准的田间选育植株为突变株系。所述EMS诱变方法为：利用设定质量百分比浓度的EMS处理待处理种子第一设定时间，并使得处理后种子的致死率为50％左右；利用设定质量百分比浓度的PEG6000处理烟草幼苗，并使得处理后幼苗的萎蔫率为50％左右。所述EMS的质量百分比浓度为0.8％，第一设定时间为8小时。所述PEG6000的质量百分比浓度为20％。所述第一特定性检测的方法包括以下步骤：S10、烟草抗干旱突变体时期筛选的确定抗干旱突变体的筛选条件：突变体的筛选时期和生长环境中的干旱胁迫，烟草种子体积小、易于消毒且发芽时间短，因此选择烟草幼苗进行突变体筛选；S20、烟草抗干旱突变体筛选指标的确定干旱胁迫环境下烟草幼苗的生长状态作为筛选指标，在筛选条件下，突变体具有忍受抗干旱的能力可以正常生长，而非突变体则生长受到抑制。所述第二特定性检测包括但不限于大田农艺性状检测、烤后叶片香气物质测定及感官质量评价。所述感官质量评价的指标包括香气质、香气量、浓度、柔细度、余味、杂气、刺激性和劲头；所述感官质量评价总分计算公式为：T＝(A+B)×2.0+(C+D)×1.5+E+F+G+H，其中，T为感官质量评价总分，A为香气质得分，B为香气量得分，C为浓度得分，D为柔细度得分，E为余味得分，F为杂气得分，G为刺激性得分，H为劲头得分。本专利技术的有益效果是：本技术方案的筛选方法，通过EMS诱变方法创建M1代种子，待烟草种子发芽至子叶完全展开时，采用20％的PEG6000溶液处理烟草幼苗，根据植株萎蔫状态，选出长势较旺的个体；将幼苗移栽进大田中继续进行验证,在大田培养中，绝大多数突变体的长势明显高于对照。本技术以干旱胁迫下幼苗的长势为筛选指标，从中初筛选出抗干旱突变体材料；并通过田间试验，对其长势和感官指标进行评估，选育出优质抗干旱突变材料，为浓香型优良品种的选育奠定基础。附图说明图1为本专利技术筛选抗干旱烟草品种突变体的流程图。具体实施方式以下通过实施例来详细说明本专利技术的技术方案，以下的实施例仅是示例性的，仅能用来解释和说明本专利技术的技术方案，而不能解释为是对本专利技术技术方案的限制。本申请的各实施例是以正常中烟100品种为基础进行的培育，因为篇幅的原因，不能对其它品种进行一一说明，但并不是说本申请的技术方案仅适用于中烟100品种的选育，为了实际的需要，可以依据本技术方案对其它烤烟品种进行选育。如图1所示，选择长势良好的中烟100为诱变对像，使用质量百分比浓度为0.8％的EMS处理其种子8小时，使得处理后的种子的致死率为50％左右，获得M1代种子，选择500粒M1代种子培养，待种子发芽至子叶完全展开时用质量百分比为20％的PEG6000溶液处理烟草幼苗，经第一特性检测，选择符合第一设定标准的M1代植株为初筛突变株系，本实施例中，将处理后长势最好的200株烟草幼苗作为初筛突变株系进行驯化移栽，在大田培养中，在成熟期对烟株进行第二特定性检测，从长势最好的20个初筛突变株系中，取各植株中部叶片进行第二特定性检测，从诱变体后代中获得香气含量高和感官质量好的初筛突变株系2份为突变株系，将两个突变株系的第2代种子进行育苗(无分离现象)，并进行大田栽培，大田栽培植株即为EMS诱变后代。第一特定性检测的方法包括以下步骤：S10、烟草抗干旱突变体时期筛选的确定抗干旱突变体的筛选条件：突变体的筛选时期和生长环境中的干旱胁迫，对烟草而言，烟草种子具有体积小、易于消毒、发芽时间短等特点，因此选择烟草幼苗进行突变体筛选比较合理。S2烟草抗干旱突变体筛选指标的确定本体系选取干旱胁迫环境下烟草幼苗的生长状态作为筛选指标，在筛选条件下，突变体具有忍受抗干旱的能力可以正常生长，而非突变体则生长受到抑制。第二特性检测为：本申请的实施例中，根据M1代幼苗健壮程度，筛选出200棵突变后代，分别编号为1、2、3……200，移栽进大田，试验在河南省洛阳市烟草公司烟叶科技园(洛宁县小界乡王村)进行。大田管理依据优质烟叶栽培技术规范进行。各处理施肥水平根据当地烟草生产技术方案要求进行，主要包括：烟草专用复合肥(N:P2O5:K2O＝5:6:9)300kg/hm2，重钙225kg/hm2，饼肥375kg/hm-2，硝酸钾75kg/hm2。在成熟期观察烟株农艺性状，其中长势较好本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种筛选抗干旱烟草品种突变体的方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS01、创制烟草突变一代群体：/n通过EMS诱变方法创建M1代种子；/nS02、抗干旱突变体的室内筛选：/n通过质量百分比为20％的PEG6000溶液处理烟草幼苗，经第一特性检测，选择符合第一设定标准的M1代植株为初筛突变株系；/nS03、将初筛突变株系在大田条件下种植，直接进入烟草新品种的田间选育程序；/nS04、将田间选育植株进行第二特定性检测，筛选出符合第二设定标准的田间选育植株为突变株系。/n

【技术特征摘要】
1.一种筛选抗干旱烟草品种突变体的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S01、创制烟草突变一代群体：
通过EMS诱变方法创建M1代种子；
S02、抗干旱突变体的室内筛选：
通过质量百分比为20％的PEG6000溶液处理烟草幼苗，经第一特性检测，选择符合第一设定标准的M1代植株为初筛突变株系；
S03、将初筛突变株系在大田条件下种植，直接进入烟草新品种的田间选育程序；
S04、将田间选育植株进行第二特定性检测，筛选出符合第二设定标准的田间选育植株为突变株系。


2.一种筛选抗干旱烟草品种突变体的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、创制烟草突变一代群体：
通过EMS诱变方法创建M1代植株,并收获相应的M2代种子；
S2、抗干旱突变体的室内筛选：
按正常育种方法培养M2代种子，待M2代种子发芽至子叶完全展开时用质量百分比为20％的PEG6000溶液处理烟草幼苗，通过对M2代植株的长势进行第一特定性检测，选择符合第一设定标准的植株为初筛突变株系；
S3、将初筛突变株系移栽至大田中进行培育，直接进入烟草新品种的田间选育程序；
S4、将田间选育植株进行第二特定性检测，筛选出符合第二设定标准的田间选育植株为突变株系。


3.根据权利要求1或2所述的筛选抗干旱烟草品种突变体的方法，其特征在于，所述EMS诱变方法为：利用设定质量百分比浓度的EMS处理待处理种子第一设定时间，并使得处理后种子的致死率为50％左右；
利用设定质量百分比浓度的PEG6000处理烟草幼苗，并使得处理后幼苗的萎蔫率为...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨欣玲，姚倩，张俊岭，杨永锋，孙九喆，王宝林，马波波，
申请(专利权)人：河南中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：河南;41