一种用于干细胞高效扩增的双层电纺纤维膜及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种用于干细胞高效扩增的双层电纺纤维膜及其制备方法和应用。制备过程为：S1.将NIPAM、MBA和KPS混溶，得混溶液1；S2.配置明胶水溶液和十二烷基硫酸钠水溶液，并与混溶液1混合，得混溶液2；S3.将混溶液2加热至60～70℃进行反应，终止反应后，将反应液稀释并透析，然后将透析后的溶液冷冻干燥，得纺丝前体；S4.配制明胶纺丝液，并将纺丝前体配制成纺丝液，然后依次将两种纺丝液纺丝，得双层纤维膜；S5.双层纤维膜经交联反应、甘氨酸处理、清洗后，得到双层电纺纤维膜。所述双层电纺纤维膜可为细胞提供3D培养环境，且细胞能够很好的粘附并进行繁殖，脱附时只需要改变温度即可，脱附过程简单，且对细胞无任何损伤，不影响细胞的活性。

A double layer electrospun fiber membrane for stem cell expansion and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种用于干细胞高效扩增的双层电纺纤维膜及其制备方法和应用
本专利技术涉及干细胞增殖
，更具体地，涉及一种用于干细胞高效扩增的双层电纺纤维膜及其制备方法和应用。
技术介绍
干细胞具有自我更新与多种分化潜能，能够分泌丰富的生长因子和细胞因子通过旁分泌的形式促进血管形成和细胞存活，现在被应用于治疗一些目前临床上难治性疾病，如骨修复、糖尿病、心血管疾病等。因此，干细胞的体外培养技术对于生物医学的发展和疾病的治疗有着十分重要的作用。干细胞在基底材料表面的粘附是通过细胞膜表面的整联蛋白(受体)与吸附在材料表面的粘附蛋白(配体)间的相互作用来完成的。细胞通过粘附在材料上，从而进行增殖、迁移、分化等一系列行为。但是，细胞从基底材料上的有效脱附也是非常重要的过程。传统的细胞脱附的方法主要有胰酶消化法、机械刮刀法和流体剪切力介导的细胞脱附。胰酶消化法主要通过选择性的水解细胞与基底表面和细胞与细胞间的细胞外基质蛋白，使细胞在细胞骨架的张力下变为球形，并从基底表面脱附下来。虽然胰酶消化法能够实现细胞的快速脱附，但是胰酶消化会影响细胞的活性本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于干细胞高效扩增的双层电纺纤维膜，其特征在于，包括如下制备方法制备得到：/nS1.将N-异丙基丙烯酰胺、N,N-亚甲基双丙烯酰胺和引发剂混溶于水中，得到混溶液1，并排除其中的氧气；/nS2.配置明胶水溶液和十二烷基硫酸钠水溶液，并将两种水溶液加入混溶液1中，搅拌混匀，得到混溶液2，并排除其中的氧气；/nS3.将混溶液2加热至60～70℃进行反应，待反应结束后，降温终止反应，然后将反应液加水稀释后进行透析，然后将透析后的溶液冷冻干燥，得到纺丝前体；/nS4.配制明胶纺丝液，并将纺丝前体配制成为纺丝液，然后依次将两种纺丝液进行纺丝，并采用同一接收器，得到双层纤维膜；/nS5.步骤S4得到...

【技术特征摘要】
1.一种用于干细胞高效扩增的双层电纺纤维膜，其特征在于，包括如下制备方法制备得到：
S1.将N-异丙基丙烯酰胺、N,N-亚甲基双丙烯酰胺和引发剂混溶于水中，得到混溶液1，并排除其中的氧气；
S2.配置明胶水溶液和十二烷基硫酸钠水溶液，并将两种水溶液加入混溶液1中，搅拌混匀，得到混溶液2，并排除其中的氧气；
S3.将混溶液2加热至60～70℃进行反应，待反应结束后，降温终止反应，然后将反应液加水稀释后进行透析，然后将透析后的溶液冷冻干燥，得到纺丝前体；
S4.配制明胶纺丝液，并将纺丝前体配制成为纺丝液，然后依次将两种纺丝液进行纺丝，并采用同一接收器，得到双层纤维膜；
S5.步骤S4得到的双层纤维膜与戊二醛乙醇溶液进行交联反应，反应结束后，进行清洗，然后再加入甘氨酸处理，最后清洗后得到双层电纺纤维膜。


2.根据权利要求1所述用于干细胞高效扩增的双层电纺纤维膜，其特征在于，步骤S1中，N-异丙基丙烯酰胺、N,N-亚甲基双丙烯酰胺和引发剂的用量比例为摩尔比为100:4:1。


3.根据权利要求1所述用于干细胞高效扩增的双层电纺纤维膜，其特征在于，步骤S2的混溶液2中，明胶和N-异丙基丙烯酰胺的质量比为1:1。


4.根据权利要求1所述用于干细胞高效扩增的双层电纺纤维膜，其特征在于，步骤S1中，所述引发剂为过硫酸钾；步骤S2中，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：李燕，张浩，宋婷，臧鸿运，刘宇洋，崔振华，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东;44