长链脂肪酸辅酶A连接酶1在诊断或预测子痫前期中的应用制造技术

本发明专利技术公开了长链脂肪酸辅酶A连接酶1的标记试剂在制备用于诊断孕妇是否患有子痫前期或者用于预测孕妇是否具有患子痫前期的风险的试剂盒中的应用，属于生物医学领域。本发明专利技术还公开了用于诊断孕妇是否患有子痫前期或者用于预测孕妇是否具有患子痫前期的风险的试剂盒，包括长链脂肪酸辅酶A连接酶1的标记试剂。本发明专利技术为妊娠期高血压疾病子痫前期的诊断和预警提供了一个新的生物标记物，具有重要的临床价值。

The application of long chain fatty acid CoA ligase 1 in the diagnosis or prediction of preeclampsia

【技术实现步骤摘要】
长链脂肪酸辅酶A连接酶1在诊断或预测子痫前期中的应用
本专利技术属于生物医学领域，具体地，涉及长链脂肪酸辅酶A连接酶1在诊断或预测子痫前期中的应用。
技术介绍
子痫前期（preeclampsia,PE）作为是妊娠期高血压疾病的重要亚型，占妊娠期高血压疾病的一半以上，是全球导致孕产妇死亡的主要原因之一。PE的病因和发病机制至今仍未完全阐明，目前的研究表明PE是一种多种因素、多种机制共同作用的胎盘源性疾病，并与心血管疾病（cardiovasculardisease,CVD）具有相似的病理生理机制，如都存在氧化应激、血管内皮损伤、胰岛素抵抗、脂代谢紊乱等。PE不但导致妊娠的不良事件，威胁母儿的生命，也是母子两代远期患CVD疾病的风险因素，多个研究及荟萃分析均表明，PE女性远期患心肌梗死、脑卒中等CVD疾病风险高达数倍，且CVD发病率与PE严重程度呈正相关，其子代的高血压、CVD和代谢疾病的风险也明显增加。PE诊断标准为妊娠20周后出现收缩压≥140mmHg和（或）舒张压≥90mmHg，且伴有下列任一项：尿蛋白≥0.3g/24h，或尿蛋白/肌酐比值≥0.3，或随机尿蛋白≥（+）（无法进行尿蛋白定量时的检查方法）；无蛋白尿但伴有任何一种器官或系统受累：心、肺、肝、肾等重要器官，或血液系统、消化系统、神经系统的异常改变，胎盘-胎儿受到累及等。从上述诊断标准可以看出PE明确诊断需要妊娠20周以后，并且诊断后进行治疗的措施有效。《妊娠期高血压疾病：国际妊娠期高血压研究学会分类、诊断和管理指南（2018）》及《中国妊娠期高血压疾病诊治指南（2015）》指出PE的主要治疗是预防抽搐，有指征地降压、利尿、镇静，密切监测母胎情况，预防和治疗严重并发症，适时终止妊娠。目前PE患者带来全球孕产妇的死亡率和围产期不良事件居高不下的情况下，PE唯一有效的治疗途径就是终止妊娠，娩出胎盘，而过早的终止妊娠又可带来早产儿及产妇的不良结局，加重家庭和社会的负担。因此若能提前预测PE，早期给予干预，就可能减少PE的发生，减少妊娠不良结局，并减少孕期CVD风险暴露。为了这一目标，目前已有大量的PE预测研究和验证工作，主要以查找新的血清生物标志物和建立预测模型进行早期预测，然而迄今为止，妊娠早中期尚缺乏能够可靠预测全部子痫前期的方法。即使出现的少数具有潜力的标志物（如sFlt-1/PlGF比值），也只是在孕晚期延长期待治疗方面有价值，不能用于预测PE发生；有些标志物预测效能不明显或是不稳定，无法应用于临床。有研究应用母体危险因素、血压、PlGF和子宫动脉多普勒组合可能预测早产型子痫前期（＜37周），但其有效性存在较高的假阳性或假阴性结果。所以，寻找敏感的子痫前期生物标记物，对于早期预警和诊断妊娠期高血压疾病子痫前期非常重要。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术的目的是提供一种子痫前期生物标记物。为此，专利技术人进行了大量的探索，出乎意料地发现长链脂肪酸辅酶A连接酶1（Long-chain-fatty-acid--CoAligase1，ACSL1）与子痫前期显著相关，并进一步得到了验证，从而完成本专利技术。本专利技术一方面提供长链脂肪酸辅酶A连接酶1的标记试剂在制备用于诊断孕妇是否患有子痫前期或者用于预测孕妇是否具有患子痫前期的风险的试剂盒中的应用。ACSL1是长链脂肪酸辅酶A连接酶家族的同工酶。虽然底物特异性、亚细胞定位和组织分布不同，但该家族的所有同工酶都将游离长链脂肪酸转化为脂肪酸酰基辅酶a酯，从而在脂质生物合成和脂肪酸降解中发挥关键作用。进一步地，所述标记试剂为抗体。在本专利技术的一个具体实施方案中，所述抗体为兔抗ACSL1抗体。本专利技术的第二方面提供一种用于诊断孕妇是否患有子痫前期或者用于预测孕妇是否具有患子痫前期的风险的试剂盒，包括长链脂肪酸辅酶A连接酶1的标记试剂。进一步地，所述标记试剂为抗体。在本专利技术的一个具体实施方案中，所述抗体为兔抗ACSL1抗体。在本专利技术的一些实施方案中，所述试剂盒通过检测来自所述孕妇样本中长链脂肪酸辅酶A连接酶1的表达量是否超过阈值来完成诊断或预测，如果所述样本中长链脂肪酸辅酶A连接酶1的表达量超过阈值，则所述孕妇患有子痫前期或者具有患子痫前期的风险。在本专利技术的一些具体实施方案中，所述阈值为具有医学统计意义数量的正常孕妇样本中长链脂肪酸辅酶A连接酶1表达量的95%置信区间的上限值。在本专利技术的另一些具体实施方案中，所述阈值为具有医学统计意义数量的患有子痫前期的孕妇样本中长链脂肪酸辅酶A连接酶1表达量的95%置信区间的下限值。进一步地，所述试剂盒进一步包括阳性对照品和阴性对照品。在本专利技术的一些实施方案中，所述阳性对照品为诊断为子痫前期的孕妇样本。在本专利技术中，所述孕妇样本为血清样本和/或胎盘样本。妊娠期高血压疾病子痫前期早期预警与诊断标志物必须具备特异性好、敏感性高、重现性好和患者依从性好等特点。实验证明，ACSL1可作为妊娠期高血压疾病子痫前期早期预警及诊断标志物。本专利技术的有益效果相对于现有技术，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术为妊娠期高血压疾病子痫前期的诊断和预警提供了一个新的生物标记物，具有重要的临床价值。利用质谱结果，证实妊娠期高血压疾病子痫前期患者血清样本中ACSL1表达水平显著高于正常妊娠组患者。妊娠期高血压疾病子痫前期患者胎盘组织中ACLS1的相对水平极显著的高于正常妊娠胎盘组织中ACSL1的性对水平（p<0.0001），灵敏度为91.13%、特异性为93.67%。妊娠期高血压疾病子痫前期患者血清中ACLS1的相对水平极显著的高于正常妊娠患者血清中ACSL1的性对水平（p<0.0001）。ACSL1可用于预警性筛查妊娠期高血压疾病子痫前期患者，且结果准确，操作简便，具有较大的推广应用价值。附图说明图1示出了实施例1中质谱检测结果。图2示出了实施例1中的蛋白组学信号通路检测结果。图3示出了实施例2中免疫组织化学的结果。图4示出了实施例2中的光密度值分析结果。图5示出了实施例3中的ACSL1作为受试者工作特征曲线(receiveroperatingcharacteristiccurve，ROC曲线)，1代表正常人、2子痫前期产妇患者。具体实施方式为了使本专利技术所解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。实施例以下例子在此用于示范本专利技术的优选实施方案。本领域内的技术人员会明白，下述例子中披露的技术代表专利技术人发现的可以用于实施本专利技术的技术，因此可以视为实施本专利技术的优选方案。但是本领域内的技术人员根据本说明书应该明白，这里所公开的特定实施例可以做很多修改，仍然能得到相同的或者类似的结果，而非背离本专利技术的精神或范围。除非另有定义，所有在此使用的技术和科学的术语，和本专利技术所属领域内的技术人员所通常理解的意思相同，在此公开引用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.长链脂肪酸辅酶A连接酶1的标记试剂在制备用于诊断孕妇是否患有子痫前期或者用于预测孕妇是否具有患子痫前期的风险的试剂盒中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.长链脂肪酸辅酶A连接酶1的标记试剂在制备用于诊断孕妇是否患有子痫前期或者用于预测孕妇是否具有患子痫前期的风险的试剂盒中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述标记试剂为抗体。


3.一种用于诊断孕妇是否患有子痫前期或者用于预测孕妇是否具有患子痫前期的风险的试剂盒，其特征在于，包括长链脂肪酸辅酶A连接酶1的标记试剂。


4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述标记试剂为抗体。


5.根据权利要求3或4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒通过检测来自所述孕妇样本中长链脂肪酸辅酶A连接酶1的表达量是否超过阈值来完成诊断或预测，如果所述样本中长链脂肪酸辅酶A连接酶1的表达量超过阈值，则所述孕妇患有子痫...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡伟，徐忠伟，牛秀珑，陈少伯，李玉明，
申请(专利权)人：中国人民武装警察部队特色医学中心，
类型：发明
国别省市：天津;12