一种纯化利福平的方法技术

本发明专利技术公开一种纯化利福平的方法，采用先将待纯化的利福平通过水解成3‑甲酰基利福霉素SV，再与亚硫酸氢盐形成利福霉素的α‑羟基磺酸钠结构，除去杂质，再调碱转化为3‑甲酰基利福霉素SV，与1‑氨基‑4‑甲基哌嗪缩合得到利福平粗品，然后精制得到利福平纯品。该方法所得利福平产品未知单个杂质均小于0.1%。

A method for purification of rifampin

【技术实现步骤摘要】
一种纯化利福平的方法
本专利技术属于药物制造领域，具有涉及一种纯化利福平的方法。
技术介绍
利福平，CAS号：13292-46-1，结构式如下式I所示，是利福霉素家族的一种广谱抗生素药物，对结核杆菌有较强抗菌作用，对革兰氏阳性或阴性细菌、病毒等也有疗效。为红色或暗红色的结晶状粉末，不溶于水。1959年利福平在意大利实验室首次被合成。1968年在意大利由赛诺菲公司首次上市销售，商品名RIFADIN，上市剂型包括胶囊、片剂和糖浆。利福平的仿制药品虽然在国内已经上市多年，但是由于之前的相关规定并未要求将仿制药与原研药进行比较，使得仿制药质量和疗效水平不一。随着药品相关法规的变化，要求所有仿制药品达到与原研一致的质量和疗效将是必然趋势，这为药品的有效性和质量带来保证的同时，也给国内仿制药企业带来巨大的挑战。就杂质而言，仿制药并不是与原研相同即可，而是要求未知杂质必须小于0.1％，大于0.1％的杂质要求做杂质研究，比原研更为严苛。据研究，利福平原研产品的纯度大约为96％，其中包括多个大于0.1％的杂质。研究人员根据公开的方法难以获得不含有0.1％以上单杂的产品。
技术实现思路
针对现在技术存在的上述问题，本专利技术的目的在于提供一种新颖的制备不含有0.1％以上单杂的利福平产品的方法。本专利技术的上述目的是通过以下技术方案实现的：一种纯化利福平的方法，包括将利福平原料制备成式III的化合物后纯化，再由纯化的式III化合物制备利福平，在本专利技术的一些实施例中，上述纯化利福平的方法，还包括通过式II的化合物制备式III的化合物，在本专利技术的一些实施例中，上述纯化利福平的方法，还包括将式III的化合物与无机碱反应生成式II的化合物，再由式II的化合物与1-氨基-4甲基哌嗪反应生成式I的利福平，所述无机碱选自碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸钠、碳酸钾中的一种或几种。在本专利技术的一些实施例中，上述纯化利福平的方法，包括步骤：(1)将利福平原料在盐酸溶液中反应制得式II的化合物；(2)用式II的化合物与亚硫酸氢盐反应，制得式III的化合物；(3)将式III化合物水溶液调pH至中性，纯化，得到化合物II；(4)将式II化合物与1-氨基-4甲基哌嗪反应生成式I的利福平；(5)将式I的利福平重结晶得到纯化的利福平；在本专利技术的一些实施例中，步骤1是将待纯化的利福平加入5-10倍质量体积比的水中，再加入1-6当量的盐酸，加热至45-55℃反应后，冷却至室温，并用5-10倍量乙酸乙酯提取，分离并浓缩有机层得到化合物Ⅱ。在本专利技术的一些实施例中，步骤2所述的亚硫酸氢盐选自亚硫酸氢钠、亚硫酸氢钾或者它们的组合。在本专利技术的一些实施例中，步骤2是将化合物Ⅱ溶于5-8倍质量体积比的有机溶剂中，在15-25℃下加入1.2-2当量的亚硫酸氢盐，搅拌反应2-8h，停止反应，加入水，萃取，分出水层，得到化合物Ⅲ的水溶液。在本专利技术的一些实施例中，步骤3是向化合物Ⅲ的水溶液中加入选自碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸钠、碳酸钾中一种或多种、或者其水溶液，调pH至中性，再用5-8倍量的乙酸乙酯提取，干燥乙酸乙酯层，减压浓缩得到纯化后的化合物Ⅱ。在本专利技术的一些实施例中，步骤4是将纯化后的化合物Ⅱ溶于8-10倍质量体积比的乙腈中，加入2-3当量的1-氨基-4甲基哌嗪，氮气保护下，在20-30℃搅拌反应2-8h，加入乙酸乙酯萃取，并用10％VC水溶液洗涤1-3次，有机层干燥、过滤，减压浓缩，得到利福平粗品。在本专利技术的一些实施例中，步骤5是将利福平粗品溶加入5-10倍质量体积比的正丁醇中，并加入0.4-0.7倍质量体积比的水，搅拌升温至70-80℃，溶清后，缓慢降温至0-5℃，析晶，过滤，得到利福平纯品。本专利技术的有益效果在于：所得利福平产品单个杂质均小于0.1％，对已知杂质醌式利福平、N-氧化利福平、3-甲酰利福霉素SV和未知杂质都有很好的去除效果，而且收率较高。附图说明图1是原料利福平经重结晶一次后的HPLC图；图2是已知杂质醌式利福平的HPLC图，保留时间9.295min；图3是已知杂质N-氧化利福平的HPLC图，保留时间18.294min；图4是已知杂质3-甲酰利福霉素SV的HPLC图，出峰保留时间37.493min；图5是原研利福平产品的HPLC图；图6是本专利技术方法实施例9纯化后得到的利福平的HPLC图；图7是本专利技术方法实施例10纯化后得到的利福平的HPLC图。具体实施方式以下将通过实施例对本专利技术的内容进行详细描述。实施例中未注明具体条件的，按照常规条件的实验方法进行。所举实施例是为了更好地对本专利技术的内容进行说明，但并不能理解为本专利技术的内容仅限于所举实例。本领域常规技术人员根据上述
技术实现思路
对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本专利技术的保护范围。本专利技术实施例采用的HPLC测定条件为：辛基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-0.075mol/L磷酸二氢钾溶液-1.0mol/L枸橼酸溶液(30:30:36:4)为流动相；检测波长254nm。原料利福平购自沈阳抗生素厂，纯度为95.2％，经正丁醇/水(10:1)重结晶后纯度为98.9％，HPLC如图1所示。通过与已知杂质的HPLC(图2-4)对比发现，重结晶后的利福平有三个单杂超过0.1％，除了Rt＝9.732min、Rt＝18.247min的已知杂质醌式利福平和N-氧化利福平外，Rt＝6.944min处还有一个未知单杂。经过多次重结晶，该单杂仍然无法去除。参比制剂为原研赛诺菲的利福平产品，批号：3160927；其HPLC图如图5所示，含有6个超过0.1％的单杂。3-甲酰基利福霉素SV的制备实施例1将待纯化的利福平100g加入1000mL水，加入50mL盐酸(35％-37％，g:mL)，加热至50℃反应12h，冷至25℃，用1000mL乙酸乙酯提取，有机层用水洗，饱和碳酸氢钠水溶液洗，氯化钠水溶液洗，分出有机层，有机层用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到81.93g化合物Ⅱ(3-甲酰基利福霉素SV)。收率92.9％。实施例2将待纯化的利福平100g加入1200mL水，加入50mL盐酸(35％-37％，g:mL)，加热至55℃反应8h，冷至10℃，用1000mL乙酸乙酯提取，有机层用饱和碳酸氢钠水溶液洗，分出有机层，有机层用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到83.78g化合物Ⅱ(3-甲酰基利福霉素SV)。收率95.0％。α-羟基磺酸钠利福霉素的制备实施例3将80g化合物Ⅱ溶于400mL乙酸乙酯，在20℃滴加含有17.2g亚硫酸氢钠的400mL水溶液，搅拌2h。分出水层，水层再用乙酸乙酯洗；分出水层，得到化合物Ⅲ(α-羟基磺酸钠利福霉素)的水溶液。实施例4将80本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种纯化利福平的方法，其特征在于，包括将利福平原料制备成式III的化合物后纯化，再由纯化的式III化合物制备利福平，/n

【技术特征摘要】
1.一种纯化利福平的方法，其特征在于，包括将利福平原料制备成式III的化合物后纯化，再由纯化的式III化合物制备利福平，





2.如权利要求1所述的纯化利福平的方法，其特征在于，还包括通过式II的化合物制备式III的化合物，





3.如权利要求2所述的纯化利福平的方法，其特征在于，还包括将式III的化合物与无机碱反应生成式II的化合物，再由式II的化合物与1-氨基-4甲基哌嗪反应生成式I的利福平，








4.如权利要求1-3任一所述的纯化利福平的方法，其特征在于，包括步骤：
(1)将利福平原料在盐酸溶液中反应制得式II的化合物；
(2)用式II的化合物与亚硫酸氢盐反应，制得式III的化合物；
(3)将式III化合物的水溶液调pH至中性，纯化，得到化合物II；
(4)将式II化合物与1-氨基-4甲基哌嗪反应生成式I的利福平；
(5)将式I的利福平重结晶得到纯化的利福平；





5.如权利要求4所述的纯化利福平的方法，其特征在于，步骤1是将待纯化的利福平加入5-10倍质量体积比的水中，再加入1-6当量的盐酸，加热至45-55℃反应后，冷却至室温，并用5-10倍量乙酸乙酯提取，分离并浓缩有机层得到化合物...

【专利技术属性】
技术研发人员：严冬，江敏，郭敏，王庆，周红云，张凡，黄辉，孙海丽，李林，符畔，
申请(专利权)人：成都锦华药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：四川;51