重组表达大熊猫促黄体生成素的载体、表达系统及制备方法技术方案

本发明专利技术公开了重组表达大熊猫促黄体生成素的载体、表达系统及制备方法，涉及基因工程技术领域。其包括编码大熊猫LHβ亚基的第一基因和编码大熊猫LHα亚基的第二基因，第一基因的序列为SEQ ID NO.1所示，第二基因的序列为SEQ ID NO.3所示。通过构建重组表达大熊猫促黄体生成素的载体、表达系统可以实现大熊猫LHβ亚基、LHα亚基及其亚基复合物的稳定持续活性表达。表达产物可以用于诱导大熊猫发情及排卵，使用大熊猫源的促黄体生成素不会诱使机体产生不良反应，有利于大熊猫繁育质量的提升。此外，该重组制备方法简便易行，具有广泛的应用前景。

Vector, expression system and preparation method of recombinant giant panda luteinizing hormone

【技术实现步骤摘要】
重组表达大熊猫促黄体生成素的载体、表达系统及制备方法
本专利技术涉及基因工程
，具体而言，涉及重组表达大熊猫促黄体生成素的载体、表达系统及制备方法。
技术介绍
大熊猫是我国珍稀濒危动物，繁殖率低下制约着大熊猫种群数量与保育质量。研究表明，大熊猫繁殖率低下可能与促卵泡生成素(Folliclestimulatinghormone，FSH)、促黄体生成素(Luteinizinghormone，LH)等促性腺激素分泌不足有关。为了提高大熊猫保育质量，多年来我国使用异种外源促性腺激素(例如：马源促卵泡生成素(FSH)，马源促黄体生成素(LH))诱导大熊猫发情及排卵，然而，重复使用异种外源激素可能会诱使机体产生不良反应，进而影响其长期效果。目前，尚未有合适的方法解决上述问题。鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供重组表达大熊猫促黄体生成素的载体、表达系统及制备方法以解决上述技术问题。本专利技术是这样实现的：一种重组表达大熊猫促黄体生成素的载体，其包括编码大熊猫LHβ亚基的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组表达大熊猫促黄体生成素的载体，其特征在于，其包括编码大熊猫LHβ亚基的第一基因和编码大熊猫LHα亚基的第二基因，所述第一基因的序列为SEQ ID NO.1所示，所述第二基因的序列为SEQ ID NO.3所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种重组表达大熊猫促黄体生成素的载体，其特征在于，其包括编码大熊猫LHβ亚基的第一基因和编码大熊猫LHα亚基的第二基因，所述第一基因的序列为SEQIDNO.1所示，所述第二基因的序列为SEQIDNO.3所示。


2.根据权利要求1所述的重组表达大熊猫促黄体生成素的载体，其特征在于，所述载体还包括连接序列；
优选的，所述连接序列为T2A序列，所述T2A的序列为SEQIDNO.2所示。


3.含有权利要求1或2所述的重组表达大熊猫促黄体生成素的载体的宿主细胞表达系统。


4.根据权利要求3所述的宿主细胞表达系统，其特征在于，所述宿主细胞表达系统是将所述载体转入宿主细胞中构建而成；
优选的，所述宿主细胞为CHO-K1细胞。


5.一种生产重组大熊猫促黄体生成素的方法，其特征在于，其包括如下步骤：培养权利要求3或4所述的宿主细胞表达系统。


6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，培养宿主细胞表达系统前还包括载体构建步骤和细胞表达系统的构建，其包括如下步骤：
A：合成第一基因、T2A序列和第二基因；
B：将插入片段第一基因、T2A序列和第二基因一起连接到慢病毒表达载体质粒pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro中，构建含有所述第一基因、T2A序列和第二基因的重组表达大熊猫促黄体生成素的载体；
C：将所述重组表达大熊猫促黄体生成素的载体-CMV-MCS-EF1-Puro及慢病毒包装...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄炎，王亚军，张志忠，张剑南，屈元元，凌珊珊，李娟，
申请(专利权)人：中国大熊猫保护研究中心，
类型：发明
国别省市：四川;51