乳腺特异性表达人Amylin基因载体、转基因动物的构建方法及应用技术

本发明专利技术提供乳腺特异性表达人Amylin基因载体，还提供乳腺特异性表达人Amylin基因转基因动物及其应用。本发明专利技术利用β‑酪蛋白启动子启动人Amylin基因，构建了乳腺特异性表达人Amylin基因载体，并将该载体转入动物基因组中获得乳腺特异性表达人Amylin蛋白的转基因动物，其乳汁特异性表达人Amylin蛋白，且人Amylin基因在动物乳腺中的表达并未对动物的正常生理活动造成不良影响。因此，应用本发明专利技术可望通过转人Amylin小鼠、奶山羊或奶水牛的制备，获得大量廉价的人Amylin蛋白，并分离提纯生产药用人源Amylin，产生巨大的经济效益和社会效益。

Construction and application of mammary gland specific expression vector of human amylin gene and transgenic animal

【技术实现步骤摘要】
乳腺特异性表达人Amylin基因载体、转基因动物的构建方法及应用
本专利技术属于基因工程
，具体涉及乳腺特异性表达人Amylin基因载体、转基因动物的构建方法及应用。
技术介绍
胰淀素(Amylin/IAPP)是胰岛β细胞分泌的一种多肽类激素，由37个氨基酸构成，分子量为3.85KD。它和胰岛素一起表达、合成、分泌，被认为是胰岛素的孪生兄弟，以旁分泌方式负性调节胰岛素的分泌。目前认为，胰淀素作为胰岛第3种重要的活性激素，与胰岛素协同调节体内血糖平衡。正常情况下，胰淀素和胰岛素共同存在于胰岛β细胞中，在生理量的葡萄糖刺激下二者以1:20～100的比例同步分泌，共同维持血糖稳定。HinshawL.等研究表明胰淀素通过抑制胰高血糖素，参与餐后的血糖调控，并且胰淀素在中枢也存在相应的受体，可以刺激中枢产生饱腹感以及延缓胃排空。因此对于糖尿病患者降血糖，尤其是发生胰岛素抵抗的二型糖尿病病患可以使用胰淀素，在降低胰岛素使用量的同时达到更好的降糖效果。目前，对Amylin的有关研究逐渐增多，对Amylin的生物学功能有了更多的认识，这将本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.乳腺特异性表达人Amylin基因载体，其特征在于：所述载体的构建方法为：首先获得人Amylin基因序列，然后将其密码子优化为哺乳动物偏好性密码子，并在其两端加入Xho I酶切位点，利用XhoI酶，酶切pBC1载体，分别构建pBC1-Amylin和pBC1-amylin的双荧光报告载体。/n

【技术特征摘要】
1.乳腺特异性表达人Amylin基因载体，其特征在于：所述载体的构建方法为：首先获得人Amylin基因序列，然后将其密码子优化为哺乳动物偏好性密码子，并在其两端加入XhoI酶切位点，利用XhoI酶，酶切pBC1载体，分别构建pBC1-Amylin和pBC1-amylin的双荧光报告载体。


2.权利要求1所述的乳腺特异性表达人Amylin基因载体在生产乳腺特异性表达人Amylin基因转基因动物中的应用。


3.乳腺特异性表达人Amylin基因转基因动物，其特征在于：将权利要求1所述的载体用SalI酶与NotI酶切回收，通过原核显微注射的方法，在雌雄原核融合期将酶切后的载体注入小鼠的受精卵，将注射后的受精卵移植入同期发情的代孕母鼠的输卵管处，制备乳腺特异性表达人Amylin基因转基因动物。


4.根据权利要求3所述的乳腺特异性表达人Amylin基因转基因动物，其特征在于：所述转基因动物为转基因小鼠、山羊或水牛。


5.根据权利要求4所述的乳腺特异性表...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘庆友，黄孔威，李志鹏，崔奎青，石德顺，刘福航，赵海潞，张晓溪，
申请(专利权)人：广西大学，
类型：发明
国别省市：广西;45