一种高纯免疫球蛋白G的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种高纯免疫球蛋白G的制备方法，使用盐析结合层析方法从动物血清中分离免疫球蛋白G，并采用改进的紫外光辐照灭活方法进行病毒灭活。

Preparation of high purity immunoglobulin G

【技术实现步骤摘要】
一种高纯免疫球蛋白G的制备方法
本专利技术属于蛋白领域和生物制品领域，具体地，本专利技术提供了一种高纯免疫球蛋白G的制备方法，使用盐析结合层析方法从动物血清中分离免疫球蛋白G，并采用改进的紫外光辐照灭活方法进行病毒灭活。
技术介绍
免疫球蛋白是血浆中除白蛋白外含量最丰富的血浆蛋白质，约占血浆蛋白总量的12％～15％。哺乳动物的免疫球蛋白在基因序列、氨基酸组成以及蛋白质结构上存在较高的相似性，它们的生理功能和生理作用基本一致：免疫球蛋白分子的基本单位都是由四条肽链构成的对称结构，包括两条相同的重链和两条相同的轻链，其中，轻链又分为κ和λ两种结构类型；其主要生理功能和作用是通过特异性结合相应抗原、活化补体以及结合Fc受体产生抗体依赖的细胞介导细胞毒作用和调理吞噬作用，阻断或消除各种病原体对机体的致病作用，并通过抗体补充和免疫调节作用对多种疾病起到治疗作用。血浆免疫球蛋白可分为五种类型，其中免疫球蛋白G(IgG)占免疫球蛋白总量的约70％～80％，是最重要的一类免疫球蛋白，临床使用的免疫球蛋白制品中主要是IgG，IgG输注是一种被动免疫疗法，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高纯免疫球蛋白G的制备方法，其特征在于，以动物血清为原料，使用包括盐析和层析分离步骤制备。/n

【技术特征摘要】
1.一种高纯免疫球蛋白G的制备方法，其特征在于，以动物血清为原料，使用包括盐析和层析分离步骤制备。


2.根据权利要求1的高纯免疫球蛋白G的制备方法，其中动物血清为马血清或犬血清。


3.根据权利要求1或2的高纯免疫球蛋白G的制备方法，包括：
(1)将原料血清用生理盐水稀释至蛋白质浓度≤40mg/mL；
(2)室温下加入饱和硫酸铵溶液至饱和度达到30％，离心或过滤去除杂蛋白沉淀物；
(3)收集离心上清液或过滤液，继续加入饱和硫酸铵溶液至饱和度达到50％，离心或过滤收集免疫球蛋白沉淀；
(4)免疫球蛋白沉淀用原料血清1-2倍的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液溶解，经板框压滤去除不溶性杂质，进一步获得含有精纯免疫球蛋白G的澄清溶液，并调整蛋白质含量为5-10mg/mL；
(5)病毒灭活；
(6)离子交换层析获得高纯免疫球蛋白G溶液。


4.根据权利要求3的高纯免疫球蛋白G的制备方法，其中步骤(1)中生理盐水加入量为血清体积的0.3-2倍；步骤(2)中将稀释后的血清置于烧杯中，开启搅拌，控制搅拌速度20～60rpm，按比例缓慢加入预制的饱和硫酸铵溶液，至饱和度达到30％，并控制反应温度小于16℃，饱和硫酸铵溶液加完后继续搅拌1h，停机静置1～3h，使沉淀反应充分，沉淀反应完成后离心分离或压滤分离进行固液分离，收集上清液并弃去沉淀的杂蛋白；将步骤(2)中分离获得的上清液置于烧杯中，开启搅拌，控制搅拌速度20～60...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕茂民，武岳，孙珍珠，朱凤宣，梁梦雅，董秋瑛，屈洒洒，方迟，张梦君，李庆保，
申请(专利权)人：中科世生北京医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11