【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】生物相容性调整细胞培养基组合物及其用途相关申请的交叉引用本申请要求2017年3月31日提交的美国临时申请号62/479,733的权益;所述申请的全部内容通过此引用以其整体并入本文。专利
本专利技术的领域是细胞培养、牙周和骨应用以及医学生物技术,特别是生物相容性组合物,其包含注入有培养细胞产生的调整细胞培养基的聚合物基质。包括任何种类的细胞(例如成纤维细胞和成骨细胞)的培养细胞,在细胞培养基中体外生长,且在培养过程中,培养细胞合成并分泌药剂到细胞培养基中。收集含有药剂的细胞培养基,并将其与聚合物基质结合以生成生物相容性组合物和药物制剂。该组合物和制剂可用于再生过程,包括但不限于,再生骨、牙龈或组织;促进骨生长;更新皮肤细胞和组织;刺激伤口愈合;和治疗牙科相关的疾病、紊乱和病症,例如牙周病和牙龈病。专利技术背景牙周病,范围从牙龈炎到更严重形式的牙周炎,仍然是一个重要的健康问题,并且是美国和全世界成人牙齿脱落的主要原因(E.Reich等人(1993)Comm.Dent.OralEpidem.21:379;J.Angelillo等人(1996)Comm.Dent.OralEpidem.24:336;H.Murray等人(1997)Int.Dent.J.47:3-8;R.COliver等人(1998)J.Periodontol.69:269-278;G.Ong(1998)Int.DentalJ.48:233-238;I.Haddad等人(1999)DentalJ.49:343-346;E.F.Cor ...
【技术保护点】
1.一种生物相容性组合物,其包含:/n(a) 生物相容性聚合物基质;和/n(b) 调整细胞培养基,包括i) 细胞培养基和ii) 由在细胞培养基中培养的一种或多种细胞合成和分泌的一种或多种药剂。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170331 US 62/4797331.一种生物相容性组合物,其包含:
(a)生物相容性聚合物基质;和
(b)调整细胞培养基,包括i)细胞培养基和ii)由在细胞培养基中培养的一种或多种细胞合成和分泌的一种或多种药剂。
2.权利要求1的组合物,其中细胞是成纤维细胞。
3.权利要求2的组合物,其中成纤维细胞是真皮成纤维细胞。
4.权利要求3的组合物,其中真皮成纤维细胞为新生儿真皮成纤维细胞。
5.权利要求1的组合物,其中细胞是成骨细胞。
6.权利要求1-5中任一项的组合物,其中细胞是成纤维细胞和成骨细胞。
7.权利要求1-6中任一项的组合物,其中细胞是成纤维细胞和成骨细胞的共同培养物。
8.权利要求1-7中任一项的组合物,其中细胞是活跃增殖的细胞。
9.权利要求1-8中任一项的组合物,其中细胞培养基包含基础细胞培养基,并且还包含一种或多种选自胎牛血清(FBS)、L-谷氨酰胺、人表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和抗坏血酸的补充剂。
10.权利要求9的组合物,其中基础细胞培养基是Dulbecco改良eagle培养基(DMEM)。
11.权利要求9或10的组合物,其中补充剂是重组生长因子。
12.权利要求11的组合物,其中重组生长因子是人重组生长因子。
13.权利要求1-12中任一项的组合物,其中一种或多种药剂包括生长因子。
14.权利要求1-13中任一项的组合物,其中一种或多种药剂选自血小板衍生生长因子(PDGF)、表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、角质形成细胞生长因子(KGF)、转化生长因子α(TGFα)、转化生长因子β(TGFβ)、转化生长因子β-1(TGFβl)、转化生长因子β-2(TGFβ2)、胰岛素样生长因子(IGF)、神经生长因子(NGF)、肝细胞生长因子(HGF)、胰岛素、氢化可的松、尿抑胃素、血小板源性伤口愈合因子(PDWHF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、血小板因子IV(PFIV)、肿瘤坏死因子(TNF)、粒细胞集落刺激因子(GCSF)、集落刺激因子(CSF)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨钙蛋白、骨桥蛋白、白介素-1、白介素-6、白介素-8(IL-8)、白介素-11,和生长分化因子(GDF),或其组合。
15.权利要求1-14中任一项的组合物,其中,由在细胞培养基中培养的一种或多种细胞合成和分泌的一种或多种药剂以选自以下的浓度存在于调整培养基中:与培养前细胞培养基中的浓度相比,增加到约至少2倍、约2倍、约3倍、约4倍、约5倍、约6倍、约7倍、约8倍、约9倍、约10倍、约11倍、约12倍、约13倍、约14倍、约15倍、约16倍、约17倍、约18倍、约19倍、约20倍、约25倍、约30倍、约40倍、约50倍、约60倍、约70倍、约80倍、约90倍,和约100倍。
16.权利要求1-15中任一项的组合物,其中细胞在细胞培养基中培养至少24小时,任选至少48小时或至少72小时。
17.权利要求1-16中任一项的组合物,其中生物相容性组合物不包含细胞。
18.权利要求1-17中任一项的组合物,其中调整细胞培养基被浓缩,任选其中调整细胞培养基通过切向流过滤来浓缩。
19.权利要求1-18中任一项的组合物,其中聚合物基质为琼脂糖。
20.权利要求19的组合物,其中琼脂糖是从海草衍生的。
21.权利要求19或20的组合物,其中琼脂糖是低熔点琼脂糖或超低熔点琼脂糖。
22.权利要求19-21中任一项的组合物,其中琼脂糖选自约0.8%-3.0%重量:体积(w:v)、约0.9%w:v、约1.0%w:v、约1.1%w:v、约1.2%w:v、约1.3%w:v、约1.4%w:v、约1.5%w:v、约1.6%w:v、约1.7%w:v、约1.8%w:v、约1.9%w:v、约2.0%w:v、约2.1%w:v、约2.2%w:v、约2.3%w:v、约2.4%w:v、约2.5%w:v、约2.6%w:v、约2.7%w:v、约2.8%w:v、约2.9%w:v和约3.0%w:v。
23.权利要求1-22中任一项的组合物,其中调整细胞培养基是生物相容性组合物体积的约50%。
24.一种生产生物相容性组合物的方法,其包括:
(a)在细胞培养基中培养细胞;
(b)将培养细胞与用由细胞培养基中的细胞合成和分泌的一种或多种药剂调整的细胞培养基分离,以产生调整细胞培养基;和
(c)使调整细胞培养基与生物相容性聚合物基质混合。
25.权利要求24的方法,其中细胞是成纤维细胞。
26.权利要求25的方法,其中成纤维细胞是真皮成纤维细胞。
27.权利要求26的方法,其中真皮成纤维细胞为新生儿真皮成纤维细胞。
28.权利要求25的方法,其中细胞是成骨细胞。
29.权利要求24-28中任一项的方法,其中细胞是成纤维细胞和成骨细胞。
30.权利要求24-29中任一项的方法,其中细胞是成纤维细胞和成骨细胞的共同培养物。
31.权利要求24-30中任一项的方法,其中细胞是活跃增殖的细胞。
32.权利要求24-31中任一项的方法,其中细胞培养基包含基础细胞培养基,并且还包含一种或多种选自胎牛血清(FBS)、L-谷氨酰胺、人表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和抗坏血酸的补充剂...
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