【技术实现步骤摘要】
体外诱导人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞的方法
本专利技术涉及生物
,具体地说,涉及一种体外诱导人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞的方法。
技术介绍
目前,脂肪细胞体外诱导分化方法基本一致,都是将原代小鼠胚胎成纤维细胞诱导分化成脂肪细胞的方案。该方案是目前较为成熟的脂肪细胞诱导分化方案,被广泛应用于脂肪代谢及脂肪细胞诱导分化等研究中。该方案中的细胞来源是原代小鼠胚胎成纤维细胞(MEF),取材相对繁琐,组织来源受限;另外,该方案不能将人皮肤成纤维细胞诱导分化成脂肪细胞,因此不能应用于临床上的皮肤创伤修复和疤痕修复等。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种体外诱导人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞的方法。为了实现本专利技术目的,第一方面,本专利技术提供一种体外诱导人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞的方法,包括以下步骤:A、将人皮肤成纤维细胞于基础培养基中进行体外培养并传代,待细胞汇合度达80-100%时,进行诱导分化;B、将步骤A的基础培养基换成诱导分化培养基①,培养6-10天,每两天换液 ...
【技术保护点】
1.体外诱导人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:/nA、将人皮肤成纤维细胞于基础培养基中进行体外培养并传代,待细胞汇合度达80-100%时,进行诱导分化;/nB、将步骤A的基础培养基换成诱导分化培养基①,培养6-10天,每两天换液一次;然后,将诱导分化培养基①换成诱导分化培养基②,培养2-4天;最后,将诱导分化培养基②换成基础培养基,培养8-14天,每两天换液一次;/n其中,所述基础培养基为含10-20%胎牛血清、100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素的高糖DMEM培养基;/n所述诱导分化培养基①选自如下a~c中的任一种:/na.含0.5- ...
【技术特征摘要】
1.体外诱导人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:
A、将人皮肤成纤维细胞于基础培养基中进行体外培养并传代,待细胞汇合度达80-100%时,进行诱导分化;
B、将步骤A的基础培养基换成诱导分化培养基①,培养6-10天,每两天换液一次;然后,将诱导分化培养基①换成诱导分化培养基②,培养2-4天;最后,将诱导分化培养基②换成基础培养基,培养8-14天,每两天换液一次;
其中,所述基础培养基为含10-20%胎牛血清、100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素的高糖DMEM培养基;
所述诱导分化培养基①选自如下a~c中的任一种:
a.含0.5-1μM地塞米松、10-20μg/mL胰岛素、1-2μM罗格列酮和0.2-0.5mM1-甲基-3-异丁基黄嘌呤的基础培养基;
b.含0.5-1μM地塞米松、10-20μg/mL胰岛素和1-2μM罗格列酮的基础培养基;
c.含0.5-1μM地塞米松、10-20μg/mL胰岛素和0.2-0.5mM1-甲基-3-异丁基黄嘌呤的基础培养基;
所述诱导分化培养基②为含10-20μg/mL胰岛素的基础培养基。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述诱导分化培养基①为含1μM地塞米松、20μg/mL胰岛素、2μM罗格列酮和0.5mM1-甲基...
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