一种包载凋亡基因的PCADK复合微球的制备方法技术

本发明专利技术属于一种包载凋亡基因的PCADK复合微球的制备方法，具体步骤包括：（1）称取200 mg PCADK溶于2 mL二氯甲烷得到PCADK二氯甲烷溶液，作为油相备用；提取20µL包含凋亡基因的质粒溶液作为内水相备用，其中质粒浓度为5µg/µL；量取60 mL，浓度为1% PVA水溶液作为外水相备用；（2）在13500 rpm/min的均质条件下，将20µL的质粒溶液缓慢滴入PCADK二氯甲烷溶液的冰浴中，继续搅拌2 min，得到乳液；（3）以1500 rpm/min速率不断搅拌1% PVA水溶液，然后将步骤（2）得到的乳液滴入上述PVA水溶液，继续搅拌，挥发除去二氯甲烷，然后离心、洗涤、真空冷冻干燥，‑20℃保存，即得到所述包载凋亡基因的PCADK复合微球。本发明专利技术利用PCADK包载具有治疗作用的质粒，实现了基因的可控递送，提高了基因转染效率。

Preparation of pcadk composite microspheres containing apoptosis gene

【技术实现步骤摘要】
一种包载凋亡基因的PCADK复合微球的制备方法
本专利技术属于药用材料
，具体涉及一种包载凋亡基因的PCADK复合微球的制备方法。
技术介绍
随着科技的进步，从分子层面治疗疾病的方式——基因治疗，越来越受到科研人员的关注，其原理是将有治疗效果的核酸分子（DNA或siRNA等）导入靶细胞内，利用其特异选择性，调控基因表达，进而发挥治疗作用。基因治疗的关键是基因必须有效地靶向目标细胞才能高效的发挥作用，但游离的核酸分子存在诸多缺陷限制其广泛应用，包括体内稳定性差，易被快速清除或被核酸酶降解以及其负电性阻碍与细胞膜相互作用，不能有效地到达靶细胞，导致转染效率低。因此，基因治疗的首要挑战就是发展安全高效的基因载体来保护核酸分子，提高体内循环稳定性，促进核酸分子被靶标细胞摄取，实现高效转染，发挥基因治疗的作用。基因递送载体系统主要分为两类：病毒性载体和非病毒性载体。病毒性载体如逆转录病毒、慢病毒和腺病毒，已经逐步利用多种专门的分子学机制来克服细胞内屏障，实现高效的基因转染。然而由于病毒性载体具有一些固有缺点，包括安全性问题、非特异性、价格昂本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包载凋亡基因的PCADK复合微球的制备方法，其特征在于，具体步骤包括：/n（1）称取100~400 mg PCADK溶于1~4 mL二氯甲烷得到PCADK二氯甲烷溶液，作为油相备用；提取10~50 µL包含凋亡基因的质粒溶液作为内水相备用，其中质粒浓度为5 µg/µL；量取40~100 mL，浓度为1% PVA水溶液作为外水相备用；/n（2）在10000-15000 rpm/min的均质条件下，将包含凋亡基因的质粒溶液缓慢滴入PCADK二氯甲烷溶液的冰浴中，继续搅拌1~5 min，得到乳液；/n（3）以1000~5000 rpm/min速率不断搅拌1% PVA水溶液，然后将步骤（2）得...

【技术特征摘要】
1.一种包载凋亡基因的PCADK复合微球的制备方法，其特征在于，具体步骤包括：
（1）称取100~400mgPCADK溶于1~4mL二氯甲烷得到PCADK二氯甲烷溶液，作为油相备用；提取10~50µL包含凋亡基因的质粒溶液作为内水相备用，其中质粒浓度为5µg/µL；量取40~100mL，浓度为1%PVA水溶液作为外水相备用；
（2）在10000-15000rpm/min的均质条件下，将包含凋亡基因的质粒溶液缓慢滴入PCADK二氯甲烷溶液的冰浴中，继续搅拌1~5min，得到乳液；
（3）以1000~5000rpm/min速率不断搅拌1%PVA水溶液，然后将步骤（2）得到的乳液滴入上述PVA水溶液，继续搅拌，挥发除去二氯甲烷，然后离心、洗涤、真空冷冻干燥，-20℃保存，即得到所述包载凋亡基因的PCADK复合微球。


2.根据权利要求1所述的一种包载凋亡基因的PCADK复合微球的制备方法，其特征在于，所述PCADK按如...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘义，王巧，鲁越，王云，雷宇，黄维，孟渂偲，
申请(专利权)人：四川轻化工大学，
类型：发明
国别省市：四川;51