一种鸡肌肉卫星细胞的分离培养方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种鸡肌肉卫星细胞的分离培养方法。所述鸡肌肉卫星细胞的分离培养方法包括以下步骤：采用SPF鸡，取其肌肉组织，加入含有I型胶原酶与胰酶比例为1－2:1的混合酶溶液，37℃下消化，再经两次30min的差速贴壁纯化后，得到目的细胞。该方法有效解决了现有技术中细胞活率低、分离数量少、可保存性差的缺陷和不足。

Isolation and culture of chicken muscle satellite cells

【技术实现步骤摘要】
一种鸡肌肉卫星细胞的分离培养方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种鸡肌肉卫星细胞的分离培养方法。
技术介绍
国内外常用的静态肌肉卫星细胞的分离纯化往往需要使用昂贵的荧光激活细胞分选仪(FACS)或磁激活细胞分选仪(MACS)，操作复杂且代价较高[1]。而目前应用的简便实验室分离方法一般为组织贴壁法、两步消化法、单酶解法：1.组织贴壁法耗时长，所得细胞数少、活率较低已逐渐淘汰[2]；2.两步消化法常用两种酶分两步消化，耗时长、易污染、细胞活率低、贴壁性差(需提前包被明胶等促贴壁物质)、数量少[3-5]；3.单酶解法常只用胶原酶消化，获得细胞量少，消化不完全，有组织碎片残留，保存性差[6]。并且目前成功分离的细胞以鼠源为主，鸡源的基本没有具有很好分离效果的方法。现有技术中采用的诱导分化手段为采用马血清诱导分化，但马血清价格昂贵、常规试验室一般没有，且分化效果一般。参考文献[1]MOTOHASHIN,ASAKURAY,ASAKURAA.Isolation,culture,andtransplantationofmusclesa本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鸡肌肉卫星细胞的分离培养方法，其特征在于，包括以下步骤：采用SPF鸡，取其肌肉组织，加入含有I型胶原酶与胰酶比例为1－2:1的混合酶溶液，37℃下消化，再经两次30min的差速贴壁纯化后，得到目的细胞。/n

【技术特征摘要】
1.一种鸡肌肉卫星细胞的分离培养方法，其特征在于，包括以下步骤：采用SPF鸡，取其肌肉组织，加入含有I型胶原酶与胰酶比例为1－2:1的混合酶溶液，37℃下消化，再经两次30min的差速贴壁纯化后，得到目的细胞。


2.根据权利要求1所述鸡肌肉卫星细胞的分离培养方法，其特征在于，I型胶原酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴巍，刘学忠，顾建红，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32