一种将纳米氮化铁复合材料用于DNA提取的方法技术

本发明专利技术涉及DNA提取技术领域，且公开了一种将纳米氮化铁复合材料用于DNA提取的方法，具体步骤如下：步骤一：选取样品组织或者细胞，从载体的体内选取的样品组织或者细胞，然后通过取样针将样品组织或者细胞放入在试管中，再试管的管口封闭并将其放入在冷藏室中；步骤二：样品组织或者细胞裂解；步骤三：样品组织或者细胞离心；步骤四：加入纳米氮化铁复合材料；步骤五：吸入融合；步骤六：分离；步骤七：将获得的DNA放入在储藏室的内部进行封存。该将纳米氮化铁复合材料用于DNA提取的方法，能够保证样品组织或者细胞的裂解、离心和混合的效果，从而保证了提出的DNA纯度等优点。

A method of DNA extraction using nano iron nitride composite

【技术实现步骤摘要】
一种将纳米氮化铁复合材料用于DNA提取的方法
本专利技术涉及DNA提取
，具体为一种将纳米氮化铁复合材料用于DNA提取的方法。
技术介绍
DNA提取是生物技术、基础和临床医学、法医学以及农林学领域的常用实验技术。目前，提取DNA的传统方法，包括苯酚氯仿抽提法和离心柱法，它们的操作复杂，用时长，使用苯酚氯仿抽提时用还到了苯酚、氯仿等毒性试剂，且它们均不利于实现自动化、高通量操作。为了克服这些问题，出现了磁分离方法。磁分离方法是利用磁性微球，在微球的表面修饰上对核酸有吸附作用的特定活性官能基团，利用磁珠的磁性，在外磁场的作用下对DNA进行分离、富集的技术。随着纳米材料科学的发展，磁性微球已经开始被用于核酸的分离纯化，具有高效、快速、无污染、易于操作等优势，展现了广阔的发展前景。目前已经用于DNA提取的纳米磁性材料为铁的氧化物，且氧化铁材料用于DNA分离纯化方面的技术已经趋于成熟。它已经有了比较合适的表面修饰方法以及与DNA大分子偶联的方法。市场上已经有了以Fe3O4作为磁性材料的试剂盒。目前公开的专利和文献中，报道的磁分离法提取DNA所用的磁珠均为铁及铁的氧化物。尚未见将纳米氮化铁用于DNA的提取的报道。而氮化铁的磁性比传统的氧化铁要强，将其用于DNA的提取，与传统磁珠相比，有磁响应性好，分离灵敏、速度快等优势，而且分离同样的DNA，磁珠的用量会更少，更利于相关自动化、高通量仪器的研发。其中专利号为CN106710762B，公开了一种将纳米氮化铁复合材料用于DNA提取的方法，包括以下步骤：<br>1)使用合适的方法裂解样品组织或者细胞，获得裂解液；2)去除裂解液中可能会吸附到所述SiO2基复合磁性微球上的其它物质；3)向裂解液中加入所述SiO2基复合磁性微球和偶联剂，使所述SiO2基复合磁性微球与DNA结合；4)磁分离，将吸附上DNA的所述SiO2基复合磁性微球与裂解液中的其它材料分离；5)将DNA从所述SiO2基复合磁性微球上洗脱，获得DNA。但是上述专利在对样品组织或者细胞进行裂解、离心和混合时，过程较为单一，不能够保证样品组织或者细胞的裂解、离心和混合的效果，从而无法保证提出的DNA纯度。
技术实现思路
(一)解决的技术问题针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种将纳米氮化铁复合材料用于DNA提取的方法，具备能够保证样品组织或者细胞的裂解、离心和混合的效果，从而保证了提出的DNA纯度等优点，解决了目前在对样品组织或者细胞进行裂解、离心和混合时，过程较为单一，不能够保证样品组织或者细胞的裂解、离心和混合的效果，从而无法保证提出的DNA纯度的问题。(二)技术方案为实现上述的目的，本专利技术提供如下技术方案：一种将纳米氮化铁复合材料用于DNA提取的方法，具体步骤如下：步骤一：选取样品组织或者细胞，从载体的体内选取的样品组织或者细胞，然后通过取样针将样品组织或者细胞放入在试管中，再试管的管口封闭并将其放入在冷藏室中；步骤二：样品组织或者细胞裂解，从步骤一中取用一定量的样品组织或者细胞并将其放入在离心管的内部，再向离心管的内部添加一定比例的裂解液，将离心管内部的样品组织或者细胞进行裂解；步骤三：样品组织或者细胞离心，待步骤二中的裂解液体裂解一段时间之后，直接将离心管放置在高速离心机上，高速离心机的工作阶段分为三个过程，第一过程为加速阶段，第二过程为匀速阶段，第三过程为减速阶段，直到离心管内部的样品组织或者细胞出现分层状态为止；步骤四：加入纳米氮化铁复合材料，将步骤三中得到的离心液体从高度离心机上取下，并通过取样针取用外部的纳米氮化铁复合材料，再向离心管内部的离心液体添加纳米氮化铁复合材料；步骤五：吸入融合，加入纳米氮化铁复合材料之后等待一段时间，使得离心液体中的DNA完全吸附在纳米氮化铁复合材料的内部，为了保证DNA与纳米氮化铁复合材料的吸附速度，可以将纳米氮化铁复合材料与样品组织或者细胞进行轻微震荡；步骤六：分离，将步骤五中的液体加入SiO2基复合磁性微球，SiO2基复合磁性微球能够将吸入在纳米氮化铁复合材料内部的DNA与离心液体进行分离，再将SiO2基复合磁性微球进行洗脱，使得SiO2基复合磁性微球上的DNA分离出来，从而获得DNA；步骤七：将获得的DNA放入在储藏室的内部进行封存。优选的，所述步骤一中的载体可为动物或者植物。优选的，所述步骤二中的离心管内的样品组织或者细胞的裂解温度为45-87摄氏度。优选的，所述步骤三中的加速阶段的速度范围为0-45rpm/s，所述匀速阶段的速度为45rpm/s，所述减速阶段的速度范围为45-0rpm/s。优选的，所述步骤三和步骤四之间还存在去除干扰物质的过程，由于步骤三中的离心液体中存在会吸附物质，吸附物质会与纳米氮化铁复合材料吸附融合，避免影响DNA提取的纯度。优选的，所述纳米氮化铁复合材料通过在石墨烯包覆纳米磁性颗粒复合材料的表面包覆有SiO2。优选的，所述步骤六在对SiO2基复合磁性微球进行洗脱时，采用纯度较高的洗脱液体。优选的，所述步骤七中的储藏室内部的温度-20℃。(三)有益效果与现有技术相比，本专利技术提供了一种将纳米氮化铁复合材料用于DNA提取的方法，具备以下有益效果：该将纳米氮化铁复合材料用于DNA提取的方法，通过步骤一：选取样品组织或者细胞；步骤二：样品组织或者细胞裂解；步骤三：样品组织或者细胞离心；步骤四：加入纳米氮化铁复合材料；步骤五：吸入融合；步骤六：分离；步骤七：将获得的DNA放入在储藏室的内部进行封存，且步骤一：选取样品组织或者细胞；步骤二：样品组织或者细胞裂解；步骤三：样品组织或者细胞离心中增加了对样品组织或者细胞的处理过程，从而保证了样品组织或者细胞的裂解、离心和混合的效果。具体实施方式本专利技术公开了一种将纳米氮化铁复合材料用于DNA提取的方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。需要特别指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的提取方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的提取方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。下面结合实施例，进一步阐述本专利技术。一种将纳米氮化铁复合材料用于DNA提取的方法，具体步骤如下：步骤一：选取样品组织或者细胞，从载体的体内选取的样品组织或者细胞，然后通过取样针将样品组织或者细胞放入在试管中，再试管的管口封闭并将其放入在冷藏室中；步骤二：样品组织或者细胞裂解，从步骤一中取用一定量的样品组织或者细胞并将其放入在离心管的内部，再向离心管的内部添加一定比例的裂解液，将离心管内部的样品组织或者细胞进行裂解；步骤三：样品组织或者细胞离心本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种将纳米氮化铁复合材料用于DNA提取的方法，其特征在于，具体步骤如下：/n步骤一：选取样品组织或者细胞，从载体的体内选取的样品组织或者细胞，然后通过取样针将样品组织或者细胞放入在试管中，再试管的管口封闭并将其放入在冷藏室中；/n步骤二：样品组织或者细胞裂解，从步骤一中取用一定量的样品组织或者细胞并将其放入在离心管的内部，再向离心管的内部添加一定比例的裂解液，将离心管内部的样品组织或者细胞进行裂解；/n步骤三：样品组织或者细胞离心，待步骤二中的裂解液体裂解一段时间之后，直接将离心管放置在高速离心机上，高速离心机的工作阶段分为三个过程，第一过程为加速阶段，第二过程为匀速阶段，第三过程为减速阶段，直到离心管内部的样品组织或者细胞出现分层状态为止；/n步骤四：加入纳米氮化铁复合材料，将步骤三中得到的离心液体从高度离心机上取下，并通过取样针取用外部的纳米氮化铁复合材料，再向离心管内部的离心液体添加纳米氮化铁复合材料；/n步骤五：吸入融合，加入纳米氮化铁复合材料之后等待一段时间，使得离心液体中的DNA完全吸附在纳米氮化铁复合材料的内部，为了保证DNA与纳米氮化铁复合材料的吸附速度，可以将纳米氮化铁复合材料与样品组织或者细胞进行轻微震荡；/n步骤六：分离，将步骤五中的液体加入SiO2基复合磁性微球，SiO2基复合磁性微球能够将吸入在纳米氮化铁复合材料内部的DNA与离心液体进行分离，再将SiO2基复合磁性微球进行洗脱，使得SiO2基复合磁性微球上的DNA分离出来，从而获得DNA；/n步骤七：将获得的DNA放入在储藏室的内部进行封存。/n...

【技术特征摘要】
1.一种将纳米氮化铁复合材料用于DNA提取的方法，其特征在于，具体步骤如下：
步骤一：选取样品组织或者细胞，从载体的体内选取的样品组织或者细胞，然后通过取样针将样品组织或者细胞放入在试管中，再试管的管口封闭并将其放入在冷藏室中；
步骤二：样品组织或者细胞裂解，从步骤一中取用一定量的样品组织或者细胞并将其放入在离心管的内部，再向离心管的内部添加一定比例的裂解液，将离心管内部的样品组织或者细胞进行裂解；
步骤三：样品组织或者细胞离心，待步骤二中的裂解液体裂解一段时间之后，直接将离心管放置在高速离心机上，高速离心机的工作阶段分为三个过程，第一过程为加速阶段，第二过程为匀速阶段，第三过程为减速阶段，直到离心管内部的样品组织或者细胞出现分层状态为止；
步骤四：加入纳米氮化铁复合材料，将步骤三中得到的离心液体从高度离心机上取下，并通过取样针取用外部的纳米氮化铁复合材料，再向离心管内部的离心液体添加纳米氮化铁复合材料；
步骤五：吸入融合，加入纳米氮化铁复合材料之后等待一段时间，使得离心液体中的DNA完全吸附在纳米氮化铁复合材料的内部，为了保证DNA与纳米氮化铁复合材料的吸附速度，可以将纳米氮化铁复合材料与样品组织或者细胞进行轻微震荡；
步骤六：分离，将步骤五中的液体加入SiO2基复合磁性微球，SiO2基复合磁性微球能够将吸入在纳米氮化铁复合材料内部的DNA与离心液体进行分离，再将SiO2基复合磁性微球进行洗脱，使得SiO2基复合磁性微球上的DNA分离出来，从而获得DNA；
步骤七：将获得的DNA放入在...

【专利技术属性】
技术研发人员：何卫，
申请(专利权)人：徐州宏武纳米科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32