检测PAH基因突变的引物、试剂盒和方法技术

本发明专利技术公开了用于检测苯丙酮尿症相关基因PAH基因的热点突变的引物，包括扩增PAH基因第6和第7外显子的引物；采用Sanger测序技术，可用于快速检测苯丙酮尿症患者体内PAH基因第6和第7外显子的突变情况。利用本发明专利技术完成的检测结果准确，对苯丙酮尿症患者的快速诊断有重要的参考意义。

Primers, kits and methods for detection of PAH gene mutations

【技术实现步骤摘要】
检测PAH基因突变的引物、试剂盒和方法
本专利技术属于生命科学和生物
，特别涉及检测PAH基因的第6和7外显子突变的引物、方法和试剂盒。
技术介绍
苯丙酮尿症(Phenylketonuria'PKU)是由于肝脏苯丙氨酸羟化酶(Phenylalaninehydroxylase，PAH)缺乏或活性减低而导致苯丙氨酸代谢障碍的一种常染色体隐性遗传性疾病。目前世界范围内已经报道的突变种类有564种，我国国内报道的突变种类也有100余种。中国人群中PKU的发病率为1/11000。我省从1998年至今，筛查新生儿共计1606213人，筛查确诊PKU儿童共63人，发病比率为1/24700。患儿出生时一般正常。通常在3-6个月时出现症状。1岁左右症状明显。早期出现呕吐.易激惹，生长迟缓等现象。未经治疗者在4-9个月开始有明显智力发育迟缓，约60％属于重度低下(IQ低于50)，早期治疗的PKU儿童其lQ值可在正常范围，因此，PKU的早发现、早诊断和早治疗对疾病的预后有着十分密切的关系。PKU的致病基因PAH由编码区的13个外显子和非编码区的12个内本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测PAH基因突变的引物，其特征在于，PAH基因热点突变位点位于6,7外显子，所述引物包括：扩增PAH的第6和7外显子的扩增引物PAH-6F、PAH-6R、PAH-7F、PAH-7R和测序引物M13F、M13R，其碱基序列为：/nPAH-6F:TGTAAAACGACGGCCAGTCCCCGACTCCCTCTGCTAA/nPAH-6R:AACAGCTATGACCATGGCCTCAATCCTCCCCCAA/nPAH-7F:TGTAAAACGACGGCCAGTCTATGTCCCTGGGCAGTTATG/nPAH-7R:AACAGCTATGACCATGGCAGCAGGAAAAGATGGC/nM13...

【技术特征摘要】
1.检测PAH基因突变的引物，其特征在于，PAH基因热点突变位点位于6,7外显子，所述引物包括：扩增PAH的第6和7外显子的扩增引物PAH-6F、PAH-6R、PAH-7F、PAH-7R和测序引物M13F、M13R，其碱基序列为：
PAH-6F:TGTAAAACGACGGCCAGTCCCCGACTCCCTCTGCTAA
PAH-6R:AACAGCTATGACCATGGCCTCAATCCTCCCCCAA
PAH-7F:TGTAAAACGACGGCCAGTCTATGTCCCTGGGCAGTTATG
PAH-7R:AACAGCTATGACCATGGCAGCAGGAAAAGATGGC
M13F：TGTAAAACGACGGCCAGT
M13R：AACAGCTATGACCATG。


2.检测PAH的第6和7外显子突变的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)抽提外周血中的基因组DNA；
(2)利用扩增引物PAH-6F、PAH-6R、PAH-7F、PAH-7R对步骤(1)中提取的DNA进行扩增，获得扩增产物；
PAH-6F:TGTAAAACGACGGCCAGTCCCCGACTCCCTCTGCTAA
PAH-6R:AACAGCTATGACCATGGCCTCAATCCTCCCCCAA
PAH-7F:TGTAAAACGACGGCCAGTCTATGTCCCTGGGCAGTTATG
PAH-7R:AACAGCTATGACCATGGCAGCAGGAAAAGATGGC；
(3)利用测序引物M13F、M13R对步骤(2)中的扩增产物进行测序；
M13F：TGTAAAACGACGGCCAGT
M13R：A...

【专利技术属性】
技术研发人员：林筱剑，
申请(专利权)人：北京艾迪康医学检验实验室有限公司，武汉艾迪康医学检验所有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11