一种流控式的HPV基因分型芯片检测方法技术

本发明专利技术涉及体外诊断试剂检测领域，更具体地，涉及一种流控式的HPV基因分型芯片检测方法，包括如下步骤：将待测样品PCR产物滴入仪器的PCR待测液小试管内，并在HPV芯片杂交槽内放置HPV基因分型芯片，同时准备好杂交、耦合、显色所需要的反应液体，以及清洗所需的蒸馏水，进行自动化检测。本发明专利技术有益效果：由于采用流控方式的生化反应模型，在垂直加样的移液装置和循环泵的配合下，使得HPV检测所需要的多步骤杂交、偶联、显色、清洗过程，可以共用一套移液装置、存储池、流体管道、循环泵和生化反应槽，从而保证了生化检测步骤的连续性，所以更加容易实现自动化检测。

A flow controlled detection method of HPV genotyping chip

【技术实现步骤摘要】
一种流控式的HPV基因分型芯片检测方法
本专利技术涉及体外诊断试剂检测领域，更具体地，涉及一种流控式的HPV基因分型芯片检测方法。
技术介绍
目前国内临床进行人乳头状瘤病毒(Humanpapillomavirus，HPV)DNA检测的主要方法为实时荧光PCR与杂交捕获法，PCR-膜杂交法采用基因扩增技术及导流杂交原理，通过反向点杂交检测扩增产物与包被有型特异性探针膜杂交结果，再用碱性磷酸酶系统定性检测，从而对21种HPV基因型(6、11、16、18、31、33、35、39、42、43、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68和CP8304)进行分型检测分析，对于预防宫颈癌发生具有重要的临床应用价值。目前对PCR-反向点杂交法的HPV基因分型芯片，通常采用样品提取-PCR放大-恒温杂交-可见光判读的方法，人工介入工作量较大。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是：提供一种可以减轻人工工作量的效率高的流控式的HPV基因分型芯片检测方法。为了解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案为：提本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种流控式的HPV基因分型芯片检测方法，其特征在于，使用检测系统进行检测，所述检测系统包括：移液装置和温控流控杂交平台和图像获取装置；/n所述移液装置包括绕轴旋转的机架和可竖直方向垂直升降的绕轴旋转的移液针；所述机架的圆周方向上设置有PCR待测液小试管、反应液存储池和多个敞口容器；多个敞口容器中的四个分别盛有杂交A液、杂交B液、杂交C液和杂交D液；/n所述温控流控杂交平台包括机架、设置在机架上的HPV芯片杂交槽和循环泵，所述HPV芯片杂交槽与反应液存储池通过循环管道循环连通，所述循环管道上设有循环泵；/n所述图像获取装置包括CCD/CMOS成像相机；/n所述检测方法包括如下步骤：/n步骤1...

【技术特征摘要】
1.一种流控式的HPV基因分型芯片检测方法，其特征在于，使用检测系统进行检测，所述检测系统包括：移液装置和温控流控杂交平台和图像获取装置；
所述移液装置包括绕轴旋转的机架和可竖直方向垂直升降的绕轴旋转的移液针；所述机架的圆周方向上设置有PCR待测液小试管、反应液存储池和多个敞口容器；多个敞口容器中的四个分别盛有杂交A液、杂交B液、杂交C液和杂交D液；
所述温控流控杂交平台包括机架、设置在机架上的HPV芯片杂交槽和循环泵，所述HPV芯片杂交槽与反应液存储池通过循环管道循环连通，所述循环管道上设有循环泵；
所述图像获取装置包括CCD/CMOS成像相机；
所述检测方法包括如下步骤：
步骤1：将HPV基因分型芯片放置在HPV芯片杂交槽内；所述HPV基因分型芯片包括基质和固定在基质上的HPV基因分型特异性检测探针；
将待测样品经提纯处理、PCR特异性扩增后形成待测产物，然后将所述待测产物滴放在PCR待测液小试管内；
步骤2：使用移液针将PCR待测液小试管内的待测产物转移到反应液存储池中，使用移液针从所述敞口容器中将杂交A液加入到反应液存储池中得第一混合液；
通过循环管道和循环泵将第一混合液在反应液存储池和HPV芯片杂交槽之间流动，使加入反应液存储池的待测产物和HPV芯片杂交槽中的HPV基因分型芯片进行杂交反应，杂交反应完成后，排空HPV芯片杂交槽和反应液存储池内的第一混合液；
步骤3：使用移液针将标记...

【专利技术属性】
技术研发人员：甘振华，包琴，邹复民，熊保平，
申请(专利权)人：福建工程学院，
类型：发明
国别省市：福建;35