一种生化校准品用基质以及一种生化校准品制造技术

本发明专利技术适用于生化技术领域，尤其涉及一种生化标准品用基质以及一种生化标准品，其中每1升所述生化校准品用基质中包含：10~100毫摩尔pH调节剂、2~50克糖类保护剂、2~100克聚合物类保护剂、5~50克蛋白类保护剂、0.5~5克表面活性剂、5~20毫摩尔氨基酸、0.02~50毫摩尔抗氧化剂、0.05~2毫摩尔蛋白酶抑制剂、5~30克醇类有机溶剂、0.2~0.5克防腐剂、8.5~9.5克氯化钠以及0.1~5毫摩尔镁盐和/或锌盐。本发明专利技术实施例提供的一种生化标准品用基质，当将分析组分加入到上述生化标准品用基质中时，生化标准品用基质中各组分能够对分析组分起到较好的保护效果，尤其是能够避免冻干过程中分析组分因失水而导致的结构变异，有效地保留分析组分的效果。

A matrix for biochemical calibrator and a biochemical calibrator

【技术实现步骤摘要】
一种生化校准品用基质以及一种生化校准品
本专利技术属于生化
，尤其涉及一种生化校准品用基质以及一种生化校准品。
技术介绍
在临床诊断中，为了方便对样本进行诊断，通常需要用到校准品，校准品可包含一种甚至多达几十种的分析成分，其质量好坏直接关系到检测结果是否准确可靠。目前常用的校准品有液体和冻干粉两种形态，液体校准品使用方便，但稳定性差，尤其是含酶类的生化校准品，溶液保存易失活，保质期较短。因此，生化校准品通常还是采用冻干的方式进行保存。现有的冻干粉，通常是先将分析成分溶于血清基质，然后进行冻干，由于冻干过程中会存在部分活性损失，因此需要先复溶部分冻干粉并测定其中的分析成分含量作为校准值，当需要使用时，再将剩余冻干粉按比例加入水中进行复溶，并以先前测定的校准值作为标准值进行后续的计算。然而现有的以血清作为校准品基质的校准品，还存在着两个主要的问题，一个是冻干过程中，同一批冻干品的活性损失不同，同一批冻干品之间的瓶间差大，也就是说将复溶的部分冻干粉所测定的分析成分含量作为标准值存在较大误差，影响后续的检测结果，另一个问题是冻干保存的过程中，冻干粉的活性也会逐渐降低，与先前测定的校准值会存在差异，同样影响到后续的检测结果。可见，现有的技术中，以血清作为基质的校准品还存在着冻干过程中活性损失差异大，冻干保存过程中冻干品不稳定而影响后续检测准确结果的技术问题。
技术实现思路
本专利技术实施例的目的在于提供一种生化校准品用基质，旨在解决现有的以血清作为基质的校准品还存在的冻干过程中活性损失差异大，冻干保存过程中冻干品不稳定而影响后续检测准确结果的技术问题。本专利技术实施例是这样实现的，一种生化校准品用基质，每1升所述生化校准品用基质中包含：10～100毫摩尔pH调节剂、2～50克糖类保护剂、2～100克聚合物类保护剂、5～50克蛋白类保护剂、0.5～5克表面活性剂、5～20毫摩尔氨基酸、0.02～50毫摩尔抗氧化剂、0.05～2毫摩尔蛋白酶抑制剂、5～30克醇类有机溶剂、0.2～0.5克防腐剂、8.5～9.5克氯化钠以及0.1～5毫摩尔镁盐和/或锌盐。本专利技术实施例的另一目的在于提供一种生化校准品，通过向上述生化校准品用基质中加入分析成分，分袋后冷冻干燥制备而成，所述生化校准品为冻干粉。本专利技术实施例提供了一种生化校准品用基质，按照每1升生化校准品用基质计算，包含10～100毫摩尔pH调节剂、2～50克糖类保护剂、2～100克聚合物类保护剂、5～50克蛋白类保护剂、0.5～5克表面活性剂、5～20毫摩尔氨基酸、0.02～50毫摩尔抗氧化剂、0.05～2毫摩尔蛋白酶抑制剂、5～30克醇类有机溶剂、0.2～0.5克防腐剂、8.5～9.5克氯化钠以及0.1～5毫摩尔镁盐和/或锌盐。本专利技术实施例提供的一种生化校准品用基质，当将分析成分加入到上述生化校准品用基质中时，糖类保护剂和聚合物类保护剂能增加溶液黏度，防止冷冻过程中冰晶生长过快，从而保持酶分子的空间结构，降低酶活损失，蛋白质类保护剂能够提高体系中固含量，表面活性剂能在冻结过程中降低冰水间的界面张力，避免酶分子被吸附于冰-水界面上而破坏其空间结构，pH调节剂保证了基质的pH，避免酶因处于极端pH环境下而失活，而氨基酸的添加则抑制了冻干过程中pH的改变，进而避免因pH改变而导致的酶的活性损失，醇类有机溶剂可提高体系蒸气压，利于升华，且能够避免冻干过程中表面冻干层的塌陷，提高冻干粉的稳定性，而大所述分析成分的活性中心均为镁盐以及锌盐，添加一定量的金属离子能够进一步稳定分析成分的活性，且上述各物质对各种不同的分析组分均具有良好的保护效果，通过上述各物质对分析组分的保护作用，降低了在冻干过程中分析成分的活性损失，制备出的生化校准平冻干粉在复溶后的平均活性回收率高于75％。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。本专利技术实施例提供一种生化校准品用基质，其中，每1升所述生化校准品用基质中包含：10～100毫摩尔pH调节剂、2～50克糖类保护剂、2～100克聚合物类保护剂、5～50克蛋白类保护剂、0.5～5克表面活性剂、5～20毫摩尔氨基酸、0.02～50毫摩尔抗氧化剂、0.05～2毫摩尔蛋白酶抑制剂、5～30克醇类有机溶剂、0.2～0.5克防腐剂、8.5～9.5克氯化钠以及0.1～5毫摩尔镁盐和/或锌盐。在本专利技术实施例中，由于常见的分析成分通常是酶，后续主要以酶作为分析成分进行解释说明。在本专利技术实施例中，在所述生化校准品基质中加入一定量的pH调节剂，能够将溶液的pH控制在6～8之间，避免酶在极端pH条件下变性失活。作为本专利技术的一个优选实施例，每1升所述生化校准品用基质中包含30～50毫摩尔pH调节剂，更进一步的，每1升所述生化校准品用基质中包含40毫摩尔pH调节剂。做为本专利技术的一个优选实施例，所述pH调节剂选用磷酸氢盐和磷酸二氢盐。相比于其他的pH调节剂，磷酸氢盐和磷酸二氢盐构成了磷酸盐缓冲液，不仅有助于维持溶液的pH值，此外溶液的渗透压也与人体生理环境相似，有助于维持溶液的稳定。在本专利技术实施例中，糖类保护剂和聚合物类保护剂能增加溶液黏度，防止冷冻过程中冰晶生长过快，干燥后能紧密地包裹酶分子，此外，糖含有的羟基能够在酶干燥失水时替代表面水化层，与酶形成氢键，即能稳定酶结构，有效的保持酶分子的空间结构，降低了冻干过程中的酶的活性损失。在本专利技术实施例中，由于糖类保护剂和聚合物类保护剂通常也会用在血清基质中，糖类保护剂和聚合物类保护剂属于本领域技术人员的公知常识，因此，本专利技术对具体的糖类保护剂和聚合物类保护剂不做具体的限制，糖类保护剂可以是蔗糖、乳糖、麦芽糖等等，聚合物类保护剂可以是聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙二醇(PEG)、β-葡聚糖等等。作为本专利技术的一个优选实施例，每1升所述生化校准品用基质中包含10～30克糖类保护剂、10～50克聚合物类保护剂，更进一步的，每1升所述生化校准品用基质中包含20克糖类保护剂、30克聚合物类保护剂。在本专利技术实施例中，蛋白质保护剂能提高体系中固形物含量，作为赋形剂参与酶的冷冻干燥，而表面活性剂能在冻结过程中降低冰水间的界面张力，避免酶分子被吸附于冰-水界面上而破坏其空间结构。同样的，本专利技术对具体的蛋白质类保护剂和表面活性剂不作具体地限制，蛋白质类保护剂可以是人血清血蛋白、牛血清血蛋白、卵清蛋白等等，表面活性剂可以是甜菜碱、曲拉通X-100、十二烷基硫酸钠等等。作为本专利技术的一个优选实施例，每1升所述生化校准品用基质中包含20～40克蛋白类保护剂、2～4克表面活性剂，更进一步的，每1升所述生化校准品用基质中包含30克蛋白类保护剂、3克表面活性剂。在本专利技术实施例中，由于氨基酸同时具有酸性官能团以及碱性官能团，因此氨基酸的添加则能抑制冻结过程中溶液pH的改变，避免冻结过程中因pH改变而造成酶的活性损失。作为本专利技术的一个优选实施例，每本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生化校准品用基质，其特征在于，每1升所述生化校准品用基质中包含：/n10~100毫摩尔pH调节剂、2~50克糖类保护剂、2~100克聚合物类保护剂、5~50克蛋白类保护剂、0.5~5克表面活性剂、5~20毫摩尔氨基酸、0.02~50毫摩尔抗氧化剂、0.05~2毫摩尔蛋白酶抑制剂、5~30克醇类有机溶剂、0.2~0.5克防腐剂、8.5~9.5克氯化钠以及0.1~5毫摩尔镁盐和/或锌盐。/n

【技术特征摘要】
1.一种生化校准品用基质，其特征在于，每1升所述生化校准品用基质中包含：
10~100毫摩尔pH调节剂、2~50克糖类保护剂、2~100克聚合物类保护剂、5~50克蛋白类保护剂、0.5~5克表面活性剂、5~20毫摩尔氨基酸、0.02~50毫摩尔抗氧化剂、0.05~2毫摩尔蛋白酶抑制剂、5~30克醇类有机溶剂、0.2~0.5克防腐剂、8.5~9.5克氯化钠以及0.1~5毫摩尔镁盐和/或锌盐。


2.根据权利要求1所述的一种生化校准品用基质，其特征在于，每1升所述生化校准品用基质中包含：
30~50毫摩尔pH调节剂、10~30克糖类保护剂、10~50克聚合物类保护剂、20~40克蛋白类保护剂、2~4克表面活性剂、10~20毫摩尔氨基酸、20~40毫摩尔抗氧化剂、0.1~0.5毫摩尔蛋白酶抑制剂、10~20克醇类有机溶剂、0.2~0.5克防腐剂、8.5~9.5克氯化钠以及1~2毫摩尔镁盐和/或锌盐。


3.根据权利要求1所述的一种生化校准品用基质，其特征在于，每1升所述生化校准品用基质中包含：
40毫摩尔pH调节剂、20克糖类保护剂、30克聚合物类保护剂、30克蛋白类保护剂、3克表面活性剂、15毫摩尔氨基酸、30毫摩尔抗氧化剂、0.3毫摩尔蛋白酶抑制剂、15克醇类有机溶剂、0.3克防腐剂、9克氯化钠以及1.5毫摩尔镁盐和/或锌盐。


4.根据权利要求1~3任一所述的一种生化校准品用基质，其特征在于，所述pH调节剂选用磷酸氢盐和磷酸二氢盐。


5.根据权利要求1~3任一所述的一种生化校准品用基质，其特征在于，所述氨基酸选用甘氨酸。


6.根据权利要求1~3任一所述的一种生...

【专利技术属性】
技术研发人员：王超儿，陈媛，江虹，张闻，周海滨，
申请(专利权)人：宁波瑞源生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33