一种基于琼脂糖的外泌体富集微流控芯片及制备方法技术

本发明专利技术提供了一种基于琼脂糖的外泌体富集微流控芯片及制备方法，属于外泌体富集平台技术领域。包括基底和琼脂糖层，琼脂糖层贴合在基底表面；琼脂糖层内设置有叉型微通道结构，叉型微通道结构含有斜流通道、汇集通道和分离通道，分离通道用于将含有外泌体的样液中的外泌体通过斜流通道富集到汇集通道中，并用于将样液中的杂质分子从琼脂糖凝胶的孔隙中排出。制备方法为将阳膜的结构复制到琼脂糖上，得到含有所述叉型微通道结构的琼脂糖层；将琼脂糖层贴合在基底上，然后在琼脂糖层上打孔，用作进样口，即得到基于琼脂糖的外泌体富集微流控芯片。本发明专利技术可以实现外泌体的快速富集及高效检测，具有操作方便，高效，以及成本低等特点。

A microfluidic chip based on agarose for exosomes enrichment and its preparation

【技术实现步骤摘要】
一种基于琼脂糖的外泌体富集微流控芯片及制备方法
本专利技术属于外泌体富集平台
，特别提供了一种基于琼脂糖的外泌体富集微流控芯片及制备方法。
技术介绍
外泌体作为细胞外囊泡(EV)的一个重要亚群，其自身及其相关蛋白和核酸已被广泛认为是无创诊断和预后肿瘤生物标志物。外泌体分析目前主要存在两大挑战：一、如何从复杂的细胞基质或体液中分离得到外泌体；二、外泌体直径比细胞小100倍，体积比细胞小1000000倍，且具有高度异质性，如何操控并精准分析。当前，外泌体分离的主流方法是超速离心(差速或密度梯度等)，被认为外泌体分离的“金标准”。但该技术存在明显的缺陷：1、通过高速离心获得的外泌体在形态上容易畸变；2、方法非常耗时，需要20-30小时；3、分离的纯度不高，获得的外泌体夹杂着大量其他微泡。为解决分离问题，最近发展起来的基于外泌体表面特异标志蛋白的免疫亲和方法，如亲和色谱、免疫磁珠或者试剂盒纯化方法，能实现外泌体的快速特异性分离。外泌体分析目前主要还是沿用已有的细胞分析方法。破环性分析，亦即：类似细胞分析一样，将大量外泌体裂解后定性定量分析其组份，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于琼脂糖的外泌体富集微流控芯片，其特征在于，包括基底(1)和琼脂糖层(2)，所述琼脂糖层(2)贴合在所述基底(1)表面；所述琼脂糖层内设置有叉型微通道结构，所述叉型微通道结构含有斜流通道(3)、汇集通道(4)和多个并行排列的分离通道(5)，所述多个并行排列的分离通道(5)的末端与斜流通道(3)连接，所述斜流通道(3)的末端与汇集通道(4)连接，所述斜流通道(3)与汇集通道(4)呈Y型分布；所述琼脂糖层(2)上表面具有孔洞，所述孔洞用作进样口，用于将含有外泌体的样液流经叉型微通道结构的各个分离通道(5)中；所述多个并行排列的分离通道(5)用于将含有外泌体的样液中的外泌体通过斜流通道(3...

【技术特征摘要】
1.一种基于琼脂糖的外泌体富集微流控芯片，其特征在于，包括基底(1)和琼脂糖层(2)，所述琼脂糖层(2)贴合在所述基底(1)表面；所述琼脂糖层内设置有叉型微通道结构，所述叉型微通道结构含有斜流通道(3)、汇集通道(4)和多个并行排列的分离通道(5)，所述多个并行排列的分离通道(5)的末端与斜流通道(3)连接，所述斜流通道(3)的末端与汇集通道(4)连接，所述斜流通道(3)与汇集通道(4)呈Y型分布；所述琼脂糖层(2)上表面具有孔洞，所述孔洞用作进样口，用于将含有外泌体的样液流经叉型微通道结构的各个分离通道(5)中；所述多个并行排列的分离通道(5)用于将含有外泌体的样液中的外泌体通过斜流通道(3)富集到汇集通道(4)中，并用于将样液中的杂质分子从琼脂糖凝胶的孔隙中排出。


2.如权利要求1所述的基于琼脂糖的外泌体富集微流控芯片，其特征在于，所述各个分离通道(5)的宽度为1-100μm，高度为1-100μm。


3.如权利要求1所述的基于琼脂糖的外泌体富集微流控芯片，其特征在于，所述斜流通道(3)呈对称分布，各个所述斜流通道(3)宽度逐渐增大，与汇集通道(4)连接处的宽度最大。


4.如权利要求1-3任一所述的基于琼脂糖的外泌体富集微流控芯片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：制备阳膜，所述阳膜具有并行排列的凹槽和柄端，所述凹槽的末端与斜侧部连接，所述斜侧部与柄端连接；将琼脂糖粉末加热溶解在水溶液中，然后将琼脂糖溶液浇筑于所述阳膜上，冷却固化后，将固化后的琼脂糖揭起，得到含有叉型微通道结构的琼脂糖层...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘笔锋，陈鹏，
申请(专利权)人：华中科技大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42