核桃肽钙螯合物及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种核桃肽钙螯合物及其制备方法。该制备方法包括：(1)将核桃粕经蛋白酶进行酶解反应，以便获得酶解产物；(2)将所述酶解产物进行发酵处理，以便获得发酵产物；(3)对所述发酵产物进行分离处理，以便获得分子量在5kDa以下的核桃肽；(4)将所述核桃肽和钙离子混合，进行螯合反应，以便制备得到所述核桃肽钙螯合物。由该方法制得的产品口感良好，螯合率高，获得的核桃肽钙螯合物可被人体高效的吸收利用，在补钙的同时还可发挥核桃多肽的生物活性功能，具有良好的应用前景。

Calcium chelate of walnut peptide and its preparation

【技术实现步骤摘要】
核桃肽钙螯合物及其制备方法
本专利技术涉及食品领域，具体涉及一种核桃肽钙螯合物及其制备方法。
技术介绍
蛋白资源中含有的丰富的多肽物质，对于人体起着重要的作用。在获取蛋白资源中的多肽物质时，有着不同的处理方式。采用酶解法从蛋白资源中获得多肽具有操作工艺简单、周期短、成本低等优点，但获得的多肽具有苦臭味。采用微生物对蛋白资源进行发酵，所产生的端肽酶可修饰肽链末端的苦味基团，从而可以去除苦味，获得口感风味较佳的多肽，但是操作工艺周期较长，获得的肽链片段较大，活性较低。骨骼中的钙摄入的唯一途径是饮食摄入，通过饮食摄入钙的最常见形式是离子钙、碳酸钙和葡萄糖酸钙。碳酸钙需要借助相关的维生素和酶才能被消化吸收，并且过量摄入碳酸钙可能会导致肠道副作用，如便秘、胀气等；离子钙容易与草酸、植酸等形成氢氧化钙沉淀，吸收利用率低；而以螯合形式存在的钙相较于离子钙具有生物利用率高以及低生物毒性等优点，可运用于功能性食品的开发，也可作为抑菌剂、抗氧化剂、钙补充剂等应用到工业化生产中。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的在于提出一种核桃肽钙螯合物及其制备方法。核桃仁经榨油后得到的核桃粕中蛋白质含量丰富，并且富含对人体具有重要功能的氨基酸，因此可以对核桃粕进行开发。通过对核桃粕进行处理，获取核桃仁中的活性多肽物质，然后所获取的核桃多肽与钙离子鳌合形成核桃肽钙螯合物作为钙补充剂，可以进一步提高人体对钙离子的吸收利用，对钙制剂的研发生产具有指导意义，且对核桃高附加值产品的开发也具有重要意义。专利技术人在研究过程中发现：在获取核桃多肽的过程中，可以通过对核桃粕进行酶解处理，然后结合发酵方法所获得的多肽具有酶解处理和发酵处理的双重优点，分子量小，口感风味俱佳，而且操作可控，工艺简单。例如，在对核桃粕酶解一段时间后，可直接对酶解体系不做任何处理，直接接种微生物进行发酵处理，获得酶解发酵产物。在此过程中不排除酶解和微生物发酵的同时进行，但是经由酶解和发酵，操作工艺简单，而且所获得的多肽口感风味俱佳，分子量小，活性高，提高了核桃粕的利用率。进一步地，经由与钙离子在合适的条件下螯合，可以提高钙离子在人体中的生物利用度。所获得的核桃肽钙螯合物螯合率高，能够作为一种高生物吸收率的钙补充剂和多肽营养剂。具体而言，本专利技术提供了如下技术方案：在本专利技术的第一方面，本专利技术提供了一种核桃肽钙螯合物的制备方法，包括：(1)将核桃粕经蛋白酶进行酶解反应，获得酶解产物；(2)将所述酶解产物进行发酵处理，以便获得发酵产物；(3)对所述发酵产物进行分离处理，以便获得分子量在5kDa以下的核桃肽；(4)将所述核桃肽和钙离子进行螯合反应，以便制备得到所述核桃肽钙螯合物。核桃粕进行蛋白酶酶解结合发酵处理后，所获得的产物中分子量小的多肽含量高，而且产物中多肽的口感良好，风味佳。通过与钙离子进行螯合反应，螯合率高，获得的核桃肽钙螯合物可被人体高效的吸收利用，在补钙的同时还可发挥核桃多肽的生物活性功能，具有良好的应用前景。根据本专利技术的实施例，以上所述的核桃肽钙螯合物的制备方法可以进一步包括如下技术特征：在本专利技术的一些实施例中，步骤(1)中所述蛋白酶为碱性蛋白酶。碱性蛋白酶能够有效水解蛋白质中的肽键，由此可以快速获得分子量的多肽物质。在本专利技术的一些实施例中，碱性蛋白酶的质量占所述核桃粕质量的4％-6％，优选为5％。在利用碱性蛋白酶对核桃粕进行酶解的过程中，合适的碱性蛋白酶用量，可以快速将核桃粕酶解。在该含量条件下，可以实现核桃粕的快速酶解，而且不会导致酶解过度，产生不必要的对于人体无益的小分子肽。在本专利技术的一些实施例中，所述酶解反应的温度为50-60℃，优选为55℃，所述酶解反应的pH为8-9，优选8.7。由此可以实现核桃粕的快速酶解，获得目标多肽。在本专利技术的一些实施例中，所述酶解反应为在55摄氏度条件下恒温震荡处理3小时。由此可以实现核桃粕的快速酶解，获得目标多肽。在本专利技术的一些实施例中，步骤(2)中利用黑曲霉菌进行所述发酵处理。黑曲霉菌作为一种常用的微生物，其用作发酵处理，所产生的端肽酶可以修饰肽链末端的苦味基团，去除苦味，能够获得口感风味俱佳的多肽。在本专利技术的一些实施例中，所述黑曲霉菌以菌悬液的形式接种至所述酶解产物中，所述菌悬液的接种量占所述酶解产物的8～20％，优选为10％，所述发酵处理的温度为30～35摄氏度，优选为30摄氏度，pH为6.0～7.0。在该温度和该pH条件下，进行黑曲霉菌发酵，可以快速获得口感风味俱佳的多肽，且所获得的多肽大小合适。在本专利技术的一些实施例中，步骤(3)中利用分子量为5kDa的超滤膜对所述发酵产物进行分离处理。利用超滤膜进行分离处理，条件温和，不会破坏核桃多肽。在本专利技术的一些实施例中，步骤(4)中所述钙离子来自于无水氯化钙。利用无水氯化钙作为钙源，提供钙离子，无水氯化钙易溶于水，所形成的核桃肽钙螯合物不易溶于有机溶剂，有利于鳌合反应的进行及所形成的核桃肽钙螯合物与游离态钙的分离。在本专利技术的一些实施例中，所述螯合反应包括：将所述核桃肽和所述无水氯化钙按照肽源与钙源的质量比(1:1)-(5:1)，优选为3:1混合进行所述螯合反应。由此可以获得一种钙离子含量高的核桃肽钙螯合物。在本专利技术的一些实施例中，所述螯合反应的温度为40-50℃，优选为45℃，所述螯合反应的pH为7.0-9.0，优选8.0，所述螯合反应的时间为30-50分钟，优选40分钟。由此所制备的核桃肽钙螯合物的钙离子的螯合率高，且所制备获得的核桃肽钙螯合物具有显著提高的钙离子的生物利用率，无论是钙离子还是核桃多肽都可以被人体高效吸收。在本专利技术的一些实施例中，在步骤(1)之前，进一步包括：利用有机溶剂对所述核桃粕进行脱脂处理，所获得的脱脂核桃粕过筛，然后再进行所述酶解反应。经过脱脂处理，能够去除多余的油脂。然后进行过筛处理，例如可以经过60目筛处理，使得脱脂核桃粕均一化，增大后续进行酶解反应以及发酵反应的表面积，快速获得高活性的小分子肽。在本专利技术的一些实施例中，在步骤(3)之前，进一步包括：将所述酶解产物进行沸水浴处理，水浴处理时间为5-15分钟，优选为10分钟。在此条件下进行灭酶处理可以在灭活酶解以及发酵反应的同时保留最大的多肽活性，防止过度酶解，获得具有一定活性的核桃多肽。在本专利技术的一些实施例中，步骤(4)进一步包括：经所述螯合反应后的产物利用无水乙醇进行洗涤处理，离心获得沉淀，至上清液加入钙指示剂不变色终止，获得所述核桃肽钙螯合物。由此可以去除游离钙离子和杂质，获得纯度高的核桃肽钙螯合物。在本专利技术的第二方面，本专利技术提供了一种核桃肽钙螯合物的制备方法，包括：1)将核桃粕经脱脂处理，脱脂后的核桃粕经碱性蛋白酶进行酶解反应，以便获得酶解产物；2)利用黑曲霉菌所述酶解产物进行发酵处理，以便获得发酵产物；3)利用分子量为5kDa的超滤膜对所述发酵产物进行超滤处理，以便获得核桃肽；4)将所述核桃肽和无水氯化钙按照质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核桃肽钙螯合物的制备方法，其特征在于，包括：/n(1)将核桃粕经蛋白酶进行酶解反应，以便获得酶解产物；/n(2)将所述酶解产物进行发酵处理，以便获得发酵产物；/n(3)对所述发酵产物进行分离处理，以便获得分子量在5kDa以下的核桃肽；/n(4)将所述核桃肽和钙离子进行螯合反应，以便制备得到所述核桃肽钙螯合物。/n

【技术特征摘要】
1.一种核桃肽钙螯合物的制备方法，其特征在于，包括：
(1)将核桃粕经蛋白酶进行酶解反应，以便获得酶解产物；
(2)将所述酶解产物进行发酵处理，以便获得发酵产物；
(3)对所述发酵产物进行分离处理，以便获得分子量在5kDa以下的核桃肽；
(4)将所述核桃肽和钙离子进行螯合反应，以便制备得到所述核桃肽钙螯合物。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述蛋白酶为碱性蛋白酶；
任选地，碱性蛋白酶的质量占所述核桃粕质量的4％-6％，优选为5％；
任选地，所述酶解反应的温度为50-60摄氏度，优选为55摄氏度，所述酶解反应的pH为8-9，优选为8.7；
任选地，所述酶解反应为在55摄氏度条件下恒温震荡处理3小时。


3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中利用黑曲霉菌进行所述发酵处理；
任选地，所述黑曲霉菌以菌悬液的形式接种至所述酶解产物中，所述菌悬液的接种量占所述酶解产物的8～20％，优选为10％，所述发酵处理的温度为30～35摄氏度，优选为30摄氏度，pH为6.0～7.0。


4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中利用分子量为5kDa的超滤膜对所述发酵产物进行分离处理。


5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述钙离子来自于无水氯化钙；
任选地，所述螯合反应为将所述核桃肽和所述无水氯化钙按照质量比为1:1-5:1，优选为3:1混合进行所述螯合反应；
任选地，所述螯合反应的温度为4...

【专利技术属性】
技术研发人员：王丰俊，阮国瑞，金凤，张国红，
申请(专利权)人：北京林业大学，
类型：发明
国别省市：北京;11