一种RAW264．7细胞成破骨细胞的诱导方法技术

本发明专利技术公开了一种RAW264.7细胞成破骨细胞的诱导方法，所述方法包括以下步骤：制备RAW264.7培养基以及成破骨细胞诱导培养基；取RAW264.7细胞，通过0.25%胰酶消化RAW264.7细胞至6孔板内，每孔接种约2X10

【技术实现步骤摘要】
一种RAW264.7细胞成破骨细胞的诱导方法
本专利技术涉及细胞培养
，具体为一种RAW264.7细胞成破骨细胞的诱导方法。
技术介绍
破骨细胞是骨吸收的主要功能细胞，在骨发育、生长、修复、重建中具有重要的作用，破骨细胞起源于血系单核－巨噬细胞系统，是一种特殊的终末分化细胞，它可由其单核前体细胞通过多种方式融合形成巨大的多核细胞，破骨细胞由多核巨细胞组成，直径100μm，含有2-50个紧密堆积的核，主要分布在骨质表面、骨内血管通道周围，由多个单核细胞融合而成的，胞浆嗜碱性但随着细胞的老化，渐变为嗜酸性，破骨细胞有造血调控作用、骨形成调控作用、骨内血管生成调控作用、骨钙素的激素作用，且破骨细胞具有特殊的吸收功能，破骨细胞的分离培养始于20世纪80年代，到2018年7月，破骨细胞的培养方法主要有：骨髓机械分离法，骨髓细胞诱导法，脾干细胞诱导法，血液单核细胞诱导法，小鼠RAW264.7细胞系诱导法及骨巨细胞瘤分离法，但是现有的小鼠RAW264.7细胞系诱导法成功率低，诱导效率不佳，因此有必要对现有技术进行改进，以解决上述问题。专本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种RAW264.7细胞成破骨细胞的诱导方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：/nS1：制备RAW264.7培养基以及成破骨细胞诱导培养基；/nS2：取RAW264.7细胞，通过0.25%胰酶消化RAW264.7细胞至6孔板内，每孔接种约2X10

【技术特征摘要】
1.一种RAW264.7细胞成破骨细胞的诱导方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：
S1：制备RAW264.7培养基以及成破骨细胞诱导培养基；
S2：取RAW264.7细胞，通过0.25%胰酶消化RAW264.7细胞至6孔板内，每孔接种约2X104个细胞，再加入RAW264.7培养基的培养液，每孔添加2ml，通过显微镜观察细胞的生长状况，细胞融合度20%左右为最佳诱导密度；
S3：移除旧的RAW264.7培养基，更换为成破骨细胞诱导培养基，每孔添加2ml，培养箱内培养；
S4：48h后更换成破骨细胞诱导培养基，96h时第二次更换成破骨细胞诱导培养基，120h时第三次换液，144h时诱导完成。


2.根据权利要求1所述的一种RAW264.7细胞成破骨细胞的诱导方法，其特征在于：所述S2中0.25%胰酶添加前通过培养箱加温到37℃。


3.根据权利要求1所述的一种RAW264.7细胞成破骨细胞的诱导方法，其特征在于：所述S2中0.25%胰酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：范振峰，唐梅，李慧，贺永胜，
申请(专利权)人：云南洛宇生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：云南;53