过敏原特异性免疫球蛋白E致病活性检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种过敏原特异性免疫球蛋白E致病活性检测试剂盒，包括如下试剂，重组人FcεRⅠ‑α亚基、生物素标记生物信息表位混合溶液、辣根过氧化物酶标记链霉亲合素以及生物素标记羊抗人IgE多克隆抗体。本发明专利技术采用受体作为捕获分子，直接捕获与受体结合的sIgE分子；采用生物信息表位合成肽段作为已知抗原，是在亚分子(信息表位)水平上进一步精准检测具有致病活性的抗体，提示患者接触相应过敏原后，出现临床症状的危险性。

【技术实现步骤摘要】
过敏原特异性免疫球蛋白E致病活性检测试剂盒
本专利技术属于免疫球蛋白E分析
，尤其是涉及血清过敏原特异性IgE抗体致病活性检测试剂盒。
技术介绍
在正常情况下，人体免疫系统对病原体发生免疫应答，诱导机体产生对病原体的抵抗能力，从而保护机体免受感染性疾病的困扰。但是，在异常情况下，某些特殊个体对吸入性物质(如花粉)或食入性食物(如牛奶)，产生不利于人体健康的免疫应答，导致人体不适，如皮疹、哮喘、肠胃炎、甚至过敏性休克危及生命，临床称之为“变态反应性疾病”。临床绝大多数变态反应性疾病的发生机制是由免疫球蛋白E(IgE)类抗体介导的，肥大细胞或嗜碱性粒细胞参与。免疫球蛋白E抗体(IgE)具有亲细胞性，其Fc段与肥大细胞或嗜碱性粒细胞表面受体(FcεR)结合，致使肥大细胞或嗜碱性粒细胞致敏。处于致敏状态的细胞，如遇到相应过敏原，位于细胞表面的IgE抗体，通过可变区(VH/VL)结合相应抗原表位，形成“抗原桥”产生级联反应，致使细胞脱颗粒释放生物活性介质，活性介质作用于靶组织或器官导致临床症状。需要指出，sIgE抗体有多个层面的含义，以牛奶过敏患者本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.生物素标记生物信息表位，以及重组人FcεRⅠ-α亚基在过敏原特异性免疫球蛋白E致病活性检测试剂盒中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.生物素标记生物信息表位，以及重组人FcεRⅠ-α亚基在过敏原特异性免疫球蛋白E致病活性检测试剂盒中的应用。


2.一种过敏原特异性免疫球蛋白E致病活性检测试剂盒，其特征在于：包括如下试剂，重组人FcεRⅠ-α亚基、生物素标记生物信息表位混合溶液、辣根过氧化物酶标记链霉亲合素以及生物素标记羊抗人IgE多克隆抗体。


3.根据权利要求2所述的过敏原特异性免疫球蛋白E致病活性检测试剂盒，其特征在于：所述重组人FcεRⅠ-α亚基包被在微孔板上；优选的，采用常规物理吸附方式包被；优选的，包被过程包括如下步骤：首先，用pH9.6碳酸盐缓冲液溶解重组IgE-Fc受体，浓度为3-10微克/毫升，优选5微克/毫升；125微升/孔；室22-25℃)放置4-6小时；再转至2-8度冰箱，过夜(大于16小时)；其次，弃掉微孔板包被缓冲液，加入含2％牛血清白蛋白(BSA)的0.1MpH7.4磷酸盐缓冲液，封闭空白位点，250微升/孔；置于2-8度冰箱内，过夜(大于16小时)；最后，弃掉封闭液，甩干液体风干后塑料真空包装保存，内置干燥剂。


4.根据权利要求2所述的过敏原特异性免疫球蛋白E致病活性检测试剂盒，其特征在于：所述生物素标记生物信息表位混合溶液的制备包括如下步骤，首先，合成生物信息表位肽段，并于N端增加一个赖氨酸并标记生物素；然后将各生物素标记短肽，按等比例混合。


5.根据权利要求2所述的过敏原特异性免疫球蛋白E致病活性检测试剂盒，其特征在于：还包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：李会强，于洋，张蓓，李柳栩，李军普，黄伦辉，崔亚琼，闫娟娟，刘甫，
申请(专利权)人：天津医科大学，
类型：发明
国别省市：天津;12