MicroRNAs在制备索拉非尼治疗肝癌的增强剂中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种MicroRNAs在制备索拉非尼治疗肝癌的增强剂中的应用，属于肿瘤治疗技术领域，所述MicroRNAs包括miR‑15a和/或miR‑20b。在本发明专利技术中，所述miR‑15a和/或miR‑20b的表达通过抑制索拉非尼诱导肝癌细胞增殖和促进肝癌细胞凋亡，来增强索拉非尼治疗肝癌的作用。本发明专利技术中的miR‑15a、miR‑20b参与肝癌细胞索拉非尼耐药的作用，为肝癌的治疗及逆转索拉非尼耐药提供新的潜在药靶。因此本发明专利技术具有较强的理论和现实意义。

MicroRNAs in the preparation of sorafenib in the treatment of liver cancer

【技术实现步骤摘要】
MicroRNAs在制备索拉非尼治疗肝癌的增强剂中的应用
本专利技术属于肿瘤治疗
，尤其涉及MicroRNAs在制备索拉非尼治疗肝癌的增强剂中的应用。
技术介绍
肝癌(肝细胞癌)是我国常见的恶性肿瘤，据国家癌症中心2019年1月发布的癌症统计报告显示其发病率居第四位，死亡率居第二位。在世界范围内肝癌也是死亡率最高的5种癌症之一，严重威胁人类健康和生命。肝癌起病隐匿，早期症状不明显，确诊时往往已到中晚期。手术，肝移植和局部消融是针对早期患者的主要治疗方法，然而超过70％的手术和局部消融患者在5年内复发。同样，术后复发也是肝癌肝移植面临的主要问题。为此，系统化疗和靶向治疗成为中晚期肝癌患者的主要治疗手段。然而由于肝癌细胞具有很强的耐药性，现有肝癌治疗药物的效果都很不理想。因此，研究和探索肝癌细胞的耐药机制，发掘耐药分子靶点和标记物，对肝癌新药研发和用药指导具有重要意义。传统化疗药物在肝癌的治疗上收效甚微，而索拉非尼的问世，使肝癌的治疗获得了巨大突破。索拉非尼(Sorafenib)是一种小分子多靶点口服抗癌药，在2007年被美国FDA批准用于治疗不可切除的肝细胞癌。2008年被正式批准进入我国市场，成为第一个用于治疗晚期肝癌的一线用药及手术和肝移植后的辅助用药。在机理上，索拉非尼不仅能抑制VEGFR、PDGFR、FLT3和KIT受体酪氨酸激酶的活性，还能强效抑制RAF激酶。因此，索拉非尼既能抑制血管新生又能直接抑制肿瘤细胞增殖。SHARP、Oriental等临床研究显示，索拉非尼治疗晚期肝癌相比安慰剂可显著延长患者生存期(SHARP研究：10.7个月对7.9个月，P＝0.00058；Oriental研究：6.5个月对4.2个月，P＝0.014)。这些关键性研究，奠定了索拉非尼治疗晚期肝癌的一线地位，使其成为进展期肝癌的标准一线疗法，并被多部国内外指南推荐为肝癌治疗标准。我国2011版《原发性肝癌诊疗规范》也推荐索拉非尼为全身治疗首选方案。在过去的十年间，索拉非尼成为肝癌患者错失传统治疗手段时，或者传统治疗疗效不佳时可供选择的唯一一线药物。尽管二线靶标药物瑞戈非尼(regorafenib)以及二线免疫药物PD-1抑制剂近两年疗效引人注意，然而，前期临床数据表明，对索拉非尼治疗失败后的患者进行二线药物临床试验多以失败告终。但是由于原发性及获得性耐药的原因，索拉非尼的疗效始终不尽如人意。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供MicroRNAs在制备索拉非尼治疗肝癌的增强剂中的应用，MicroRNAs中的miR-15a和/或miR-20b的表达增强了索拉非尼治疗肝癌的作用。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：本专利技术提供了MicroRNAs在制备索拉非尼治疗肝癌的增强剂中的应用；所述MicroRNAs包括miR-15a和/或miR-20b。本专利技术还提供了MicroRNAs在制备促进索拉非尼诱导肝癌细胞凋亡的药物中的应用；所述MicroRNAs包括miR-15a和/或miR-20b。本专利技术还提供了MicroRNAs在制备抑制索拉非尼诱导肝癌细胞增殖的药物中的应用；所述MicroRNAs包括miR-15a和/或miR-20b。优选的，所述药物的剂型包括片剂、颗粒剂、胶囊剂和乳剂中的一种或几种。本专利技术提供了MicroRNAs在制备索拉非尼治疗肝癌的增强剂中的应用，所述MicroRNAs包括miR-15a和/或miR-20b，所述miR-15a和/或miR-20b的表达通过抑制索拉非尼诱导肝癌细胞增殖和促进肝癌细胞凋亡，来增强索拉非尼治疗肝癌的作用。附图说明图1-1为显示了Cas9文库筛选索拉非尼耐药(增敏)基因流程示意图；图1-2为显示了miR-15a和miR-20b的茎环序列示意图；图2-1为显示了肝癌细胞株MHCC-LM3分别转染miR-15a和20bmimics后转录水平的过表达情况；图2-2为显示了miR-15a和20b过表达增加了索拉非尼处理引起的细胞死亡率；图2-3为显示了转染了miR-15a和miR-20b的Focus肝癌细胞对索拉非尼作用敏感性增加；图2-4为显示了图2-3实验中凋亡细胞百分比统计图；图2-5为显示了转染了miR-15a和miR-20b的Huh7肝癌细胞对索拉非尼作用敏感性增加；图2-6为显示了图2-5实验中凋亡细胞百分比统计图；图3-1为显示了CCK8实验miR-15和miR-20b对肝癌细胞MHCC-LM3在索拉非尼处理下存活能力的影响；图3-2为显示了CCK8实验miR-15和miR-20b对肝癌细胞Focus在索拉非尼处理下存活能力的影响；图3-3为显示了转染了miR-15a和miR-20b的肝癌细胞MHCC-LM3及对照细胞在索拉非尼作用下形成平板克隆能力的影响；图3-4为显示了图3-3中MHCC-LM3细胞形成的细胞团数目统计图；图4为显示了动物实验中miR-15a和miR-20b对索拉非尼治疗移植瘤的疗效的影响，其中，A和B分别显示了miR-15a和20b的过表达减弱了索拉非尼处理下MHCC-LM3细胞在裸鼠皮下形成肿瘤的能力。具体实施方式本专利技术提供了MicroRNAs在制备索拉非尼治疗肝癌的增强剂中的应用；所述MicroRNAs包括miR-15a和/或miR-20b。在本专利技术中，当所述增强剂中包括miR-15a和miR-20b时，两种以任意质量比混合。本专利技术对所述增强剂的剂型没有特殊限定，采用医学上可接受的剂型即可。本专利技术对所述增强剂中miR-15a和/或miR-20b的含量以及采用的辅料及辅料含量没有特殊限定，采用常规制备各种剂型使用的辅料种类和辅料用量即可，采用各种剂型中常规含有活性物质的含量即可。本专利技术对所述增强剂的制备方法没有特殊限定，采用常规剂型的常规制备方法即可。本专利技术提供了MicroRNAs在制备促进索拉非尼诱导肝癌细胞凋亡的药物中的应用；所述MicroRNAs包括miR-15a和/或miR-20b。在本专利技术中，当所述药物中包括miR-15a和miR-20b时，两种基因以任意质量比混合。在本专利技术中，所述药物的剂型包括片剂、颗粒剂、胶囊剂和乳剂中的一种或几种。本专利技术对所述药物中miR-15a和/或miR-20b的含量以及采用的辅料及辅料含量没有特殊限定，采用常规制备各种剂型使用的辅料种类和辅料用量即可，采用各种剂型中常规含有活性物质的含量即可。本专利技术对所述药物的制备方法没有特殊限定，采用常规剂型的常规制备方法即可。本专利技术提供了MicroRNAs在制备抑制索拉非尼诱导肝癌细胞增殖的药物中的应用；所述MicroRNAs包括miR-15a和/或miR-20b。在本专利技术中，当所述药物中包括miR-15a和miR-20b时，两种基因以任意质量比混合。在本专利技术中，所述药物的剂型包括片剂、颗粒剂、胶囊剂和乳剂中的一种或几种。本专利技术对所述药物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.MicroRNAs在制备索拉非尼治疗肝癌的增强剂中的应用；/n所述MicroRNAs包括miR-15a和/或miR-20b。/n

【技术特征摘要】
1.MicroRNAs在制备索拉非尼治疗肝癌的增强剂中的应用；
所述MicroRNAs包括miR-15a和/或miR-20b。


2.MicroRNAs在制备促进索拉非尼诱导肝癌细胞凋亡的药物中的应用；
所述MicroRNAs包括miR-15a和/或miR-20b...

【专利技术属性】
技术研发人员：高勇，李砚东，栗丽，王光学，李钦传，
申请(专利权)人：上海市东方医院同济大学附属东方医院，
类型：发明
国别省市：上海;31