苦蘵中睡茄内酯提取物在制备预防或治疗非酒精性脂肪性肝病的药物中应用制造技术

本发明专利技术属于医药及保健品领域，具体涉及苦蘵中睡茄内酯提取物在制备防治非酒精性脂肪肝病药物或保健品中应用。在MCD饮食诱导的NASH模型中，睡茄内酯提取物能够抑制肝脏脂肪变性，降低血浆中ALT、和/或AST，以及肝组织中的TG、和/或TC，对NASH的发生发展具有一定的预防和治疗作用。在化学诱导剂所致肝损伤动物模型中，睡茄内酯提取物具有良好的肝损伤保护作用和抗肝纤维化活性。本发明专利技术所述睡茄内酯提取物，具有效果突出，安全性较高，有望发展成为治疗和预防非酒精性脂肪性肝病，以及肝损伤保护、抗肝纤维化的有效药物。

【技术实现步骤摘要】
苦蘵中睡茄内酯提取物在制备预防或治疗非酒精性脂肪性肝病的药物中应用
：本专利技术属于医药领域，涉及苦蘵中睡茄内酯提取物在制备防治非酒精性脂肪性肝病药物或保健品中应用。
技术介绍
：非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholicfattyliverdisease,NAFLD)是一种与胰岛素抵抗(insulinresistance,IR)和遗传易感密切相关的代谢应激性肝损伤。NAFLD的发病人数及影响范围已超过病毒性肝炎，成为影响我国青少年及成年最常见肝病之一。NAFLD的疾病谱包括非酒精性单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholicsteatohepatitis，NASH)、肝纤维化(liverfibrosis)、肝硬化(livercirrhosis)和肝癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)。NASH是NAFLD的进展期，约10-20％的NASH患者可进展为肝纤维化、肝硬化甚至肝癌。NASH的主要特点是炎症及纤维化的产生，可伴有细胞损伤、炎性细胞浸润及肝细胞气球样变，最终引发肝硬化及肝细胞癌。随着NASH发病率的增加，由NASH所致肝癌(NASH-HCC)的发病率已经悄然上升，很多患者常在未出现肝硬化前就已出现肝癌。到目前为止，还没有任何药物被批准用于治疗NASH。NAFLD是一复杂的、系统性的代谢性疾病，主要病理机制为胰岛素抵抗及其继发的糖、脂代谢紊乱。鉴于NAFLD的复杂多因素病理特点，具有多途径药理作用特点的中医药对其治疗中体现出了较大优势。国内一些中成药壳脂胶囊、当飞利肝宁、强肝胶囊、化滞柔肝颗粒、三七脂肝丸已用于NAFLD临床治疗，但这些药物多来源于传统中药复方，存在着物质基础尚不明晰、制剂质量可控性、稳定性困难的问题。苦蘵(PhysalisangulataL.)为茄科酸浆属植物，其功能主治清热，利尿，解毒。治感冒，肺热咳嗽，咽喉肿痛，龈肿，湿热黄疸，痢疾，水肿，热淋，天疱疮，疔疮。临床多用于治疗黄疸，慢性气管炎和细菌性痢疾。睡茄内酯类化合物为该植物主要有效活性成分。近年来，本实验室利用已构建的基于胆固醇7-羟化酶CYP7A1启动子药物筛选靶标的抗非酒精性脂肪性肝病药物细胞筛选模型，对睡茄内酯提取物调控CYP7A1活性进行研究，发现该类提取物对CYP7A1启动子具有不同程度的抑制作用，表明该类提取物具有潜在的抗非酒精性脂肪性肝病活性。本实验室对其抗非酒精性脂肪性肝病作用进行了深入地研究，并在考察提取物安全性的基础上，从体内动物模型中进一步验证了睡茄内酯提取物对MCD饮食诱导的NASH模型以及化学诱导剂CCl4所致肝损伤的保护作用。本实验研究所述睡茄内酯提取物的抗NASH作用以及肝损伤保护作用，迄今尚未见有国内外的相关报道。
技术实现思路
：本专利技术提供了苦蘵中睡茄内酯部的制备方法以及在防治非酒精性脂肪性肝病以及肝损伤保护、抗肝纤维化药物或保健品中的应用。苦蘵中睡茄内酯提取物在制备预防或治疗非酒精性脂肪性肝病的药物或保健品中应用。所述的应用，其特征在于所述的苦蘵中睡茄内酯提取物包含PhysalinB、PhysalinD、PhysalinF、PhysalinI和PhysalinH任意两种或两种以上的混合物。所述的应用，其特征在于按重量份计：所述的苦蘵中睡茄内酯提取物为PhysalinB0.1-100份、PhysalinD0.1-100份、PhysalinF0.1-100份、PhysalinI0.1-100份和PhysalinH0.1-100份的混合物。所述的应用，其特征在于所述的苦蘵中睡茄内酯提取物为苦蘵中睡茄内酯提取物与药学上可接受的辅料组成药物组合物。所述的应用，其特征在于苦蘵中睡茄内酯提取物制成口服剂型和非口服剂型；所述口服剂型为片剂、胶囊、散剂或颗粒。本专利技术的苦蘵中睡茄内酯提取物的制备方法具体步骤如下：干燥的苦蘵药材粉碎后用95％乙醇回流提取三次，每次3小时。过滤且合并滤液后50℃减压浓缩至干。将得到的浸膏以2:1的比例(D101大孔树脂填料重量：浓缩物重量)上样，依次以20％、80％和100％乙醇浓度梯度经D101大孔树脂层析纯化，收集80％乙醇洗脱液减压浓缩至干得到苦蘵中睡茄内酯提取物。通过与Physalin类化合物标准品对比经HPLC-DAD确定了主要成分的结构，并且通测定了主要Physalin类化合物的含量。本专利技术以胆固醇7-羟化酶CYP7A1启动子作为药物筛选靶标，将CYP7A1荧光素酶质粒pGL4.17-CYP7A1与Renailla质粒共转染人正常肝细胞LO2，利用双荧光素酶报告系统发现睡茄内酯提取物对CYP7A1启动子具有不同程度的抑制作用。为进一步评价化合物在体内治疗非酒精性脂肪性肝病的药效，本专利技术首先采用600mg/kg剂量对睡茄内酯提取物进行毒性评价，给药14天后，小鼠体重无明显下降，无肝毒性，且无中毒迹象及死亡发生，表明药物安全性较高，这不仅为化合物体内药效学评价提供了依据，也为该类化合物开发成为药物或保健品奠定了基础。本专利技术体内药效学实验，首先是以MCD饮食诱导的NASH模型，评价睡茄内酯提取物的体内抗NASH作用。肝组织病理切片染色结果表明，与模型组相比，睡茄内酯提取物给药组小鼠肝细胞脂肪堆积和炎症细胞浸润情况得到明显改善；血浆中的ALT、AST活性，以及肝脏中的TC、TG的含量明显低于模型组。上述结果表明，睡茄内酯提取物可以预防MCD饮食诱导的肝脏脂肪变性和氧化应激损伤，对NASH的发生发展具有一定预防和治疗作用。与此同时本专利技术还利用化学诱导剂CCL4诱导肝损伤模型，评价睡茄内酯提取物对肝损伤保护作用。肝组织病理切片染色结果表明，睡茄内酯提取物能缓解CCL4诱导的肝损伤，改善模型组小鼠肝功能和肝脏病理改变，降低肝纤维化的程度，延缓肝纤维化的发生和发展。本专利技术用于非酒精性脂肪性肝炎、肝损伤保护和肝纤维化防治时，睡茄内酯提取物口服或非口服给药均属安全有效的。口服用药可以制成任何常规剂型，如片剂、胶囊、散剂、颗粒等；非口服用药，可制成注射液针剂等。本专利技术所述睡茄内酯提取物给药剂量，可根据给药方式、患病程度、患者年龄，有无既往病史等因素综合考虑进行调整。本专利技术用于制备防治非酒精性脂肪性肝病以及肝损伤保护、抗肝纤维化药物或保健品时，其辅料及制备方法可选用药学上可接受的任何形式。附图说明图1-苦蘵中睡茄内酯提取物液相图；图2-睡茄内酯提取物对胆固醇7-羟化酶CYP7A1启动子活性的抑制作用；其中：*p<0.05，**p<0.01与对照组(给药浓度为零)相比。图3-睡茄内酯提取物对小鼠脏器毒性的影响；图4-睡茄内酯提取物对MCD饮食诱导的NASH模型小鼠肝组织切片HE染色结果；其中：A为对照组(喂食模型对照MCS饮食)小鼠肝脏组织切片HE染色结果；B为NASH模型组(喂食MCD饮食)小鼠肝脏组织切片HE染色结果；C-E为睡茄内酯提取物(7.5、15、30mg/kg)给药组小鼠肝脏组织切本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.苦蘵中睡茄内酯提取物在制备预防或治疗非酒精性脂肪性肝病的药物或保健品中应用。/n

【技术特征摘要】
1.苦蘵中睡茄内酯提取物在制备预防或治疗非酒精性脂肪性肝病的药物或保健品中应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的苦蘵中睡茄内酯提取物包含PhysalinB、PhysalinD、PhysalinF、PhysalinI和PhysalinH任意两种或两种以上的混合物。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于按重量份计：所述的苦蘵中睡茄内酯提取物为PhysalinB0.1-100份、Physa...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗建光，张浩，陈馨霖，项德娟，张美卉，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32