【技术实现步骤摘要】
PCR反应抗干扰剂试剂及其在全血样品基因扩增中的应用
本专利技术涉及分子生物学和基因诊断技术
,尤其涉及PCR反应抗干扰剂试剂及其在全血样品基因扩增中的应用。
技术介绍
聚合酶链式反应(PCR),是一种DNA的快速扩增技术,自上个世纪80年代诞生之日起,便被迅速应用于医学检测和临床检验,很快就成为医学和诊断学的主要检测手段之一。PCR技术的特点如下:一是被扩增的DNA所需量极小,理论上讲一个分子就可以用于扩增了;二是扩增效率高,目的基因的量成指数形式扩增。全血是进行人类遗传背景分析的主要样本材料,通过提取全血样本中的基因组DNA进行PCR扩增是目前较普及的基因分型技术。但是血液成分复杂,含有大量影响PCR扩增的抑制成分,例如血红蛋白、免疫球蛋白、肝素、脂肪等,为了避免这些抑制成分对扩增反应产生干扰,常用的方法为对全血样本中的核酸进行提取、纯化后,以提取获得的核酸作为模板进行扩增检测。因此核酸的提取和纯化,即样本制备是PCR成功的关键。经典的血液核酸提取方法主要包括两个步骤:裂解细胞和提取核酸。整个提取过 ...
【技术保护点】
1.一种PCR反应抗干扰剂,其包括:/n
【技术特征摘要】
1.一种PCR反应抗干扰剂,其包括:
2.一种全血样本的基因扩增试剂组合,其特征在于,包括:
1×~100×的权利要求1所述的PCR反应抗干扰剂;
还包括PCR扩增试剂,所述PCR扩增试剂包括1×~100×的PCR缓冲液;
1×PCR缓冲液包括:
3.根据权利要求2所述的试剂组合,其特征在于,所述PCR扩增试剂中还包括PCR检测的引物和探针,还包括热启动TaqDNA聚合酶。
4.根据权利要求3所述的试剂组合,其特征在于,所述PCR检测引物为针对人CYP2C9*2(C430T)基因、人CYP2C9*3(A1075C)基因和/或人VKORC1(-G1639A)基因多态性位点的检测引物和探针。
5.根据权利要求4所述的试剂组合,其特征在于,
人CYP2C9*2(C430T)基因引物探针分别为:
野生上游引物F1:5’-GTTGGCGAGCATGGAGCAGC-3’,
突变上游引物F2:5’-GGCCGAGCAGCACTGATTAGT-3’,
公用下游引物R1:5’-CCGTCACTCACACTTGGCT-3’,
公用探针Probe1:5’-ACGCAGCCAGATGACTAGA-3’;
人CYP2C9*3(A1075C)引物和探针分别为:
野生上游引物F3:5’-GCACGATGACAAGACGTGCC-3’,
突变上游引物F4:5’-GCACGATGACAAGCCATAGC-3’,
公用下游引物R2:5’-CTTACGTTGAGATTGA-3’,
公用探针Probe...
【专利技术属性】
技术研发人员:张肖洁,李江浩,崔奇新,李振红,李静静,杜美,付光宇,吴学炜,苗拥军,
申请(专利权)人:郑州安图生物工程股份有限公司,
类型:发明
国别省市:河南;41
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