一种密码子优化的葡萄糖氧化酶基因及其应用制造技术

技术编号:23360829 阅读:57 留言:0更新日期:2020-02-18 16:13
本发明专利技术提供了一种密码子优化的葡萄糖氧化酶基因,所述基因来源于AspergillusnigerAn76,其序列如SEQ ID No.2所示。该原始的葡萄糖氧化酶基因在毕赤酵母中无法成功表达,经过序列优化,其能够在毕赤酵母中顺利表达,并且,经过分离、纯化,能够得到纯化的目的蛋白,该重组葡萄糖氧化酶可以用于葡萄糖生物传感器中。

A codon optimized glucose oxidase gene and its application

【技术实现步骤摘要】
一种密码子优化的葡萄糖氧化酶基因及其应用
本专利技术涉及生物酶基因工程和生物传感
,具体涉及一种密码子优化的葡萄糖氧化酶基因及其在制备生物传感元件中的应用。
技术介绍
目前,我国生物发酵产品总量居世界第一位,其中葡萄糖是发酵产品重要的质量控制指标,快速、准确检测发酵产品中的葡萄糖含量对于保证发酵产品质量具有重要意义。发酵产品中葡萄糖的传统检测方法主要包括高效液相色谱(HPLC)、气相色谱(GC)、旋光以及薄层色谱法,但是这些检测方法面临分析成本高、操作繁琐等各种问题。而生物传感器法具有灵敏度高、重现性好、操作简单的特点而受到广泛青睐。葡萄糖氧化酶(Glucoseoxidase(GOD))是葡萄糖生物传感器中主要的检测敏感元件,GOD是一种黄素蛋白,以氧气为电子受体催化β-D-葡萄糖氧化为D-葡萄糖酸-δ-内酯和H2O2,目前我国GOD主要分离纯化自黑曲霉或青霉,这种来源的酶产量很低而且纯化过程繁琐,这就导致生产的葡萄糖氧化酶远远不能满足应用需求,大部分商品化酶的来源依赖Sigma等国外公司,作为酶电极的“微芯片”,长期依赖进口,容本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种密码子优化的葡萄糖氧化酶基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列如SEQID No.2所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种密码子优化的葡萄糖氧化酶基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示。


2.包含权利要求1所述基因的重组载体。


3.根据权利要求2所述的重组载体,其特征在于,所述载体骨架来源于可以在毕赤酵母中表达的载体。


4.根据权利要求3所述的重组载体,其特征在于,所述载体骨架为pPIC9K载体。


5.包含权利要求2-4任一所述重组载体的重组菌株。


6.根据权利要求5所述的重组菌株,其特征在于,所述菌株包括大肠杆菌或毕赤酵母;优选的,所述大肠杆菌为大肠杆菌DH5α;优选的,所述毕赤酵母为毕赤酵母GS115。

【专利技术属性】
技术研发人员:公维丽马耀宏史建国韩庆晔王丙莲刘庆艾郑岚杨俊慧蔡雷
申请(专利权)人:山东省科学院生物研究所
类型:发明
国别省市:山东;37

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