同时检测血液中喹硫平和N-脱烷基喹硫平含量的方法技术

本发明专利技术提供了同时检测血液中喹硫平和N‑脱烷基喹硫平含量的方法。配制至少三个含已知浓度的喹硫平标准品和N‑脱烷基喹硫平标准品的标准工作液；将标准工作液、内标工作液和空白血液样本混合，进行样本前处理得到标准溶液；利用高效液相色谱仪分别检测各个标准溶液，得到各个标准溶液的色谱图；根据各个标准溶液的色谱图，拟合得到标准曲线方程；将内标工作液和经处理待检测血液而得到的血液样本混合，进行同样的样本前处理得到待测样本；同样检测待测样本得到其色谱图；根据待测样本的色谱图和各个标准曲线方程，计算血液样本中喹硫平和N‑脱烷基喹硫平的含量。本发明专利技术能够同时检测血液中喹硫平和N‑脱烷基喹硫平的含量。

Simultaneous determination of quetiapine and n-dealkylquetiapine in blood

【技术实现步骤摘要】
同时检测血液中喹硫平和N-脱烷基喹硫平含量的方法
本专利技术涉及临床化学
，特别涉及同时检测血液中喹硫平和N-脱烷基喹硫平含量的方法。
技术介绍
精神分裂症是由一组症状群所组成的临床综合征，是多因素的疾病。尽管目前对其病因的认识尚不很明确，但个体心理的易感素质和外部社会环境的不良因素对疾病的发生发展的作用，已被大家所共识。无论是易感素质还是外部不良因素，都可能通过内在生物学因素共同作用而导致疾病的发生，不同患者其发病的因素可能以某一方面较为重要。喹硫平是一种新型的吩噻嗪类抗精神病药，可阻滞中枢多巴胺(Dopamine)的D1、D2受体和5-羟色胺受体(hydroxytryptamine，5-HT)5-HT2、5-HT1等多种受体而起作用，临床上对双相情感障碍和重度抑郁症(MDD)均有效，是一种被广泛用于治疗精神分裂症的一线非典型抗精神病药物和二线抗抑郁药。但该药对α1-肾上腺素受体同样有高亲和力，有阻断α1-肾上腺素受体作用，可能出现直立性低血压、头晕等副作用，需要做好患者监护。目前已有测定血液中喹硫平含量的方法。由于其代谢物同样具有药理活性，同样会影响治疗效果，故检测其活性代谢物很有必要。因此，有必要提出能够同时检测血液中喹硫平及其代谢物N-脱烷基喹硫平含量的方法。
技术实现思路
本专利技术提供了同时检测血液中喹硫平和N-脱烷基喹硫平含量的方法，能够同时检测血液中喹硫平和N-脱烷基喹硫平的含量。为了达到上述目的，本专利技术是通过如下技术方案实现的：本专利技术提供了同时检测血液中喹硫平和N-脱烷基喹硫平含量的方法，包括：配制至少三个标准工作液，其中，标准工作液中含有浓度已知的喹硫平标准品和N-脱烷基喹硫平标准品，不同标准工作液中同一标准品的浓度不同；将一定量的标准工作液、内标工作液和空白血液样本混合，进行样本前处理，得到标准溶液，其中，内标工作液中含有浓度已知的内标物；利用高效液相色谱仪，在一定检测条件下，分别检测至少三个标准溶液，得到各个标准溶液的色谱图；根据各个标准溶液的色谱图，拟合得到喹硫平的标准曲线方程和N-脱烷基喹硫平的标准曲线方程；将一定量的内标工作液和血液样本混合，进行同样的样本前处理，得到待测样本，其中，血液样本经处理待检测血液而得到；利用高效液相色谱仪，在相同检测条件下检测待测样本，得到待测样本的色谱图；根据待测样本的色谱图和拟合得到的各个标准曲线方程，计算血液样本中喹硫平和N-脱烷基喹硫平的含量；其中，所述进行样本前处理包括：将混合液涡旋混匀，加入碱液，涡旋混匀；加入萃取剂，涡旋混匀，离心得到上清液；移取上清液，吹干后加入复溶液，涡旋混匀，离心得到上清液。优选地，所述碱液包括氢氧化钠溶液。优选地，将混合液在转速为2500-3000rpm下涡旋混匀1-2min；加入0.8-1.2mol/L的氢氧化钠溶液70-130μL，在转速为2500-3000rpm下涡旋混匀1-2min；加入800-1200μL萃取剂，在转速为2500-3000rpm下涡旋混匀4-6min后，再在10000-15000rpm的转速下离心3-7min，得到上清液；移取700-1000μL上清液于离心管中，在常温下用氮气吹干；向上清吹干的离心管中加入130-170μL复溶液，在2500-3000rpm转速下涡旋混匀2-4min后，再在10000-15000rpm的转速下离心4-6min，得到上清液。优选地，所述检测条件包括：WatersXbridgeC18色谱柱，色谱柱的长度为150mm、内径为2.1mm、填料粒径为3.5μm。优选地，所述检测条件包括：柱温为50-60℃，流动相A为含浓度为80-120mmol/L的乙酸铵、体积比为0.15-0.25％的甲酸、体积比为0.15-0.25％的三乙胺的水，流动相B为乙腈，流速为0.2-0.4mL/min，进样量为20-40μL，分析时间为9-10min。优选地，所述检测条件包括：单柱双泵洗脱模式；双泵切换方式为：在6.8min从分析泵切换为清洁泵，在7.8min从清洁泵切换为分析泵；洗脱方式为：流动相A和流动相B的体积比，在6.8-7.8min之外的其他洗脱时间范围内为69-71％：31-29％。优选地，所述高效液相色谱仪中的紫外检测器为DAD-3000检测器，检测波长为315-325nm，采集频率为5Hz，带宽为4nm。优选地，所述高效液相色谱仪所使用的在线过滤器为SSICOLPRE-FILTERWATER1/160.5M。优选地，内标物为吡非尼酮。优选地，所述标准工作液中，喹硫平标准品的浓度为1000-32000ng/mL，N-脱烷基喹硫平标准品的浓度为1000-32000ng/mL，稀释液为甲醇。本专利技术提供了同时检测血液中喹硫平和N-脱烷基喹硫平含量的方法。配制至少三个含已知浓度的喹硫平标准品和N-脱烷基喹硫平标准品的标准工作液；将标准工作液、内标工作液和空白血液样本混合，进行样本前处理得到标准溶液；利用高效液相色谱仪分别检测各个标准溶液，得到各个标准溶液的色谱图；根据各个标准溶液的色谱图，拟合得到标准曲线方程；将内标工作液和经处理待检测血液而得到的血液样本混合，进行同样的样本前处理得到待测样本；同样检测待测样本得到其色谱图；根据待测样本的色谱图和各个标准曲线方程，计算血液样本中喹硫平和N-脱烷基喹硫平的含量。本专利技术能够同时检测血液中喹硫平和N-脱烷基喹硫平的含量。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本专利技术一实施例提供的喹硫平的化学结构式；图2是本专利技术一实施例提供的N-脱烷基喹硫平的化学结构式；图3是本专利技术一实施例提供的样本前处理不包括加碱步骤时的色谱图和样本前处理包括加碱步骤时的色谱图的对比示意图；图4是本专利技术一实施例提供的一种同时检测血液中喹硫平和N-脱烷基喹硫平含量的方法的流程图；图5是本专利技术一实施例提供的一标准溶液中喹硫平标准品、N-脱烷基喹硫平标准品及内标物的色谱图；图6是本专利技术一实施例提供的一待测样本中喹硫平、N-脱烷基喹硫平及内标物的色谱图；图7是本专利技术一实施例提供的喹硫平的线性关系图；图8是本专利技术一实施例提供的N-脱烷基喹硫平的线性关系图。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.同时检测血液中喹硫平和N-脱烷基喹硫平含量的方法，其特征在于，包括：/n配制至少三个标准工作液，其中，标准工作液中含有浓度已知的喹硫平标准品和N-脱烷基喹硫平标准品，不同标准工作液中同一标准品的浓度不同；/n将一定量的标准工作液、内标工作液和空白血液样本混合，进行样本前处理，得到标准溶液，其中，内标工作液中含有浓度已知的内标物；/n利用高效液相色谱仪，在一定检测条件下，分别检测至少三个标准溶液，得到各个标准溶液的色谱图；/n根据各个标准溶液的色谱图，拟合得到喹硫平的标准曲线方程和N-脱烷基喹硫平的标准曲线方程；/n将一定量的内标工作液和血液样本混合，进行同样的样本前处理，得到待测样本，其中，血液样本经处理待检测血液而得到；/n利用高效液相色谱仪，在相同检测条件下检测待测样本，得到待测样本的色谱图；/n根据待测样本的色谱图和拟合得到的各个标准曲线方程，计算血液样本中喹硫平和N-脱烷基喹硫平的含量；/n其中，所述进行样本前处理包括：将混合液涡旋混匀，加入碱液，涡旋混匀；加入萃取剂，涡旋混匀，离心得到上清液；移取上清液，吹干后加入复溶液，涡旋混匀，离心得到上清液。/n

【技术特征摘要】
1.同时检测血液中喹硫平和N-脱烷基喹硫平含量的方法，其特征在于，包括：
配制至少三个标准工作液，其中，标准工作液中含有浓度已知的喹硫平标准品和N-脱烷基喹硫平标准品，不同标准工作液中同一标准品的浓度不同；
将一定量的标准工作液、内标工作液和空白血液样本混合，进行样本前处理，得到标准溶液，其中，内标工作液中含有浓度已知的内标物；
利用高效液相色谱仪，在一定检测条件下，分别检测至少三个标准溶液，得到各个标准溶液的色谱图；
根据各个标准溶液的色谱图，拟合得到喹硫平的标准曲线方程和N-脱烷基喹硫平的标准曲线方程；
将一定量的内标工作液和血液样本混合，进行同样的样本前处理，得到待测样本，其中，血液样本经处理待检测血液而得到；
利用高效液相色谱仪，在相同检测条件下检测待测样本，得到待测样本的色谱图；
根据待测样本的色谱图和拟合得到的各个标准曲线方程，计算血液样本中喹硫平和N-脱烷基喹硫平的含量；
其中，所述进行样本前处理包括：将混合液涡旋混匀，加入碱液，涡旋混匀；加入萃取剂，涡旋混匀，离心得到上清液；移取上清液，吹干后加入复溶液，涡旋混匀，离心得到上清液。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，
所述碱液包括氢氧化钠溶液。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，
将混合液在转速为2500-3000rpm下涡旋混匀1-2min；
加入0.8-1.2mol/L的氢氧化钠溶液70-130μL，在转速为2500-3000rpm下涡旋混匀1-2min；
加入800-1200μL萃取剂，在转速为2500-3000rpm下涡旋混匀4-6min后，再在10000-15000rpm的转速下离心3-7min，得到上清液；
移取700-1000μL上清液于离心管中，在常温下用氮气吹干；
向上清吹干的离心管中加入130-170μL复溶液，在2500-...

【专利技术属性】
技术研发人员：张国成，贾永娟，倪君君，
申请(专利权)人：吉林和合医学检验有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林;22