一种甘薯卷叶病毒的RPA检测引物及检测方法和应用技术

本发明专利技术公布了一种甘薯卷叶病毒的RPA检测引物及检测方法和应用，专用于甘薯卷叶病毒特异性分子检测；所述检测引物如下：上游引物F如SEQ ID No:1所示和下游引物R如SEQ ID No:2所示；通过提取感染甘薯卷叶病毒的植株DNA、进行RPA恒温扩增20min，扩增后进行琼脂糖凝胶电泳，产生一条特异性条带。本发明专利技术针对甘薯卷叶病毒建立的RPA等温扩增技术具有扩增快速高效、特异性好、操作简便、不需要特殊仪器等优点，为甘薯卷叶病毒早期诊断提供技术依据。

RPA detection primer, detection method and application of sweet potato leafroll virus

【技术实现步骤摘要】
一种甘薯卷叶病毒的RPA检测引物及检测方法和应用
本专利技术属于农作物病害检测、鉴定及防治
，具体涉及一种甘薯卷叶病毒的RPA检测引物及检测方法和应用。
技术介绍
甘薯是以块根或秧蔓进行繁殖的无性繁殖作物，常会受到病毒的侵染，病毒侵染甘薯后会继代相传，从而影响甘薯的正常生长发育，种质和种性退化。而甘薯卷叶病毒(Sweetpotatoleafcurlvirus，SPLCV)是以粉虱传播的能侵染甘薯的主要病毒之一，每年在全世界甘薯产区均有发生，给甘薯生产带来严重的危害，发生严重导致甘薯绝产，造成巨大的经济损失。甘薯卷叶病毒属双生病毒科(Geminiviridae)菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)成员，SPLCV是典型的DNA病毒，由烟粉虱(Bemisiatabaci)以持久方式传播。SPLCV侵染甘薯后，甘薯植株会出现叶片卷曲，坏死、花叶等症状。目前，生产上还没有特效药防治病毒病，因此，建立高效、快速、实用的病毒检测技术，加强对甘薯病毒的监测和诊断，对甘薯病毒病的防控具有重要的意义。目前检测双生病毒的传统方法和聚合本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种甘薯卷叶病毒的RPA检测引物，其特征在于：所述的RPA检测引物包括如下一个引物对：/n上游引物F：5'-AGGCTGAACTTCGAGACAGCTATCGTGCCCTAC-3'，如SEQ ID No:1所示；/n下游引物R：5'-AAGACCTGCATTCTATCCCTCAGATCCATTCGGAT-3'，如SEQ ID No:2所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种甘薯卷叶病毒的RPA检测引物，其特征在于：所述的RPA检测引物包括如下一个引物对：
上游引物F：5'-AGGCTGAACTTCGAGACAGCTATCGTGCCCTAC-3'，如SEQIDNo:1所示；
下游引物R：5'-AAGACCTGCATTCTATCCCTCAGATCCATTCGGAT-3'，如SEQIDNo:2所示。


2.一种利用权利要求1所述的RPA检测引物的甘薯卷叶病毒的RPA快速检测方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)DNA提取：对样本进行处理，抽提样本DNA；
(2)RPA扩增：以经步骤(1)提取的DNA为模板，采用所述RPA检测引物进行恒温扩增反应；
(3)检测：RPA反应结束后，或取反应产物用琼脂糖凝胶电泳检测，出现464bp特异性条带的判断为阳性，无条带的判断为阴性。

【专利技术属性】
技术研发人员：李华伟，邱思鑫，邱永祥，张鸿，李国良，罗文彬，刘中华，许泳清，汤浩，纪荣昌，林赵淼，许国春，
申请(专利权)人：福建省农业科学院作物研究所，
类型：发明
国别省市：福建;35